豬偽狂犬病的診斷

牛緒東 ， 馬洪超 ， 劉建柱 ， 張元瑞

(山東農業大學動物科技學院 ， 山東 泰安 271018)

3 剖檢變化

死產胎兒頭部、臀部及股內側腹下出現血樣水腫(見圖2)，胎衣和胎兒大多比較新鮮，死胎呈現不同程度的軟化現象，其心臟(見圖3)、肝臟和腎臟表現明顯。病死仔豬可見腦膜充血、出血(見圖4)；全身淋巴結腫大、出血、壞死(見圖5)，特別是下頜淋巴結病變嚴重；肺臟腫大、淤血、出血，呈現間質性肺炎的變化；肝臟腫大、淤血、出血，并有多量壞死灶(見圖6)；脾臟腫大、出血、壞死(見圖7)；腎臟輕度出血；扁桃體及鼻咽部周圍出血、腫脹、糜爛、壞死(見圖8)。

4 實驗室診斷

無菌采取病死仔豬的肝臟、脾臟和下頜淋巴結，分別觸片、革蘭染色、鏡檢，均未發現有細菌存在。隨后用病死仔豬的腦、下頜淋巴結和脾臟提取病毒的DNA進行PCR技術檢測，按照DNA提取試劑盒說明書，對采取的病料進行DNA提取。利用由北京偉嘉集團山東檢測中心提供的引物進行PCR擴增，目的片段大小292 bp。采用25 μL PCR體系：DNA樣本1 μL；2×TaqMaster Mix 12.5 μL；引物F/R各0.5 μL；滅菌dd H2O 11.5 μL。PCR程序：95 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s、60 ℃ 30 s、72 ℃ 30 s，32個循環；72 ℃ 7 min，4 ℃保存。PCR產物通過0.8%瓊脂糖凝膠電泳觀察結果。可看到清晰的偽狂犬病病毒目的條帶(見圖9)。

圖2 死產胎兒股內側腹下出現血樣水腫

圖3 死胎心臟輕度軟化，心冠血樣水腫

圖4 病死仔豬腦膜充血、出血

圖5 病死仔豬淋巴結腫大、出血、壞死

圖6 病死仔豬肝臟腫大、淤血、出血，且出現多量壞死灶

圖7 病死仔豬脾臟腫大、出血、壞死

圖8 病死仔豬扁桃體及鼻咽部黏膜腫脹、出血、壞死

根據該豬場本次豬病流行情況、臨床癥狀和病理剖檢，初步診斷為豬偽狂犬病或豬2型鏈球菌病(腦炎型)。經實驗室進行的細菌檢測結果和偽狂犬病病毒PCR技術分析，最后對本場本次豬病確診為豬偽狂犬病。

圖9 電泳結果

M：DL-2 000 DNA Marker； 1：陽性對照；2：陰性對照； 3、4：檢測樣本

5 討論與小結

5.1 健豬與病豬、帶毒豬直接接觸可感染本病。該豬場近來發生的偽狂犬病，可能是由于發病之前畜主盲目引進了兩頭帶毒的孕豬，進場后直接混入母豬群，沒有進行嚴格地隔離觀察飼養而引發本病；又由于本場畜主忽視了偽狂犬病的防疫和豬場內外的衛生消毒，故引起了該病的發生與流行。該小型豬場的消毒意識淡薄，一般只打掃衛生，很少進行消毒。

5.2 確診后的處理方案 全場豬只普免一次豬偽狂犬疫苗，間隔3周后再加強免疫注射一次，免疫劑量均為1頭份(2 mL)。普免3 d后，場內外進行全面消毒，重點是被污染的種豬舍。帶豬消毒使用三氯異氰尿酸鈉，環境消毒使用2%氫氧化鈉溶液。

5.3 豬偽狂犬病防控，預防豬偽狂犬病使用最多且比較安全的方法是：仔豬3日齡首免，35日齡二免，65日齡加強免疫；種豬跟胎免疫，或采取每年4月份、8月份和12月份各免疫注射1次。

5.4 偽狂犬病凈化問題的重視程度現已提高到國家層面。主要措施是做好生物安全工作，制定并執行合理的免疫程序，結合嚴格的定期檢疫，及時淘汰陽性豬，建立無偽狂犬病的種豬場。

略)