TACE聯(lián)合腫瘤間質(zhì)對(duì)介入治療肝細(xì)胞癌患者免疫功能的影響

魏 童 黃 河 劉宏偉 (新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院血管腫瘤介入科，新疆 烏魯木齊 8300)

TACE聯(lián)合腫瘤間質(zhì)對(duì)介入治療肝細(xì)胞癌患者免疫功能的影響

魏 童 黃 河1劉宏偉 (新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院血管腫瘤介入科，新疆 烏魯木齊 830011)

目的探討單純經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞(TACE)聯(lián)合腫瘤間質(zhì)對(duì)介入治療肝細(xì)胞癌(HCC)患者免疫功能的影響。方法90例HCC患者隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組行TCAE治療，實(shí)驗(yàn)組行TCAE聯(lián)合經(jīng)皮肝瘤內(nèi)注射碘油化療藥物進(jìn)行腫瘤間質(zhì)治療，另選取體檢健康者為空白組45例。分別采用流式細(xì)胞技術(shù)及酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定患者治療前、治療后1、2、3、4 w外周血 T 淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)和血清可溶性白細(xì)胞介素-2受體(SIL-2R)水平。結(jié)果治療前實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組T淋巴細(xì)胞亞群和SIL-2R水平與空白組比較差異顯著(P<0.05)；治療1、2、3、4 w后CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值明顯升高，CD8+和SIL-2R水平明顯下降(P<0.05)。治療1、2、3 w后，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組CD8+和CD4+/CD8+比值無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，治療4 w后CD4+/CD8+有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，治療1、2、3、4 w后，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組CD3+、CD4+和SIL-2R水平均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)組不良反應(yīng)較對(duì)照組輕。結(jié)論TACE聯(lián)合腫瘤間質(zhì)能夠明顯提高患者的免疫能力，改善患者的免疫抑制，且能夠彌補(bǔ)單純使用TACE治療的不足。

單純經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞聯(lián)合腫瘤間質(zhì)；肝細(xì)胞癌；免疫功能；可溶性白細(xì)胞介素-2受體

肝的微環(huán)境存在各種細(xì)胞因子和趨化因子，是影響肝細(xì)胞癌(HCC)進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素〔1，2〕。腫瘤免疫主要與T淋巴細(xì)胞的免疫有關(guān)，T淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)是反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的一個(gè)指標(biāo)〔3〕，特別是CD4+/CD8+比值是反映細(xì)胞免疫平衡與否的敏感指標(biāo)。白細(xì)胞介素(IL)-2可通過調(diào)節(jié)腫瘤患者體內(nèi)細(xì)胞免疫功能而發(fā)揮抗腫瘤作用，已成為HCC免疫治療領(lǐng)域的一種主要細(xì)胞因子〔4〕。本研究旨在探討經(jīng)肝動(dòng)脈化療栓塞(TACE)聯(lián)合腫瘤間質(zhì)治療對(duì)HCC患者細(xì)胞免疫功能的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年1月至2015年1月在新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院就診的HCC患者90例，均經(jīng)臨床癥狀、體征、甲胚蛋白(AFP)、影像學(xué)檢查、穿刺活檢診斷，其中男49例，女41例，年齡26～75〔平均(48.8±5.2)〕歲。隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各45例，對(duì)照組單純使用TACE治療；實(shí)驗(yàn)組使用TACE聯(lián)合注射適量碘油化療藥物進(jìn)行腫瘤間質(zhì)治療。治療前3個(gè)月和治療后1個(gè)月未曾服用或注射過免疫增強(qiáng)或免疫抑制藥物。選擇同期來我院健康體檢正常者為空白組45例，男24例，女21例，年齡27～69歲，近3個(gè)月內(nèi)未曾服用或注射過免疫增強(qiáng)或免疫抑制藥物。各組年齡及性別無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組年齡〔(48.1±6.4) vs (50.5±7.5)歲〕、性別(男/女 22/23 vs 27/18例)、肝功能Child分級(jí)(A級(jí)33 vs 30例，B級(jí)12 vs 15例)、臨床分期(Ⅰ期11 vs 9例，Ⅱ期18 vs 21例，Ⅲ期16 vs 15例)、病灶直徑(<5 cm 11 vs 13例，5～10 cm 26 vs 23例，>10 cm 8 vs 9例)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2主要儀器和試劑 美國(guó)BD公司FACSCalibur流式細(xì)胞儀、美國(guó) BIO-RAD公司BIO450型酶標(biāo)儀、廣州市安杰生物技術(shù)有限公司的血清可溶性IL-2受體(SIL-2R)測(cè)定酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒；美國(guó)Beckman-Coulter公司的CD3-PE、CD4-FITC、CD8-FITC單抗，北京四環(huán)生物制藥有限公司的重組IL-2、揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司的碘海醇注射液。

1.3治療方法 對(duì)照組：1%利多卡因局麻，采用股動(dòng)脈穿刺將5F導(dǎo)管插入肝總動(dòng)脈或肝固有動(dòng)脈。根據(jù)造影明確腫瘤部位、腫瘤大小、供血血管情況，注入表阿霉素30～50 mg+絲裂霉素10 mg+奧沙利鉑100～150 mg+碘化油10～30 ml進(jìn)行栓塞，注入量根據(jù)實(shí)際情況而定，對(duì)HCC患者進(jìn)行TACE 治療。實(shí)驗(yàn)組：在行TACE的基礎(chǔ)上進(jìn)行CT復(fù)查，根據(jù)患者術(shù)中瘤灶內(nèi)碘油化療藥物沉積情況，結(jié)合數(shù)字減影血管造影(DSA)或CT確定進(jìn)針路線，采用COOK公司20G無水酒精穿刺針，透視監(jiān)測(cè)下經(jīng)皮肝穿刺至肝腫瘤碘油沉積稀疏靶區(qū)，注入造影劑，觀察造影情況，根據(jù)殘余瘤灶大小緩慢注入適量碘油化療藥物行腫瘤間質(zhì)治療并觀察其彌散范圍。用藥：阿霉素10～20 mg +絲裂霉素5 mg+奧沙利鉑50～100 mg+碘化油10～20 ml。

1.4觀察指標(biāo) 于治療前1 w、治療后2、3、4 w清晨空腹采血，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)T細(xì)胞亞群；ELISA 法測(cè)定SIL-2R水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)。治療后不良反應(yīng)：觀察治療后48 h內(nèi)肝區(qū)疼痛、胃腸道反應(yīng)、發(fā)熱等情況。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)、單因素方差分析、χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1治療前后3組T細(xì)胞亞群及SIL-2R水平比較 治療前實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組T 淋巴細(xì)胞亞群和SIL-2R水平與空白組差異顯著(P<0.05)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療1、2、3、4 w后實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值明顯升高，CD8+和SIL-2R水平明顯下降(均P<0.05)。見表1。治療后1、2、3 w，兩組CD8+和CD4+/CD8+比值無顯著差異(P=0.597，0.921，0.519；0.219，0.095，0.057)，治療4 w后CD4+/CD8+比值有顯著差異(P=0.088；0.002)。而治療1、2、3、4 w后，兩組CD3+、CD4+和SIL-2R水平均有顯著差異(P=0.047，0.001，0.001，0.000；0.026，0.001，0.005，0.000；0.033，0.033，0.000，0.000)。

2.2治療后48 h兩組患者不良反應(yīng)比較 治療后48 h對(duì)照組肝區(qū)疼痛〔37例(82.22%)〕、發(fā)熱〔38例(84.44%)〕發(fā)生率顯著高于實(shí)驗(yàn)組〔25例(55.56%)、27例(60.00%)，χ2=7.465,6.702,P=0.012,0.018〕,胃腸道反應(yīng)〔18例(40.00%)、17例(37.78%)〕差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.047,P=1.000)。

表1 3組治療前后各免疫指標(biāo)變化情況比較

與治療前比較：1)P<0.05；與空白組比較：2)P<0.05；與對(duì)照組比較：3)P<0.05

3 討 論

T細(xì)胞亞群是構(gòu)成細(xì)胞免疫的重要部分〔5〕。CD3+存在于所有細(xì)胞表面，反映T淋巴細(xì)胞的總量，在免疫反應(yīng)的啟動(dòng)、誘導(dǎo)和效應(yīng)中起關(guān)鍵作用。T細(xì)胞可分為輔助性T細(xì)胞(CD4+)和抑制性T細(xì)胞(CD8+)。通常T淋巴細(xì)胞亞群在外周血中是保持一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞以及CD4+/CD8+比例的百分比和數(shù)量保持恒定的狀態(tài)下才能發(fā)揮抗腫瘤作用〔6〕。T淋巴細(xì)胞亞群發(fā)生任何變化都會(huì)導(dǎo)致免疫功能的改變，從而影響抗腫瘤的免疫效應(yīng)。CD4+/CD8+比值的恒定維持著細(xì)胞免疫功能的平衡，常作為衡量腫瘤患者機(jī)體抗腫瘤免疫功能的重要指標(biāo)之一，評(píng)價(jià)腫瘤患者免疫治療后機(jī)體免疫功能恢復(fù)的標(biāo)志。sIL-2R可競(jìng)爭(zhēng)性與IL-2 結(jié)合，從而使游離 IL-2降低，削弱IL-2 介導(dǎo)的抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)腫瘤的免疫逃逸，對(duì)宿主免疫應(yīng)答起負(fù)調(diào)節(jié)作用〔7〕。TACE對(duì)于晚期HCC具有良好的改善效果，其機(jī)制是由于局部化療誘導(dǎo)癌細(xì)胞壞死伴隨血管栓塞導(dǎo)致的一系列病理和生理變化〔8〕。然而單純的TACE治療HCC還具有一定的局限性，其在很大程度上取決于對(duì)癌癥的血液供應(yīng)及栓塞劑-碘油化療藥物的注入劑量，影響細(xì)胞瘤部位碘油化療藥物的沉積，致使腫瘤病灶難以滅活〔9〕。

本研究結(jié)果表明，治療后，HCC患者的免疫功能明顯提高與以往研究結(jié)果相同〔3〕。與單純 TACE治療比較，TACE聯(lián)合腫瘤間質(zhì)治療后HCC患者的細(xì)胞免疫功能升高顯著，聯(lián)合治療使腫瘤壞死更徹底，集體的免疫功能提高幅度更大，降低了腫瘤復(fù)發(fā)的概率。另外聯(lián)合治療后的不良反應(yīng)總體上比單純TACE治療較輕，一定程度上減輕了HCC患者的生理及心理負(fù)擔(dān)，很大程度上改善了患者的預(yù)后療效。IL-2能夠活化 T 細(xì)胞，刺激免疫細(xì)胞增殖分化，使B 細(xì)胞分泌免疫球蛋白活化體液免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤的能力。聯(lián)合治療能夠明顯增強(qiáng)機(jī)體的抗腫瘤的免疫能力。

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R735.7

A

1005-9202(2017)24-6103-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.24.042

1 新疆醫(yī)科大學(xué)第五附屬醫(yī)院胃腸外科

劉宏偉(1964-)，男，主任醫(yī)師，講師，主要從事消化道腫瘤的外周介入研究。

魏 童(1984-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化道腫瘤的外周介入研究。

〔2017-03-15修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)