氯磷酸二鈉緩釋微丸工藝與處方的優化*

黃展 王晶 國玉芝 王曦*

(佳木斯大學附屬第一醫院 佳木斯 154003)

氯膦酸二鈉（disodium clodronate)又名氯屈膦酸二鈉，為第一代雙膦酸鹽類化合物，是近20年發展起來抗代謝性骨病的一類新藥[1]。但在使用過程中有一定缺點，因口服吸收少，生物利用度低，多次給藥方案，故臨床效果不顯著，且患者依從性較差[2]。為了方便患者臨床應用、提高藥物的生物利用度及療效，將氯膦酸二鈉制成緩釋微丸制劑是一個較佳的選擇。本實驗采用擠出滾圓法制備骨架型緩釋微丸，不僅所得的顆粒大小均勻、粒度分布窄、載藥量大且藥物含量均勻，而且可以避免包衣、簡化了工藝、易于通過調節處方控制釋藥行為。現將工藝和處方的優化結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 主要試劑和儀器

擠出滾圓機（型號PL203-IC，重慶英格制藥機械有限公司）；精密天平（型號MM-07515-00，梅特勒公司）；NaOH、HCl和H2O2（色譜純，國藥化學試劑有限公司）；氯膦酸二鈉標準品（批號10098，中國藥品生物制品檢定所）；氯膦酸二鈉（原料藥，武漢大華偉業醫藥化工有限公司）；Eudragit L30D-55（上海森君化工制劑輔料有限公司）。

1.2 微丸釋放度的檢測

[3]方法進行檢測，用陰離子交換色譜柱（IonPac AS11-HC）；以45 mmol/L氫氧化鉀溶液為流動相，流速為1.2 ml/min；檢測器為電導檢測器，檢測方式為抑制電導檢測；柱溫30℃；理論板數按氯膦酸二鈉峰計算不低于2000。測定方法：精密稱取本品2 g置100 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻；加樣量25 μl，注入液相色譜儀（Agilent 1260，IonPac AS11-HC 柱，4.6 mm×250 mm），記錄色譜圖。另取氯膦酸二鈉對照品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含無水氯膦酸二鈉120 μg的溶液，同法測定，按外標法以峰面積計算，即得。分別檢測不同時刻微丸釋放量，并計算累積釋放度[4]。

1.3 緩釋微丸制劑的工藝優化

首先取20 mg氯膦酸二鈉和輔料的混合物與黏合劑充分混合，然后用擠出機擠出直徑恒定的圓筒條，再切斷圓筒條成小段，并將小段高速滾制成圓球，繼續滾制使圓球滾成更勻稱的圓球。最后在干燥箱干燥制備好的圓球。制劑制備工藝優化包括：（1）圓球滾制速度（擠出滾圓機速度選擇高檔、中檔或低檔）；（2）圓球滾制時間（2 min、6 min或12 min）；（3）干燥溫度（60℃、70℃或80℃干燥4 h）。繪制累積釋放度與變量參數曲線，根據斜率比較每個條件下制備的微丸氯膦酸二鈉的釋放速率。

1.4 處方配方優化

按照每個微丸含20 mg氯膦酸二鈉的標準，加入微晶纖維素，乙基纖維素和硬脂酸及濕潤劑。添加量分別是0%、5%和10%的微晶纖維素，或乙基纖維素與硬脂酸以1∶2、1∶1和2∶1比例（mg，w/w）添加，以及 16 μl、20 μl和 24 μl的 10% Eudragit L30D-55（濕潤劑）。繪制累積釋放度與變量參數曲線，根據斜率比較每個條件下制備的微丸氯膦酸二鈉的釋放速率。

2 結果

2.1 工藝優化

檢測不同圓球滾制速度、滾制時間和干燥溫度制備的微丸中氯膦酸二鈉在不同時間的累釋放度（圖1）。從結果可知，滾制速度為高檔時制備的微丸的釋放速率顯著低于中檔和低檔滾制速率制備的微丸；滾制時間為6 min制備的微丸的釋放速率顯著低于10 min和2 min時制備的微丸；干燥溫度為60℃制備的微丸的釋放速率顯著低于70℃以及80℃干燥的微丸。因此，可以得出最佳的微丸制備工藝為：高檔速度下滾制6 min，干燥溫度為60℃，時間4 h。

圖1 不同優化條件對微丸累積釋放度的影響

2.2 配方優化

檢測不同微晶纖維素加入量、乙基纖維素和硬脂酸比例以及潤滑劑的加入量制備的配方經2.1的最佳工藝制備的微丸中氯膦酸二鈉在不同時間的累積釋放度（圖2）。從結果可知，不加微晶纖維素的配方制備的微丸的釋放速率顯著低于加5%和10%微晶纖維素制備的微丸；乙基纖維素和硬脂酸比例為1∶2的配方制備的微丸的釋放速率顯著低于比例為1∶1和2∶1時制備的微丸；加入24 μl的10% Eudragit L30D-55的配方制備的微丸的釋放速率顯著低于16 μl和20 μl的微丸。因此，可以得出制備微丸的最佳配方為：20 mg氯膦酸二鈉，不加微晶纖維素，乙基纖維素和硬脂酸比例為1∶2，24 μl的10% Eudragit L30D-55。

圖2 不同添加劑對微丸累積釋放度的影響

3 討論

微丸的制備工藝會影響藥物的緩釋速率[5]。目前，緩/控釋微丸制備一般由含藥丸芯和緩/控釋膜組成，含藥丸芯常用擠出滾圓法、干粉層積法、高速攪拌制粒法等方法制得[6]。經本實驗優化后的工藝制備的骨架型緩釋微丸，不僅所得的顆粒大小均勻、粒度分布窄、載藥量大且藥物含量均勻，而且可以避免包衣、簡化了工藝、易于通過調節處方控制釋藥行為。

藥物的配方中的輔料（微晶纖維素、乙基纖維素和硬脂酸比例以及潤滑劑）會影響微丸中藥物的釋放速率[7]。微晶纖維素是擠出滾圓工藝中常需添加的輔料，研究表明微晶纖維素雖然可改善微丸的密度和圓整度，但也增加了藥物的釋放速度，這與緩釋的概念相悖，本文的結果與該研究相同。其次，乙基纖維素和硬脂酸的比例越高，乙基纖維素的量越多，制備的微丸越粗糙，容易松散，因此需要降低乙基纖維素和硬脂酸比例。本文的結果表明乙基纖維素和硬脂酸比例為1∶2時制備的微丸釋放速率最低。最后，潤滑劑可有效增加微丸的圓整度，是滾圓工藝中的重要參數，諸多研究均表明過少的潤滑劑制備的微丸易松散，本文的結果也表明加入24 μl的10% Eudragit L30D-55制備的微丸藥物釋放速率較低。

雖然本文已經確定了氯膦酸二鈉微丸制備的最佳工藝，但是此工藝不一定是最優的制備工藝。如果想進一步優化工藝，可以應用Minitab軟件進行實驗設計，尋找最優的工藝條件。

參考文獻

[1]阿爾肯, 艾合買提. 氯膦酸二鈉治療前列腺癌骨轉移的臨床療效觀察[J]. 新疆醫學, 2009, 39(12): 89-90.

[2]佟倩. 氯膦酸二鈉治療前列腺癌骨轉移疼痛的療效觀察[J]. 中外健康文摘, 2012, 9(14): 182-183.

[3]雷毅, 鐘新林. 離子色譜法測定氯膦酸二鈉及其制劑的含量和有關物質[J]. 分析化學, 2009, 37(7): 1065-1068.

[4]張天英, 朱艷麗, 胡洋, 等. 氯磷酸二鈉緩釋微丸質量考察及藥效動力學研究[J]. 黑龍江醫藥科學, 2013, 36(1):77-78

[5]龍仲濤. 氯膦酸二鈉新合成工藝[J]. 國際醫藥衛生導報,2008, 14(3): 81-83.

[6]趙林, 張海浪, 胡愛珍, 等. 擠出滾圓法制備替米考星微丸的工藝研究[J]. 畜牧與獸醫, 2011, 43(12): 56-58.

[7]王勇, 曹盛宗, 王巍. 擠出滾圓法制備阿莫西林微丸的處方工藝研究[J]. 海峽藥學, 2011, 23(3): 19-21.