鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸對慢性阻塞性肺病患者血清胸腺基質淋巴生成素和嗜酸粒細胞陽離子蛋白的影響

張海濤，張映銘，王彩英，方申存，許 斌，劉 丹

·臨床醫學·

·論著·

鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸對慢性阻塞性肺病患者血清胸腺基質淋巴生成素和嗜酸粒細胞陽離子蛋白的影響

張海濤，張映銘，王彩英，方申存，許 斌，劉 丹

目的考察鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸治療慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)前后對血清中胸腺基質淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin, TSLP)和嗜酸粒細胞陽離子蛋白(eosinophilic cationic protein, ECP)水平的影響。方法收集2013年10月至2016年10月在南京大學醫學院附屬南京胸科醫院收治且確診的COPD急性發作期患者106例，經醫院倫理委員會批準，并經患者簽署知情同意書后，將全部患者隨機分為2個組:對照組(51例)和觀察組(55例)，另外選擇同期50例健康體檢者為健康對照組。結果治療前，對照組和觀察組患者的1秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second, FEV1)占預計值比例較低(P<0.05)，TSLP 和ECP水平較高(P<0.05)；治療后，FEV1占預計值百分增高(P<0.05)，TSLP 和ECP水平減少(P<0.05)。與對照組比，觀察組的FEV1占預計值百分比明顯增高(P<0.05)，TSLP 和ECP水平明顯減少(P<0.05)。2組在治療過程中未發生明顯的不良反應。與對照組比，觀察組的總有效例數較多(P<0.05)。結論鹽酸氨溴索聯用N-乙酰半胱氨酸治療慢性COPD安全有效，可間接降低血清TSLP和ECP水平。

鹽酸氨溴索；N-乙酰半胱氨酸；慢性COPD；胸腺基質淋巴生成素；嗜酸粒細胞陽離子蛋白

慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)是常見的呼吸系統疾病，發病多見于50歲以上中老年人。臨床發病緩慢，病程較長，表現為咳嗽、咳痰，部分患者伴氣短或喘息，發病早期癥狀較輕，反復咳嗽則造成阻塞性肺氣腫，嚴重可發生肺源性心臟病或肺動脈高壓，喪失勞動能力和自理能力，直到死亡。雖然COPD的發病原因尚不明確，但可能與吸煙和空氣污染源可對氣管和支氣管黏膜造成慢性非特異性炎癥有關[1-3]。臨床治療常采用鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸進行治療，效果較好。研究表明血清中胸腺基質淋巴生成素(thymic stromal lymphopoietin, TSLP)和嗜酸粒細胞陽離子蛋白(eosinophilic cationic protein, ECP)水平與氣道炎癥相關[4-5]，鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸對血清TSLP和ECP的影響較少人研究，兩者聯合應用的原理與血清TSLP和ECP是否相關，本課題就此展開研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年10月至2016年10月在我院收治且確診的COPD急性發作期患者106例，隨機分為2組，對照組(51例)和觀察組(55例)，另外選擇同期50例健康體檢者為健康對照組，所有受試者均簽署知情同意書，3組的年齡、吸煙、喝酒、男:女及體質量指數等一般臨床信息差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本課題已獲得院內倫理委員會批準。

表1 各組一般臨床信息比較

1.2 排除標準

1周內使用過糖皮質激素者；存在重度高血壓、腎病、糖尿病、出血性疾病或惡性腫瘤史者；嚴重骨質疏松或消化性潰瘍者；活動性肺結核者；伴有鹽酸氨溴索和/或N-乙酰半胱氨酸過敏者；資料不全。

1.3 治療

對照組在常規治療如消炎、平喘、解痙、止咳和祛痰基礎上給予鹽酸氨溴索(常州四藥制藥有限公司，國藥準字：H20000660，規格：30 mg/片) 60 mg/次，3次/d，觀察組在對照組基礎上給予N-乙酰半胱氨酸(海南贊邦制藥有限公司，國藥準字：H20080326，規格：600 mg/片)600 mg/次，2次/d，2組的療程均為6個月。

1.4 指標檢測

1.4.1 血清和呼吸指標 收集所有受試者治療前和治療6個月的空腹外周血，離心得血清，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法測定血清的TSLP和ECP(試劑盒均由瑞典Kapi pharmacia 公司提供)。檢測治療前后的1秒用力呼氣容積(forced expiratory volume in one second, FEV1)占預計值比例(%)。

1.4.2 療效評價 評價所有患者治療6個月的療效。療效分為顯效、有效和無效。顯效：咳嗽、氣喘和咳痰等主要臨床癥狀消失，聽診和影像學顯示明顯好轉；有效：主要臨床癥狀減少，兩肺的呼吸音粗或啰音減弱，影像學顯示部分好轉；無效：主要臨床癥狀未改變，兩肺的啰音仍存在，影像學顯示未見好轉。總有效(率)=(顯效+有效)/總例數×100%。

1.5 統計學處理

將所有數據輸入SPSS 15.0軟件包中，年齡、體質量指數、TSLP 和ECP等計量資料采用均數±方差(x±s)表示，并采用單因素方差分析，存在統計學差異，再用LSD法兩兩比較；性別比、吸煙和喝酒等計數資料采用例數表示并采用卡方檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組治療前后TSLP和ECP的比較

治療前，對照組和觀察組患者的FEV1占預計值比例較低(P<0.05)，TSLP 和ECP水平較高(P<0.05)；治療后，FEV1占預計值百分增高(P<0.05)，TSLP和ECP水平減少(P<0.05)，與對照組組比，觀察組的FEV1占預計值百分明顯增高(P<0.05)，TSLP和ECP水平明顯減少(P<0.05)。見表2。

表2 各組治療前后TSLP 和ECP比較

注：與健康組治療前比較aP<0.05；與同組治療前比較bP<0.05；與對照組治療后比較cP<0.05。TSLP：胸腺基質淋巴生成素，ECP：嗜酸粒細胞陽離子蛋白，FEV1：1秒用力呼氣容積

2.3 對照組和觀察組的不良反應和治療效果比較 對照組和觀察組在治療過程中未發生心血管、消化道等明顯的不良反應。對照組顯效、有效、無效和總有效例分別為36、6、9和42例，觀察組分別為47、5、3和52例，2組的顯效和有效例數相當，與對照組比，觀察組的總有效例數較多，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 對照組和觀察組的治療效果比較[例(%)]

3 討論

鹽酸氨溴索是臨床常用的祛痰藥，可直接作用于支氣管腺體，促進載液分泌細胞的溶酶體酶釋放，溶解呼吸道內部的分泌物，還可促進鼻纖毛的活動，排出呼吸道內載液和痰液，進一步可刺激呼吸道II型肺泡上皮細胞合成和分泌表面活性物質，改善氣道阻塞，促進呼吸，改善臨床癥狀，保護肺功能[6-9]。N-乙酰半胱氨酸作為粘液溶解劑，其粘液溶解的機理在于化學結構所含的巰基(-SH)可斷裂多肽鏈的雙硫鍵(-S-S-)，降低痰液的粘度，痰液容易從消化道排出，適用于白痰和膿性痰，對于大量粘痰阻塞引起呼吸困難和咯痰困難均有較好的療效，基于N-乙酰半胱氨酸的藥理特性，有研究者認為通過鼻腔給藥更為理想[10-11]。較鹽酸氨溴索單用，氨溴索與N-乙酰半胱氨酸聯用的有效率明顯增高，本課題結果與文獻結果一致[12-13]。但N-乙酰半胱氨酸對于治療慢性支氣管炎的效果仍有爭議，如Ernsts等研究表明N-乙酰半胱氨酸不能減少患者住院率，Sedat等[14]認為N-乙酰半胱氨酸在慢性阻塞性肺病的治療中無明顯的抗氧化作用，多中心研究結果提示N-乙酰半胱氨酸與安慰劑組患者的肺功能指標均明顯降低。存在上述爭議的原因之一可能與N-乙酰半胱氨酸的給藥劑量不足相關，大量文獻顯示[15-17]，N-乙酰半胱氨酸的日給藥量≤600 mg，部分廠家的說明書也給出600 mg/d的給藥量，但體內外研究顯示只有每日劑量超過1 200 mg才能發揮N-乙酰半胱氨酸的抗氧化和抗炎作用，降低COPD的氣體陷閉，一項長達1年的臨床研究顯示600 mg/次，2次/d可顯著降低COPD急性發作的氣道功能。另外，乙酰半胱氨酸治療COPD的療效發揮與治療時間相關，文獻報道[16]，1 200 mg/d的乙酰半胱氨酸需持續服藥4個月以上才能顯效，而低于1 200 mg/d，則需要觀察更長時間方可達到治療作用，本課題設定觀察6個月2組療效，結果顯示給予鹽酸氨溴索聯用N-乙酰半胱氨酸組的總有效例數較多，因COPD還存在反復發作的可能，是否有必要延長給藥時間，還需要更多數據支持。TSLP的本質是上皮細胞分泌的類白細胞介素-7(IL-7)細胞因子，參與過敏性炎癥的發生發展的病變過程。TSLP可促進Th2細胞表達，破壞Th2和Th1平衡，誘發過敏性炎癥，如哮喘，激活樹狀窄細胞(DC) ，促進Th2細胞微環境形成，誘導Th2細胞因子分泌，如IL-4和IL-13，對Th1細胞無明顯影響。研究數據顯示當轉基因小鼠肺部特異性高表達TSLP時，氣道炎癥可自發產生，除了血清IL-4和IL-13上調，肺部病理也顯示CD4+淋巴細胞大量浸潤，黏膜下纖維化和杯狀細胞增生。哮喘患者氣道上皮活檢也顯示TSLP較正常對照組增高，造成血清TSLP升高，TSLP升高與Th2細胞趨化因子表達相關[18-19]。ECP是嗜酸性粒細胞激活并釋放的核糖核酸酶，屬于毒性蛋白的一種，通過收縮支氣管平滑肌，引發氣道高反應，增加微血管炎癥滲出，誘導肥大細胞釋放組胺，促進黏膜水腫和誘使血小板聚集[20]，綜上可見TSLP和ECP參與了COPD的發生發展過程，可作為評估氣道炎癥程度、發展變化和療效評估的重要指標。

本課題結果顯示，鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸可顯著改善COPD血清TSLP和ECP水平，鹽酸氨溴索和N-乙酰半胱氨酸對血清TSLP和ECP的水平可起到間接的干預作用：(1) 氨溴索可通過阻滯黏膜細胞上的Na+通道達到抗炎癥和抗氧化作用。(2)張瑞[21]研究顯示氨溴索可降低吸煙造成的大鼠氣道上皮細胞核轉錄因子(NF-κB)和淋巴細胞功能相關抗原-1(ICAM-1)的表達，NF-κB和ICAM-1表達升高與大鼠肺功能降低同時發生，Bay 11-7082作為NF-κB抑制劑可降低Poly I:C誘導的16HBE TSLP基因表達，可見抑制NF-κB通路有助于抑制TSLP水平[21-22]。子宮腺肌病患者異位內膜腺上皮細胞和間質細胞中TSLP和NF-κB的表達呈正相關[23]，ICAM-1與ECP相互影響而呈正相關關系[24-25]。(3)N-乙酰半胱氨酸可直接或間接途徑抗氧化：N-乙酰半胱氨酸結構的巰基直接與活性氧的親電子基團作用產生的中間產物可直接清除氧化物；N-乙酰半胱氨酸進入體內，迅速去除乙酰基，形成半胱氨酸，以還原性谷胱甘肽(GSH)的前體身份補充細胞內的GSH，加強GSH的抗氧化性，GSH抗氧化性增強，ECP水平降低[26]。對于鹽酸氨溴索聯合N-乙酰半胱氨酸聯用還需強調一點的是，兩者聯用在不同COPD類型的反饋不同，重度COPD受益較輕中度顯著，因此對于納入的COPD患者可根據嚴重程度大致評估受益。

綜上所述，鹽酸氨溴索和N-乙酰半胱氨酸治療COPD安全有效，兩者聯合應用可間接降低血清TSLP和ECP水平。

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Effects of ambroxol hydrochloride combined with N-acetylcysteine on serum thymic stromal lymphopoietin and eosinophilic cationic protein in the patients with chronic obstructive pulmonary disease

ZhangHaitao,ZhangYingming,WangCaiying,FangShencun,XuBin,LiuDan

(NinthWardofRespiratoryMedicine,NanjingChestHospitalAffiliatedtoMedicalSchoolofSoutheastUniversity，Nanjing210029,China)

ObjectiveTo investigate the effects of ambroxol hydrochloride combined with N-acetylcysteine on serum thymic stromal lymphopoietin (TSLP) and eosinophilic cationic protein (ECP) in the treatment of the patients with chronic obstructive pulmonary disease(COPD).MethodsOne hundred and six patients who were diagnosed as COPD in acute stage and treated in the hospital from October 2013 to October 2016 were recruited as study subjects. The patients were randomly divided into 2 groups: the control group (n=51) and the observation group (n=55), and another 50 health examinees were selected as the healthy control group.ResultsBefore treatment, forced expiratory volume in one second (FEV1)in the patients of the 2 chronic bronchitis groups accounted for a low proportion of the predicted value (P<0.05), and the levels of TSLP and ECP were relatively high (P<0.05). After treatment, FEV1 level increased (P<0.05), while the levels of TSLP and ECP decreased (P<0.05). As compared with that of the control group, FEV1 level increased, but TSLP and ECP levels decreased significantly in the observation group(P<0.05). In course of treatment, no obvious adverse reactions were observed in the patients of the 2 groups. Total number of effective cases in the observation group was greater than that of the control group (P<0.05).ConclusionAmbroxol hydrochloride combined with N- acetylcysteine was safe and effective in the treatment of COPD, the mechanism of which might be associated with the indirect decrease of serum TSLP and ECP.

Ambroxol hydrochloride; N- acetylcysteine; Chronic obstructive pulmonary disease; Thymic stromal lymphopoietin; Eosinophilic cationic protein

R725.6

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2017.06.013

南京市衛生局醫學科技發展重點項目(ZKX12036)

210029 江蘇 南京，南京大學醫學院附屬南京胸科醫院九病區東

張映銘，電子信箱：17680734@qq.com

2017-09-09)

(本文編輯：林永麗)