西藏加查縣瀕危藥材桃兒七真葉分化研究

張高翔，金濤，王利

(1.西藏職業技術學院 農業科學技術學院，西藏 拉薩 850000；2.西藏自治區農牧科學院 農業資源與環境研究所，西藏 拉薩 850000)

·中藥農業·

西藏加查縣瀕危藥材桃兒七真葉分化研究

張高翔1*，金濤2，王利1

(1.西藏職業技術學院 農業科學技術學院，西藏 拉薩 850000；2.西藏自治區農牧科學院 農業資源與環境研究所，西藏 拉薩 850000)

目的探索一種促進野生桃兒七真葉分化的一種方法。方法以采自西藏加查縣經過自然休眠的野生桃兒七種子為試材，首先分別用0、25、50、100、150、200 mg·L-1的GA進行處理，篩選出最適合真葉分化濃度；用0、25、50、100、150、200 mg·L-1的6-BA進行處理，篩選出最適合真葉分化的濃度；再用 100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比對桃兒七真葉分化的影響。結果100 mg·L-1質量濃度GA處理下真葉的分化率最高，分別為84.1%；同時真葉畸形率僅為3.3%，是比較理想的處理濃度。結論在桃兒七種子萌發過程中添加適量的GA、6-BA，及二者的配比，能夠有效的提高桃兒七真葉的分化率，但過高的激素含量會造成較高的真葉畸形率，畸形苗不能夠存活。

西藏加查；桃兒七；真葉；分化

桃兒七 Sinopodophullumhexandrum為小蘗科植物，多年生草本，稀有種。殘存于東亞，呈零星分布，是東亞和北美植物區系中的一個洲際間斷分布的物種，對研究東亞、北美植物區系有一定的科學價值。通常生于高海拔地帶的平坦山谷及透光度好的林下、林緣或草灌叢中，海拔下限 2700 m，海拔上限4300 m。桃兒七的根莖與果實均有較高的藥用價值 。在西藏主要分布在昌都、察隅、波密、林芝米林、亞東、定結、隆子、吉隆和加查等地[1]。

筆者在開展桃兒七的人工栽培研究過程中發現桃兒七的種子具有較強的休眠性，帶帽出土現象嚴重，并且具有真葉分化困難等特性。桃兒七為雙子葉植物，在種子萌發時由胚中的子葉提供營養物質，眾所周知子葉是種子在形成時胚就具有的一部分，而之后的生長依賴于分化形成的真葉進行光合作用提供營養，因而真葉的分化對其存活和生長至關重要。針對桃兒七在人工栽培過程中真葉不分化的問題，筆者以西藏加查縣桃兒七為對象，進行了認為干擾促進真葉分化的研究，以為大規模人工栽培奠定基礎，并合理保護桃兒七野生資源。

1 材料與方法

1.1 材料選擇

選用2015年8～9月在西藏加查縣崔久溝采集的野生桃兒七種子。該實驗選擇棕紅色，呈卵狀三角形，飽滿緊實、無病蟲害的種子。在實驗室內經過6個月的自然休眠，于2016年4月中旬進行播種。經過發芽實驗證實，通過自然休眠期的桃兒七種子，其發芽率可達95%以上。

本實驗的營養土選用蛭石、草炭、珍珠巖，按照1∶1∶1等比例進行配制，并對配制好的營養土進行121 ℃高溫滅菌20 min。

2 方法

2.1 不同濃度GA對真葉分化的影響

選取0、50、100、150、200 mg·L-1的GA溶液，在播種后用噴壺每天清晨噴灑一次(每個處理約20 mL)，直至分化出真葉。其中每個處理用直徑23 cm的花盆播種10粒種子，覆土深度約1 cm，并重復3次，30～50 d后統計真葉分化情況：

2.2 不同濃度6-BA對真葉分化的影響

選取0、25、50、100、150、200 mg·L-1的6-BA溶液，在播種后用噴壺每天清晨均勻噴灑一次(每個處理約20 mL)，直至真葉分化出。其中每個處理用直徑23 cm的花盆，播種10粒種子，覆土深度約1 cm，并重復3次，30 d后統計真葉分化情況：

2.3 100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比對桃兒七真葉分化的影響

選取100 mg·L-1GA并與0、25、50、100、150 mg·L-1的6-BA溶液相配合，在播種后用噴壺每天清晨噴灑一次(每個處理約20 mL)，直至真葉分化出。其中每個處理用直徑23 cm的花盆，播種10粒種子，覆土深度約1 cm并重復3次，30 d后統計真葉分化情況：

3 結果與分析

3.1 不同濃度GA對真葉分化的影響

由表1可知，在空白對照(CK)，三個處理未能觀察到明顯的真葉分化，但出苗率高達97.1%；在100、150 mg·L-1兩個質量濃度GA處理下真葉的分化率最高，分別為84.1%、83.5%；隨著GA質量濃度的升高，真葉分化率反而有所下降，并且真葉的畸形率也有所上升。

在100、150 mg·L-1兩個質量濃度GA處理下真葉的分化率比較高，但150 mg·L-1質量濃度處理下，雖得到了較高的真葉分化率，但畸形率也較高。

表1 不同濃度GA對真葉分化的影響

3.2 不同濃度6-BA對真葉分化的影響

由表2可知，五個質量濃度的6-BA對桃兒七進行處理，50、100 mg·L-1處理的情況近似，分別為80.6%、78.9%；低質量濃度下(25 mg·L-1)真葉分化率較低，為19.3%；同時畸形率也比較低，為6.7%；而隨著質量濃度的升高(150 mg·L-1)真葉分化率有所下降，為72.0%，同時畸形率也比較高，為34.8%。

表2 不同濃度6-BA對真葉分化的影響

3.3 100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比對桃兒七真葉分化的影響

由表3可知，100 mg·L-1GA與50 mg·L-16-BA配比時真葉的分化率較高，為82.5%，但此濃度配比下的真葉畸形率也比較高，為達為54.3%；而在其他配比濃度時此基礎上不管是濃度升高還是減低，真葉分化率都有所降低；100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比，真葉的畸形率都較高，都占到該配比濃度真葉分化率的一半以上。

表3 100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比對桃兒七真葉分化的影響

圖1 桃兒七種子

圖2 桃兒七經過100 mg·L-1 GA處理后的真葉分化情況

圖3 瀕臨死亡的畸形真葉

圖4 養分殆盡的桃兒七子葉

4 討論

本實驗通過對不同濃度GA對真葉分化的影響、不同濃度6-BA對真葉分化的影響、100 mg·L-1GA與不同質量濃度6-BA配比對桃兒七真葉分化的影響的研究，可以看出在100 mg·L-1質量濃度GA處理下真葉的分化率最高，分別分別為84.1%；同時真葉畸形率僅為3.3%，是比較理想的處理濃度。

眾所周知子葉是種子在形成時胚就具有的一部分，一般在種子萌發時提供營養物質，營養消耗殆盡便自然脫落；真葉才是植物真正意義上的葉子，為植物生長發育提供物質基礎。在野生條件下桃兒七的真葉能夠正常分化，但在人工栽培過程中，桃兒七真葉不分化或分化率低的是一個大問題。具體原理原因目前尚不沒有比較明確的結論，可能是野生環境和人工栽培環境在溫度、濕度、光照上的不同所造成的。

在實驗過程中還發現有些試材經過處理后分化出了真葉，但真葉為畸形(特別是在前期進行浸種處理的預實驗)，該部分植株也不能夠長時間存活，在栽培過程中多枯萎死亡，有些高濃度的處理，如100 mg·L-1GA與50 mg·L-16-BA配比，雖然可以獲得82.5%的真葉分化率，但真葉畸形率同時也高達54.3%，后期死苗率較高，也不適用。

本實驗通過對西藏加查縣桃兒七真葉分化的研究，找到了適于桃兒七真葉分化的濃度，為桃兒七人工栽培奠定了基礎，對更好的保護和開發西藏桃兒七資源具有重要的現實意義。

[1] 澤仁旺姆，于順利，尼珍，郭尚磊.獨一味等 13 個藏藥植物種在西藏的分布和資源量調查[J].北京農業，2010：56-59.

[2] 虞泓.桃兒七[J].植物雜志，1999(3)：6-7.

[3] 劉海軍，徐艷，蘇國慶，等.桃兒七的研究進展[J].中草藥，2004，35(1)：98- 100.

[4] 陳毓亨.我國鬼臼類植物資源的研究[J].藥學學報，1979，14(2)：101-107.

[5] 馬紹賓，徐正堯，胡志浩.桃兒七繁殖生物學研究[J].西北植物學報，17(1)：49-55.

[6] 鮑隆友，楊曉梅，劉玉軍.西藏野生藏藥材馴化技術研究[J].中國林副特產，2008，2(1)：22-25.

StudyonLeafDifferentiationofEndangeredMedicinalMaterials-Sinopodophyllumhexandrum

ZHANG Gaoxiang1*，JIN Tao2，WANG Li1

(1.TibetVocationalTechnicalCollege，CollegeofAgriculturalScienceandTechnology，Lhasa850000，China； 2.TibetAcademyofAgricultureandAnimalHusbandryScience，AgriculturalResourceandEnvironmentResearchInstitute，Lhasa850000，China)

Objective：The study is aimed to find a method for leaf differentiation ofSinopodophyllumhexandrum.MethodsThe natural dormant seeds of wildS.hexandrumharvested in Jiacha of Tibet were collected.GA was added to screen the optimal concentration，then 6-BA was used to screen the optimal concentration for study of leaf differentiation ofS.hexandrum.ResultsThe leaf differentiation ofS.hexandrumwas 84.1% under 100 mg·L-1of GA，and the malformation rate was 3.3%.ConclusionGA and 6-BA could promote leaf differentiation ofS.hexandrum，however high concentration of plant hormones may result in the malformation of the leaf.

Tibet Jiacha；Sinopodophyllumhexandrum；leaf；differentiation

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.9.012

2016年度西藏自治區自然科學基金項目(2016ZR-ZX-05)

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張高翔，講師，研究方向：瀕危藏藥人工繁殖及栽培；E-mail：365069645@qq.com

2017-03-06)