氣相色譜法測定果汁中毒死蜱的殘留量

韓 華 邰 亮 李紅梅 楊抗震

1（寶應縣產品質量監督檢驗所，江蘇寶應225800）2（寶應縣有機食品質量監督檢驗中心，江蘇寶應225800）

3（國家有機食品質量監督檢驗中心（江蘇），江蘇寶應225800）

果汁是一種營養豐富、有利于人體健康的水果制品，但是在水果生長過程中，為了保證其產量和品質，農藥被廣泛使用，因而果汁也不可避免地有農藥殘留，果汁中農藥殘留的安全問題不容忽視。毒死蜱是世界上應用最廣泛的有機磷殺蟲劑之一，具有高效、低毒等特性，對害蟲具有觸殺、胃毒和熏蒸作用，作為農用殺蟲劑被廣泛應用于果樹病蟲害防治中，但是由于果農大量使用或使用方法不當，造成水果及其制品中的殘留問題也日漸突出。

為了有效控制毒死蜱農藥殘留安全問題，進一步提高果汁的質量安全，開展果汁中毒死蜱殘留的檢測顯得十分重要，而國家標準中關于農藥殘留的分析檢測方法尚未細化到果汁，因此，本試驗通過對試驗條件的選擇和優化，建立了一種可快速準確測定果汁中毒死蜱殘留量的GC-FPD分析方法，并將建立的方法應用于能力驗證，取得了滿意的結果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試樣

果汁，能力驗證樣品，由中國檢驗檢疫科學研究院測試評價中心（CNAS認可的能力驗證提供者）提供。

1.1.2 儀器

7890A氣相色譜儀，配火焰光度檢測器（FPD）、化學工作站，美國Agilent公司；RV10 digtial旋轉蒸發儀，德國IKA儀器公司；KQ-500DE超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；MS digtal旋渦混合器，德國IKA儀器公司；實驗室常用玻璃器皿等。

1.1.3 試劑

乙腈，色譜純，上海安譜實驗科技股份有限公司；氯化鈉，分析純，使用前于140℃烘烤4 h；丙酮，分析純，重蒸，永華化學科技（江蘇）有限公司；毒死蜱標準溶液，質量濃度為100 mg/L，o2si smart solutions提供；實驗室用水為Milli-Q超純水。

1.2 試驗方法

1.2.1 樣品處理

稱取10.0 g左右（精確至0.000 1 g）搖勻后的果汁樣品，置于100 mL比色管中，加入40 mL乙腈，搖勻后放入超聲波清洗器中超聲提取20 min，濾紙過濾，在濾液中加入7 g氯化鈉，用旋渦混合器劇烈震蕩1 min后，室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層，吸取乙腈相10 mL，用旋轉蒸發儀濃縮至近干，丙酮定容到2.0 mL，經孔徑0.25 μm濾膜過濾后待測。

1.2.2 氣相色譜分析條件

HP-5毛細管氣相色譜柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm（膜厚）；進樣口溫度200℃；檢測器溫度230℃；柱溫，采用程序升溫，初始溫度80℃（保持2 min），以25℃/min的升溫速率升溫至230℃（保持10 min）。

載氣為高純氮，流速1.0 mL/min；燃氣為氫氣，流速75 mL/min；助燃氣為空氣，流速100 mL/min。

進樣方式為不分流進樣，進樣體積1.0 μL，以保留時間定性，峰面積定量。

1.2.3 標準溶液的配制

將100 mg/L毒死蜱標準溶液用丙酮稀釋成10 μg/mL的毒死蜱工作標準溶液，貯存于冰箱中，試驗時根據實際需要稀釋成相應的標準梯度溶液。

2 結果與討論

2.1 樣品前處理

提取溶劑方面，通過參考國家農業部標準NY/T 761—2008和徐陸妹、王丹等的文獻，選擇了乙腈作為提取溶劑。乙腈極性較強，可與水互溶，試驗中，果汁樣品經乙腈溶解，超聲提取一定時間后加入適量的氯化鈉，通過鹽析作用將水脫去，這樣既可以解決因果汁含水量較高造成提取難的問題，又能有效地減少雜質對檢測的干擾，試驗結果表明，乙腈的提取效果較好，同時獲得了較高的回收率。

提取方法方面，試驗中使用超聲法代替勻漿法對樣品進行提取，不僅操作簡單，提取效率高，還可以避免交叉污染。

2.2 色譜條件

色譜柱的選擇，由于毒死蜱極性較弱，根據氣相色譜分析中色譜柱的“極性相似性”選擇原理，本試驗選用了弱極性的HP-5色譜柱；進樣口溫度采用了毒死蜱的沸點溫度，程序升溫選擇了低初始柱溫80℃開始，同時對載氣流速、檢測器溫度、柱程序升溫條件進行多次試驗篩選后，最終確定了1.2.2色譜分析條件。毒死蜱標準溶液（200 ng/mL）色譜圖見圖1，含毒死蜱農殘的果汁色譜圖見圖2。由圖1、圖2可知，在該條件下，毒死蜱的響應值較高，峰形較為對稱，基線平穩，并且樣品中雜質峰較少。

圖1 毒死蜱標準溶液色譜圖（200 ng/mL）

圖2 含毒死蜱農藥殘留的果汁的色譜圖

2.3 方法的線性范圍和檢出限

將10 μg/mL毒死蜱標準工作溶液用丙酮逐級稀釋成 25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL的標準溶液，按照1.2.2色譜分析條件進行測定，以峰面積為縱坐標，質量濃度（ng/mL）為橫坐標，繪制標準曲線，見圖3。試驗證明，毒死蜱在25 ng/mL～400 ng/mL之間線性關系良好，線性方程為y=2.537 44 x+2.213 59，相關系數為0.999 91，以信噪比等于3為標準，測得毒死蜱的檢出限為0.012 mg/kg。

圖3 毒死蜱的標準曲線

2.4 方法精密度

在空白果汁樣品中以100 ng/mL的添加水平加入毒死蜱標準溶液，按照1.2.2色譜分析條件，重復測定6次，記錄各測定次數的測定值，分別計算測定值的平均值和相對標準偏差，測定結果如表1所示。由表1可知，測定結果的RSD為1.75%，說明精密度良好，準確度較高。

表1 精密度試驗結果（n=6）

2.5 加標回收率

在空白果汁樣品中以50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL3個添加水平加入毒死蜱標準溶液，按照本方法規定的提取和檢測條件測定其回收率，每個水平平行測定6次，測定結果如表2所示。由表2可知，添加在果汁樣品中毒死蜱農藥的回收率在91.3%～94.1%之間，RSD為2.66%～3.38%。

表2 回收率試驗（n=6）

2.6 樣品適用性

采用本研究檢測方法對能力驗證樣品（果汁1，果汁2）中毒死蜱殘留量進行檢測，測定結果見表3。能力驗證試驗取得了滿意的結果（|Z|≤2），說明該方法有著較好的準確性和實用性，適合果汁中毒死蜱農藥殘留的檢測。

表3 果汁中毒死蜱殘留量的測定結果

3 結論

本試驗建立了測定果汁中毒死蜱殘留量的GC-FPD方法。樣品經乙腈超聲提取后，旋轉蒸發濃縮，選擇HP-5毛細管氣相色譜柱，用帶火焰光度檢測器的氣相色譜儀定量測定。通過試驗確證，該方法線性范圍較寬，檢測靈敏度、準確度及精密度較好，檢出限較低，符合農藥殘留檢測方法的要求，能夠滿足實際應用的需要。

［1］SIBEL，GULO.Simultaneous determination of various pesticides in fruit juices by HPLC-DAD ［J］.Food Control，2005（16）：87-92.

［2］賈慧嫻，孫劍寧，張亮，等.毒死蜱在蔬菜、水果和土壤中殘留動態的研究現狀［J］.中國糖料，2008（2）：70-72.

［3］張雪蓮，張耀海，焦必寧，等.分散液液微萃取-氣相色譜聯用檢測果汁中有機磷類農藥殘留［J］.高校化學工程學報，2013，27（6）：974-979.

［4］中華人民共和國農業部.NY/T 761—2008蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定［S］.北京：中國農業出版社，2008.

［5］徐陸妹，樓冰冰.蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥的檢測方法研究［J］. 中國衛生檢驗雜志，2007，17（5）：852-853.

［6］王丹.毛細管氣相色譜測定濃縮果汁中甲胺磷的殘留量［J］.化學工程與裝備，2010（3）：146-147.