粗脂肪的提取和定量測定的對比研究

毛一博 吳怡昌

摘 要：脂肪組織中，測定脂肪所占比例的實驗方法有很多種，結合現有實驗條件，嘗試使用三種沸點石油醚，采用索氏提取法對肥肉中的粗脂肪進行提取，從而分析出豬肉組織中粗脂肪的含量。同時，將采用氣相色譜分析法得到的數據與三種沸點石油醚得到的數據及提取速度做了比對，得出相應的結論，為類似的課題實驗提供了具有一定參考價值的實驗數據。

關鍵詞：粗脂肪；提取；定量測定；對比研究

據人民網等媒體報道，一項研究報告稱，中國目前肥胖人口達3.25億人，增幅超過美國、英國和澳大利亞。這個數字在未來20年還可能增加一倍，并有加速提高的趨勢。肥胖癥常常會伴發多種慢性疾病，是嚴重影響人們健康和生活質量的疾病之一，已成為世界各國面臨的嚴重公共健康問題。專家指出，肥胖癥、艾滋病、吸毒和酗酒共同組成了新的四大社會醫學難題。開展與肥胖相關的課題研究是當前很多學者義不容辭的任務。本文通過運用索氏提取法、氣相色譜法來探究粗脂肪的提取和含量測定，從而為研究肥胖相關的課題提供參考。

一、實驗過程

（一）索氏提取法

1.實驗方法

索氏提取法：以索氏提取器為提取儀器，一般采用低沸點有機溶劑（石油醚）回流抽提，除去樣品中的粗脂肪，以樣品與殘渣重量之差，計算粗脂肪含量。由于有機溶劑的抽提物中除脂肪外，還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂肪物質，因而抽提法測定的結果只能是粗脂肪。

2.實驗儀器和設備

索氏抽提器、水浴鍋、鐵架臺、分析天平、濾紙、研缽、培養皿、攪拌機、干燥箱、蒸餾儀器、試管、燒杯、玻璃棒、鐵架臺、50 ml燒杯、250 ml燒杯、500 ml燒杯、酒精燈、藥匙、鑷子、膠頭滴管、10 ml量筒、小漏斗、架盤天平、表面皿、pH試紙、溫度計。

3.材料和試劑

新鮮豬肥肉末40 g、Na2SO4溶液、石油醚（沸點為30℃～60℃、60℃～90℃和90℃～120℃）等。

4.索氏抽提器的結構及作用原理

索氏抽提器由抽提管、接收瓶和回流冷卻器三個部分組成，在抽提時，抽提管下端與接收瓶相接，而冷卻器則與抽提管上端相接，抽提管經過管與接收瓶相通，以供醚的蒸汽由接收瓶進入抽提管中。而提取液則通過虹吸管重新回流到接收瓶中。接收瓶在電熱套上加熱，所形成的蒸汽沿管進入冷卻器，并于冷卻器中冷凝。被冷凝的醚滴入抽提管中，進行抽提，將脂肪抽出。當吸有脂肪的溶劑超過虹吸管的頂端時，則發生虹吸作用，使溶劑回流到接收瓶中，一直到溶劑吸凈則虹吸管自動吸空回流到接收器的溶劑繼續受熱蒸發。再經過冷卻器冷凝重新滴入抽提管中，如此反復提取，將脂肪全部抽出。稱取脂肪重量即可知脂肪的百分含量。

5.實驗步驟

（1）取兩份肉末各20 g，并加入Na2SO4溶液，放置在干燥箱中干燥。注意：樣品在烘箱中干燥時，時間不能過長，以免不飽和的脂肪酸受熱氧化而增加質量。

（2）用濾紙包好已干燥好的肉末樣品。注意：樣品應干燥后研細，裝樣品的濾紙筒一定要緊密，不能往外漏樣品。

（3）在索氏提取器中加入藥品，并將濾紙包放入抽提管中，進行實驗。注意：加入石油醚至接收瓶內容積的處。

（4）實驗結果

①使用30℃～60℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是17.71%。

②使用60℃～90℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是18.83%。

③使用90℃～120℃的石油醚提取樣品中的粗脂肪含量是18.53%。

（二）氣相色譜分析

1.實驗方法

氣相色譜分析法

2.原理：

氣相色譜法是利用色譜柱中裝入的固定液，用載氣把與分析的混合物帶去色譜柱，在一定溫度和壓力條件下，各氣體組分載氣和固定液薄膜的氣、液兩相中的分配系數不同，隨著載氣的向前流動，樣品各組分在氣、液兩相中反復進行分配，使脂肪酸各組分的移動速度有快有慢，從而將各組分開。

3.氣相色譜數據分析結果

經過氣相色譜分析法得出1000 ul里有18.3245 ug粗脂肪，所以100 g里有1.8324 g，即樣品中脂肪的含量為18.324%。

二、兩種方法對比分析得到的結論

1.經過索氏提取法得到樣品中脂肪含量的范圍在17.71%～18.83%之間。

2.經過氣相色譜分析法得出樣品中脂肪的含量為18.324%。

3.使用30℃～60℃的石油醚得到的數據與氣相色譜分析法得到的數據偏差為0.61%；使用60℃～90℃石油醚得到的數據與氣相色譜分析法得到的數據偏差為0.51%；使用90℃～120℃石油醚得到的數據與氣相色譜分析法得到的數據偏差為0.21%。

因此，使用90℃～120℃石油醚得到的數據較為準確。

4.使用沸點為90℃～120℃的石油醚抽提的速度比60℃～90℃的石油醚的速度要快，低沸點石油醚速度最慢。

三、本次研究性課題的創新點及意義

1.本次實驗課題采用氣相色譜法和索氏提取法兩種實驗方式進行脂肪含量的分析，打破了以往單一實驗方法進行類似的測定，同時，對兩種方法得到的數據進行了對比分析，得出具有一定參考價值的結論。

2.本次實驗中，以氣相色譜分析的數據作為基準，對使用低沸點石油醚（30℃～60℃）、中沸點石油醚（60℃～90℃）與高沸點石油醚（90℃～120℃）進行提取的方法進行了對比分析，發現了使用沸點為90℃～120℃的石油醚抽提的速度大于沸點為60℃～90℃的石油醚的抽取速度，而低沸點30℃～60℃石油醚的抽取速度最慢，高沸點石油醚抽取速度最快。

3.用高沸點石油醚得到的數據偏差小，結果更準確，為此類實驗提供了具有一定參考價值的實驗數據。

參考文獻：

[1]王秀奇，秦淑媛，高天慧，等.基礎生物化學實驗[M].北京：高等教育出版社，2002.

[2]黃啟超.豬肉脂肪概念及其測定方法研究[J].食品科技，2006（8）.

[3]宋凡.氣相色譜法測定豬肉脂肪酸組成[J].飼料工業，2007（11）.

[4]王玉玲，丁淑芬，宋巖.索氏抽提法測定粗脂肪含量方法的探討[J].糧食加工，2014.