男性相關參數與精子頂體酶活性關系分析

陸文昊 陳雪君 楊歡利 諸溢揚★

近些年研究發現精子總量和活力并不能完全反映精子受精能力，精子頂體酶活性與精卵結合的受精率呈現了正相關性，所以精子的頂體酶活性也應作為評判男性生育能力的一個重要指標。本資料將從不同年齡、不同活力、不同形態回顧性分析相應的頂體酶活性，現將結果報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2015年2月至2017年2月期間在臺州醫院不孕與優生科就診的217例男性患者，年齡18～50歲。婚后正常性生活＞1年未育，無外傷及遺傳性疾病家族史，無性功能障礙病史，體檢未發現有明顯睪丸、附睪及輸精管異常。另外排除女方不孕因素以及由男女雙方因素造成的不育。

1.2 精液標本收集及檢查 禁欲2～7 d 后手淫取精液置于干燥無菌的取精杯中，置37℃水浴箱內液化，采用計算機輔助精子分析系統（CASA），檢查結果參照世界衛生組織精液分析標準第五版。

1.3 精子形態分析 采用改良巴氏染色法進行染色，采用人工在光鏡下計數200個精子重復計數兩次分析精子形態。根據世界衛生組織精液分析標準第五版評估，以正常形態精子率≥4%為正常組，正常形態精子率＜4%為異常組。

1.4 頂體酶測定 按照深圳華康生物醫學工程有限公司頂體酶試劑盒的檢查方法進行。判斷標準：正常值為48.2～218.7μIU／106精子。

1.5 研究方法 按年齡分為＜31、31～35、＞35 歲三組，分別測定每組的頂體酶活性；按照世界衛生組織精液分析標準第五版PR精子＜32%為弱精癥，分別測定PR＜10、10＜PR＜32、精液檢查正常組的頂體酶活性；結合世界衛生組織精液分析標準第四和第五版的標準，設立形態＜4%、4%～15%、＞15%三組，比較三者的頂體酶活性。

1.6 統計學方法 采用SPSS 13.0統計軟件。計量資料以（±s）表示，組間差異采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各年齡組頂體酶活性比較 按年齡分為＜31歲、31～35歲、＞35歲三組的頂體酶活性的平均值分別為（65.48±15.38）μIU/106精 子、（58.76±16.65）μIU/106精子、（59.83±16.25）μIU/106精子，各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 不同活力組頂體酶活性比較 按精子PR＜10、10＜PR＜32、精液檢查正常組的頂體酶活性三組的頂體酶活性的平均值分別為（39.06±14.01）μIU/106精子、（58.26±17.22）μIU/106精 子、（61.60±16.69）μIU/106精子，其中PR＜10與10＜PR＜32組和正常組差異顯著（P＜0.05），PR＜10與 10＜PR＜32 組和正常組組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 不同染色形態組頂體酶活性比較 形態＜4%、4%～15%、＞15%三組頂體酶活性的平均值分別為（41.77±14.48）μIU/106精 子、（56.71±17.65）μIU/106精 子、（57.91.±18.03）μIU/106精 子， 其中形態＜4%組與4%～15%組和＞15%組差異顯著（P＜0.05），4%～15%組和 ＞15% 組組間差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

研究數據表明，育齡夫婦的不孕不育癥發病率為10%～15%，且有逐年遞增的趨勢。其中30%～40%為男性原因導致［1］。導致男性不育的原因有藥物、煙草、毒品等外部因素以及遺傳、分子突變、禁欲時間等內部因素［2-3］。精子頂體酶為特化溶解酶，相連于頂體膜，屬于胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶，其活性高低與精子對卵母細胞的穿透能力相關［4］。頂體酶活性較低時不但會導致卵母細胞卵丘復合物分解受到影響，也會對精子穿透卵母細胞透明帶產生一定影響，最終誘發男性不育［4］。臨床上常采用CASA來評估男性的精液質量，但該技術并不能全面地評估男性的生育能力，尤其是無法解釋不明原因的男性不育［5-6］。因此，將精子頂體酶活性測定作為評估精子質量的一項重要指標是值得推廣的。

Langlois等［7］報道頂體酶活性越低，IVF受精率也越低。隨后，Sharma等［8］認為，精子頂體酶活性的測定，在判定精子受精能力方面比傳統的精子數量和運動能力更具客觀性，而且發現了頂體酶活性與受精率之間具有正相關性。作者按年齡分為＜31、31～35、＞35歲三組檢測其頂體酶活性發現各組間差異不顯著（P＞0.05），這與邴晏如等［9］精子頂體酶活性在 36～50歲年齡段顯著降低（P＜0.05）研究不一致。這可能與其高齡組的樣本量的較少有關，隨著二孩政策的放開樣本量的擴充，或者更具有統計學意義。作者發現精PR＜10與10＜PR＜32組的和正常組頂體酶活性差異顯著（P＜0.05），PR＜10 與 10＜PR＜32組和正常組頂體酶活性組間差異不顯著（P＞0.05），這與丁錦麗等［10］、黃世若等［11］研究的結果是一致的，證明了精子質量與精子頂體酶是有正相關性的。作者同時發現形態＜4%組與4%～15%組和 ＞15% 組差異顯著（P＜0.05），這與黃永漢等［12］、劉錦宏等［13］的研究是一致的，頂體酶活性與精子畸形率呈負相關，畸形率數值降低頂體酶活性亦會隨之降低。

關如意等［13］發現頂體酶的低下極有可能存在精卵結合障礙，這與孫琴等［14］的研究是一致的，孫琴等發現不明原因的男方精子頂體酶活性＜36IU/106精子時，受精率僅為47.7%，鑒于較低的受精率，可避免IUI治療，建議首選IVF。而王欽［15］等在研究中發現，當精子頂體酶活性低于＜30μIU/106時可能會出現受精率較低甚至完全不受精的情況，此時應該選擇行單精子顯微注射（ICSI）來避免此類現象發生。

綜上所述，精子頂體酶是評估男性生育能力的一個重要指標，對男性不育癥的診斷和治療都有較高的應用價值，因此有必要將精子頂體酶活性的測定作為男性不育癥的常規項目來檢測，從而給臨床更多的診療思路和參考價值。

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［3］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics inunexplainedmale infertility．Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

［4］ Howes L, Jones R． Interactions between zona pellucida glycoproteins and sperm proacrosin /acrosin during fertilization． J Reprod Immunol, 2002,53(1-2):181．

［5］ 蒲江波,高建,唐雪蓮．少、弱、畸形精子癥患者體外精子的PR、PR+NP以及頂體酶活性在不同時間段的下降速率比較．中華男科學雜志,2015,21(8):733-736．

［6］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics in unexplainedmale infertility． Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

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［9］ 邴晏如,莫和國,黃健云．男性不育患者精子形態與精漿鋅和精子頂體酶活性關系的研究．國際檢驗醫學雜志,2014,35(13):1708-1709．

［10］ 丁錦麗,楊菁,張怡,等．男性精子頂體酶活性與精液常規參數的相關性分析．中國性科學,2015,24(8):95-97．

［11］ 黃世若．精液多項檢測參數對男性不育癥的探討．醫學理論與實踐,2017,30(9):1368．

［12］ 黃永漢,鄧天勤,李穎嫦,等．精子形態與頂體酶活性關系分析．檢驗醫學與臨床,2009,6(9):677-680．

［13］ 劉錦宏,李小珍．男性不育癥患者精液質量與精子頂體酶活性關系分析．長治醫學院學報,2013,27(2):125-127．

［13］ 關如意,史中娜,任新玲,等．輔助生殖技術中原因不明性不孕患者的病因分析．中國婦幼保健,2013,28(32):5324-5327．

［14］ 孫琴,李鴻儒,梁元姣,等．精子頂體酶檢測對不明原因不孕夫婦助孕治療方案選擇的臨床意義．中華男科學雜志,2017,23(2):152-156．

［15］ 王欽,牛煥付,劉莊．體外短時受精周期中第二極體排出率與精子頂體酶活性關系的探討．中國優生與遺傳雜志,2015,23(5):104-106．