COX-2及Her2/neu在結(jié)直腸癌旁組織中表達(dá)意義

周菲菲 黃 榮 蔣 軍 曾曉紅 何 瀚 鄒育超 陳 默 閔燕飛

COX-2及Her2/neu在結(jié)直腸癌旁組織中表達(dá)意義

周菲菲 黃 榮 蔣 軍 曾曉紅 何 瀚 鄒育超 陳 默 閔燕飛

目的檢測(cè)結(jié)直腸癌和旁癌組織中的COX-2及Her2/neu的表達(dá)情況，探究COX-2及Her2/neu表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床各指標(biāo)的關(guān)系，并探討其臨床意義。方法選取結(jié)直腸癌患者200例，收集各研究對(duì)象的結(jié)直腸癌病理標(biāo)本和癌旁正常組織各一份，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法(S-P法)，檢測(cè)結(jié)直腸癌組織和癌旁正常組織中COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)表達(dá)。結(jié)果結(jié)直腸癌中Her2/neu表達(dá)情況：蛋白質(zhì)表達(dá)陽性占86.0%，明顯高于對(duì)照組Her/neu陽性表達(dá)(24.0%)(P<0.05)。結(jié)直腸癌中Her2/neu表達(dá)與Dukes分期和肝轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。結(jié)直腸癌中COX-2表達(dá)陽性率為89.0%，而癌旁正常組織中其陽性表達(dá)率為32.0%，兩者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，過表達(dá)與腫瘤肝轉(zhuǎn)移和Dukes分期有關(guān)(P<0.05)，與Her2/neu表達(dá)有正相關(guān)性(P<0.05)。結(jié)論采用免疫組織化學(xué)法探究蛋白質(zhì)的表達(dá)，結(jié)腸癌COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)的表達(dá)率高于癌旁正常組織；COX-2及Her2/neu蛋白質(zhì)的表達(dá)與肝轉(zhuǎn)移和Dukes有關(guān)，而且它們之間的表達(dá)具有正相關(guān)性(P<0.05)。

免疫組織化學(xué)；結(jié)直腸癌；Her2/neu；COX-2

結(jié)直腸癌是常見的惡性腫瘤，在我國，發(fā)病率呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類的健康[1-2]。在美國的研究調(diào)查顯示：在惡性腫瘤中，結(jié)直腸癌的發(fā)病率占據(jù)第三位，死亡率很高，隨著生活習(xí)慣的變化，發(fā)病的年齡呈現(xiàn)年輕化的趨勢(shì)[3]。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的報(bào)道，到了2005年，由于直腸癌的死亡人數(shù)已經(jīng)到達(dá)了800萬人，而且逐年還在增加，預(yù)計(jì)到2035年，全球的病人將到達(dá)1600萬人。我國目前的現(xiàn)狀：死亡率接近發(fā)達(dá)國家，但其中有些城市超過了發(fā)達(dá)的國家，形勢(shì)不容樂觀。在臨床研究上，一般根據(jù)腫瘤的大小、病理學(xué)分期來判斷病程[4]。結(jié)直腸癌一般是由多種因素、分步驟一步一步發(fā)展導(dǎo)致的，由于人們的對(duì)此的認(rèn)知不夠，對(duì)自身結(jié)腸癌的發(fā)現(xiàn)通常較晚，就診時(shí)大多數(shù)人都已經(jīng)進(jìn)入了癌癥的中晚期，而主要的治療手段是盡可能的手術(shù)切除，這樣嚴(yán)重影響了手術(shù)的效果和切除率，生存率較低。所以尋求早期的診斷方法和治療的方法已經(jīng)成為了熱點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 基本資料

選取佛山市第一人民醫(yī)院2013年6月至2015年7月行手術(shù)切除的結(jié)直腸癌患者100例，男性患者65例，女性患者35例，平均年齡(45.3±6.8)歲，年齡39～78歲。由本院同一組醫(yī)師分別收集各研究對(duì)象的結(jié)直腸癌病理標(biāo)本和癌旁正常組織各一份，經(jīng)病理組織學(xué)確診符合要求后進(jìn)行后續(xù)研究。

入選標(biāo)準(zhǔn)：行過手術(shù)切除的患者；之前未經(jīng)過腫瘤治療；手術(shù)后都確診病理；沒有他的惡性腫瘤。

排除標(biāo)準(zhǔn)：患有其他惡性腫瘤的疾病；年齡<18周歲；患有家族性腺瘤性息肉病。

1.2 研究方法

將采集并行常規(guī)處理后的結(jié)直腸癌和旁癌組織石蠟病理標(biāo)本不間斷切片為3 μm左右的厚度，觀察并選擇出輪廓較清楚的切片，隨后采用鏈菌素抗生物素蛋白-過氧化物酶免疫組化法(streptavidin-perosidase conjugated method，S-P法)檢測(cè)直腸癌和旁癌組織中的COX-2及Her2/neu的表達(dá)情況[5]，并進(jìn)行陰性和陽性對(duì)照。根據(jù)免疫組化染色后，在顯微鏡下的觀察結(jié)果，根據(jù)顯色程度判斷陽性強(qiáng)度。0分代表細(xì)胞染色不顯著或沒有染色；1分代表弱陽性，即細(xì)胞著色比較淺；2分代表中等陽性，即細(xì)胞中度著色為棕黃色等；3分為強(qiáng)陽性，即細(xì)胞著色為深棕色。在200×倍數(shù)的顯微鏡下隨機(jī)觀察5個(gè)視野并每個(gè)計(jì)一百個(gè)細(xì)胞，當(dāng)視野中觀察的陽性細(xì)胞數(shù)占比總計(jì)數(shù)細(xì)胞百分比為0、0～25%、25%～50%、50%～75%和75%～100%時(shí)，則陽性細(xì)胞表達(dá)分別記為0分、1分、2分、3分和4分。之后計(jì)算以上兩種評(píng)分的乘積，0～2、3～5、6～8和9～12分別以-、+、++和+++代表，其中-和+為低表達(dá)，++和+++為過表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料的比較采用均數(shù)表示，均數(shù)比較用t進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料的比較采用χ2檢驗(yàn)，三者的相關(guān)性采用非條件Logistic回歸分析。P<0.05視為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)直腸癌和正常組織中Her2/neu表達(dá)情況

癌組織標(biāo)本和對(duì)照組中,Her2/neu蛋白質(zhì)陽性表達(dá)率和過表達(dá)率高于癌旁組織，兩者間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 結(jié)直腸癌和癌旁組織中Her2/neu的表達(dá)情況

2.2 結(jié)直腸癌和癌旁組織中COX-2表達(dá)情況

結(jié)直腸癌和癌旁組織中，COX-2表達(dá)情況具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 結(jié)直腸癌和癌旁組織中COX-2的表達(dá)情況

2.3 結(jié)直腸癌臨床病理特征與Her2/neu的關(guān)系

結(jié)直腸癌中Her2/neu表達(dá)與其是否有腸梗阻、年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)，與Dukes分期、臨床是否有肝臟轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見表3。

2.4 COX-2表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系

COX-2表達(dá)與結(jié)直腸癌是否有腸梗阻、年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)，與Dukes分期是否有肝臟轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，見表4。

表3 Her2/neu表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

表4 COX-2表達(dá)與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系(例，%)

3 討論

在結(jié)直腸癌早期的階段，并沒有什么明顯的癥狀，很容易被人們所忽視，若是出現(xiàn)了腹痛，排便習(xí)慣改變、腸梗阻癥狀已經(jīng)遍布全身的情況，那已經(jīng)是中晚期的直腸癌[6-7]。由于人們的認(rèn)識(shí)不夠，沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)直腸癌，并進(jìn)行早期的診斷，延誤了最佳的治療的時(shí)間，治療的效果和生存率降低[8-10]。通過對(duì)結(jié)直腸癌的基因的研究，對(duì)直腸癌癥狀的認(rèn)識(shí)的深化，在診斷上做到早診斷，進(jìn)行綜合的治療，提高治療的效率[11-13]。近十年的大量文獻(xiàn)報(bào)道，在手術(shù)后的生存率始終在58%左右，手術(shù)后的生存率沒有得到較好的提高，主要的原因還是就診時(shí)間較晚，化療效果不明顯，復(fù)發(fā)率很高。而提高直腸癌患者手術(shù)后的生存率已經(jīng)成為當(dāng)前臨床工作者的難題，目前對(duì)于直腸癌進(jìn)行研究，大家一致認(rèn)為做到早診斷、早治療以及綜合性的治療能從根本上提高患者手術(shù)后的治愈率和生存率[14-15]。

本次研究通過對(duì)HER2/meu和COX-2蛋白質(zhì)表達(dá)情況的探究，設(shè)置住院患者和健康人群兩組進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，使用免疫組織化學(xué)法(S-P法)，檢測(cè)直腸癌組的癌組織和相應(yīng)的正常組織中的COX-2及Her/neu蛋白質(zhì)的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)Her/neu在癌組織標(biāo)本中， Her/neu蛋白質(zhì)的陽性表達(dá)率和過表達(dá)率高于癌旁的正常組織，兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在結(jié)直腸癌的標(biāo)本和癌旁正常組織中，COX-2蛋白質(zhì)的陽性表達(dá)率和過表達(dá)率高于癌旁的正常組織，其兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。COX-2及Her/neu蛋白和結(jié)直腸癌的Dukes分期和肝臟轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)正相關(guān)。為藥物的治療提供了客觀的依據(jù)。

綜上所述，發(fā)現(xiàn)COX-2及Her/neu在直腸癌中的表達(dá)高于在正常值組織中的表達(dá)，而它們的表達(dá)同臨床指標(biāo)有關(guān)系。在直腸癌中COX-2及Her/neu的表達(dá)有正相關(guān)性，為靶向藥物的治療提供了客觀的依據(jù)。

[1] 李道娟,李 倩,賀宇彤.結(jié)直腸癌流行病學(xué)趨勢(shì)〔J〕.腫瘤防治研究,2015,42(3):305-310.

[2] 中華人民共和國衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局.中國結(jié)直腸癌診療規(guī)范(2015版)〔J〕.中華消化外科雜志,2015,14(10):783-799.

[3] 張 玥,石菊芳,黃慧瑤,等.中國人群結(jié)直腸癌疾病負(fù)擔(dān)分析〔J〕.中華流行病學(xué)雜志,2015,36(7):709-714.

[4] 李 鵬,王擁軍,陳光勇,等.中國早期結(jié)直腸癌及癌前病變篩查與診治共識(shí)〔J〕.中國醫(yī)刊,2015,31(2):14-14.

[5] King G,Payne SF,Murray GI.A highly sensitive detection method for immunohistochemistry using biotinylated tyramine〔J〕.J Pathol,2015,183(2):237-241.

[6] Czerniecki BJ,Scheff AM,Callans LS,et al.Immunohistochemistry with pancytokeratins improves the sensitivity of sentinel lymph node biopsy in patients with breast carcinoma〔J〕.Cancer,2015,85(5):1098-1103.

[7] Gehrig PA,Van LL,Olatidoye B,et al.Estrogen receptor status,determined by immunohistochemistry,as a predictor of the recurrence of stage I endometrial carcinoma〔J〕.Cancer,2015,86(10):2083-2089.

[8] 宋均飛,劉 弋.EGFR、HER2在結(jié)直腸癌患者血清與組織中的表達(dá)及其臨床意義分析〔J〕.中華疾病控制雜志,2016,20(4):403-407.

[9] 溫達(dá)雄,王 軍,殷 燕,等.結(jié)直腸癌組織中HER2表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究〔J〕.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2016,15(3):227-229.

[10] 劉傳淵,夏來陽,張 磊,等.HER2和HER3在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.結(jié)直腸肛門外科,2015,21(3):182-186.

[11] Sarode VR,Xiang QD,Christie A,et al.Evaluation of HER2/neu Status by Immunohistochemistry Using Computer-Based Image Analysis and Correlation With Gene Amplification by Fluorescence In Situ Hybridization Assay: A 10-Year Experience and Impact of Test Standardization on Concordance Rate〔J〕.Arch Pathol Lab Med,2015,139(7):922-923.

[12] Bevitt DJ,Milton ID,Piggot N,et al.New monoclonal antibodies to oestrogen and progesterone receptors effective for paraffin section immunohistochemistry〔J〕.J Pathol,2015,183(2):228-232.

[13] 鄭 劼,江龍委,姚 露,等.DC-CIK細(xì)胞治療晚期結(jié)直腸癌的臨床療效〔J〕.中國腫瘤生物治療雜志,2015,22(4):459-464.

[14] Takeda H,Akakura K,Masai M,et al.Androgen receptor content of prostate carcinoma cells estimated by immunohistochemistry is related to prognosis of patients with stage D2 prostate carcinoma〔J〕.Cancer,2015,77(5):934-940.

[15] CaryB.Aarons,NajjiaN.Mahmoud,張榮欣,等.現(xiàn)代結(jié)直腸癌外科治療的思考〔J〕.中國普通外科雜志,2015,24(4):459-466.

TheExpressionandSignificanceofCOX-2andHer2/neuinColorectalCancerAdjacentTissues

ZHOUFeifei,HUANGRong,JIANGJun,etal.

TheFirstPeople'sHospitalofFoshan,Foshan,528000

ObjectiveTo investigate the expression of COX-2 and Her2/neu in colorectal cancer and adjacent tissues,and to explore the relationship between the expression of COX-2 and Her2/neu and the clinical indexes of colorectal cancer,and its clinical significance.Methods200 cases of colorectal cancer patients were selected to collect the colorectal cancer specimens and adjacent normal tissues.The immunohistochemical method (SP method) was used to detect the expression of COX-2 and Her2/neu protein expression.ResultsThe expression of Her2/neu in colorectal cancer was 86.0%,which was significantly higher than that of the control group (24.0%) (P<0.05).Her2/neu expression in colorectal cancer was associated with Dukes stage and liver metastasis (P<0.05).The positive rate of COX-2 expression in colorectal cancer was 89.0%,while the positive expression rate of COX-2 in colorectal cancer was 32.0%,the difference was statistically significant (P<0.05),overexpression of COX-2 was related with tumor liver metastasis and Dukes staging (P<0.05),and was positively correlated with Her2/neu expression (P<0.05).ConclusionThe expression of COX-2 and Her2/neu protein in colorectal cancer is higher than that in adjacent normal tissues.The expression of COX-2 and Her2/neu protein is related to liver metastasis and Dukes,and they are positively correlated by immunohistochemistry(P<0.05).

Immunohistochemistry;Colorectal cancer;Her2/neu;COX-2

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1745～1747)

佛山市衛(wèi)生和計(jì)生局醫(yī)學(xué)科研項(xiàng)目(編號(hào)：2015248)

528000 佛山市第一人民醫(yī)院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.11.002

R735.3+7

A

1001-5930(2017)11-1745-03

2016-10-07

2017-07-10)

(編輯：吳小紅)