檢測Notch3、Lgr5、NF-kB在大腸腺癌組織中表達情況的意義

呂洪波，王媛媛，趙麗然

（黑龍江省大慶龍南醫院消化內科，黑龍江 大慶 163453）

檢測Notch3、Lgr5、NF-kB在大腸腺癌組織中表達情況的意義

呂洪波，王媛媛，趙麗然

（黑龍江省大慶龍南醫院消化內科，黑龍江 大慶 163453）

目的：探討檢測Notch3、Lgr5（富含亮氨酸重復序列G蛋白偶聯受體5）、NF-kB（核轉錄因子KB）在大腸腺癌組織中表達情況的意義。方法：檢測50例大腸腺癌患者癌組織中Notch3、Lgr5、NF-kB的MOD（光密度）值，然后對比這三個指標在不同大腸腺癌病理組織中的MOD值。結果：Notch3、Lgr5、NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值高于其在T1＋T2中、Dukes分期A＋B中、不存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值，差異具有統計學意義（P＜0.05）。結論：Notch3、Lgr5、NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中存在高表達的狀態。

NF-kB；Lgr5；Notch3；大腸腺癌；表達

大腸腺癌是一種發病率較高的消化系統惡性腫瘤。此病的發病率在我國所有惡性腫瘤中排在第三位。由于此病具有病情進展快、復發率和轉移率高的特點，因此，如何準確地評估此病患者的病情和預后就成為了臨床上關注的焦點。Notch3、Lgr5（富含亮氨酸重復序列G蛋白偶聯受體5）、NF-kB（核轉錄因子KB）都是臨床上常見的腫瘤標志物[1]。有研究證實，Notch3、Lgr5、NF-kB與大腸腺癌的發生、發展和轉移存在密切的關系。在本次研究中，我們主要探討檢測Notch3、Lgr5、NF-kB在大腸腺癌組織中表達情況的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年2月至2016年12月在黑龍江省大慶龍南醫院接受手術治療的50例大腸腺癌患者作為研究對象。這50例患者中有男26例，女24例；其年齡為42～73歲之間，平均年齡為（60.26±5.12）歲。他們均簽署了自愿參加本次研究的知情同意書。本次研究獲得了我院醫學倫理委員會的批準。取這50例患者的大腸腺癌組織。將取得的大腸腺癌組織做成石蠟標本，以供本次研究使用。

1.2 實驗儀器和方法

1.2.1 實驗用儀器 本次研究使用的儀器為：德國LEICA公司提供的BM2135型切片機、HI1220型烤片機、DM2500型光學顯微鏡、冰箱、壓力鍋。

1.2.2 實驗方法 使用免疫組織化學染色法檢測石蠟標本中Notch3、Lgr5、NF-kB的MOD值，具體的檢測方法是：將具有抑制NF-KB、Lgr5、Notch3陽性表達作用的病理組織作為陽性對照品。用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照品。嚴格按照一抗說明書的規定進行操作，先對石蠟標本進行脫蠟脫水處理，然后對標本進行滅活內源性過氧化酶、抗原修復、血清封閉加抗、顯色、復染和封片等操作[2]，最后由經驗豐富的醫師分析并計算標本的MOD值。

1.3 觀察指標

觀察NF-KB、Lgr5、Notch3在不同大腸腺癌病理組織中（包括腫瘤體積大小不同的大腸腺癌病理組織、分化程度不同的大腸腺癌病理組織、浸潤深度不同的大腸腺癌病理組織、Dukes分期不同的大腸腺癌病理組織和有無淋巴結轉移的大腸腺癌病理組織）的MOD值。

1.4 統計學方法

使用SPSS18.0統計學軟件對本次研究中的數據進行統計學分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

Notch3、Lgr5、NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值高于其在T1＋T2中、Dukes分期A＋B中、不存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳情見表1。

表1 Notch3、Lgr5、NF-kB在不同大腸腺癌病理組織中的MOD值（±s）

表1 Notch3、Lgr5、NF-kB在不同大腸腺癌病理組織中的MOD值（±s）

病理特征指標 n Lgr5 NF-kB Notch3腫瘤大小 ＜10cm 24 0.1560±0.0248 0.2376±0.0221 0.3298±0.0462≥ 10cm 26 0.1501±0.0220 0.2065±0.0783 0.3500±0.0298分化程度 高 13 0.1673±0.0082 0.2411±0.0712 0.3452±0.0272中33 0.1723±0.0046 0.2629±0.0141 0.3372±0.0282低4 0.1593±0.0367 0.2365±0.0781 0.3523±0.2463浸潤深度 T1＋T2 10 0.1592±0.0301 0.1634±0.0380 0.2472±0.0521 T3 ＋ T4 40 0.1720±0.0051* 0.2681±0.0162 0.3568±0.0439 Dukes分期 A＋B 26 0.1588±0.0104 0.1701±0.0143 0.3021±0.0164 C＋D 24 0.1886±0.0137* 0.3421±0.0175 0.3774±0.0237淋巴結轉移 有 21 0.1907±0.0050* 0.3501±0.0198 0.3801±0.0230無29 0.1581±0.0072 0.1748±0.0130 0.3049±0.0172

3 討論

NF-kB、 Notch、Lgr5都是臨床上重要的腫瘤標志物。它們與腫瘤的形成、發展和轉移存在密切的關系。不過，目前關于這三個腫瘤標志物與大腸腺癌的關系在臨床上的研究較少。

在本次研究中，我們將 MOD值作為觀察指標，是考慮MOD值能夠準確客觀地反應免疫組化圖片染色的強度，并能間接地反應癌組織中腫瘤標志物的陽性相對濃度[3]。

本次研究的結果顯示，Notch3、Lgr5、NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值較高。其中，Notch3在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值較高可能與其對腫瘤細胞的分化、發育、生長和凋亡具有促進作用有關[4]。Lgr5在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值較高可能與其具有多項分化、增值和自我更新的能力有關。NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中的MOD值較高可能與其對腫瘤細胞的浸潤、分化和轉移具有促進作用有關。

本次研究的結果證實，Notch3、Lgr5、NF-kB在浸潤T3＋T4中、Dukes分期C＋D中、存在淋巴結轉移的癌組織中存在高表達的狀態。檢測Notch3、Lgr5、NF-kB在大腸腺癌組織中表達情況可作為臨床上判斷大腸腺癌患者病情和預后的主要方法。

[1] 趙小芳,王紅.Notch信號通路在結直腸腫瘤干細胞中的作用[J].中國當代醫藥,2015,(14):18-20.

[2] 呂轉,李礪鋒,范智蕊,等.干細胞基因Lgr5在食管鱗癌組織中的表達及其臨床意義[J].腫瘤防治研究,2016,43(10):863-869.

[3] 隋華,付曉伶,潘樹芳,等.PI3K/Akt/NF-κB通路調控ABCB1/P-gp介導的人結腸癌細胞多藥耐藥的研究[J].中國癌癥雜志,2014,11(2):106-111.

[4] 任文匯.Notch信號通路在B細胞分化發育以及B細胞淋巴瘤中作用的研究進展[J].中國腫瘤生物治療雜志,2016,23(2):282-286.

R735

B

2095-7629-（2017）20-0038-02

呂洪波，女，1972年出生，副主任醫師