高效液相色譜法測定洛伐他汀膠囊的含量

李月明

摘 要：本文采用高校液相測定了洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量，固定相為：安捷倫Cl8（4.6mm×250mm，5um），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動相，檢測波長為238nm，流速1.0mL·min-1，柱溫：30℃。洛伐他汀在30～110μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。洛伐他汀的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%（n=6）；此方法簡便、準確、重現性好，可用于洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量測定。

關鍵詞：洛伐他汀膠囊；洛伐他汀；含量

洛伐他汀膠囊在體內競爭性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶羥甲戊二酰輔酶A還原酶，使膽固醇的合成減少，也使低密度脂蛋白受體合成增加，結果使血膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇水平降低，適用于高脂血癥，高膽固醇血癥等癥狀。洛伐他汀膠囊還可降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。洛伐他汀膠囊最常見的不良反應為胃腸道不適、腹瀉、脹氣等。本文采用高校液相測定了洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量。

1 儀器與試藥

Dura 12/24超純水系統（上海和泰儀器有限公司）；CLEAN PH200便攜式酸堿度測試儀（西安優普儀器設備有限公司）；SPECORD250 PLUS紫外可見分光光度計（德國耶拿分析儀器股份公司）；實驗室玻璃器皿自動洗瓶機（西安優普儀器設備有限公司）；PTX-FA110萬分之一天平（上海鑫倉電子科技有限公司）；KQ250DE超聲波清洗器超聲波檢測儀器（煙臺鑫康商貿有限公司）；LDW-S實驗室污水處理機（上海路島分析儀器有限公司）；LC3000高效液相色譜儀（山東滕州市滕海分析儀器有限公司）。洛伐他汀對照品由中國藥品生物制品檢定所提供。乙腈（山東浩中化工科技有限公司）、三乙胺（山東浩中化工科技有限公司）、磷酸（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、甲醇（山東浩中化工科技有限公司）、甲酸銨（山東浩中化工科技有限公司）、甲酸（山東浩中化工科技有限公司）、冰醋酸（山東浩中化工科技有限公司）、磷酸氫二鈉（武漢市偉琪博星生物科技有限公司）、三乙胺（山東浩中化工科技有限公司）、氫氧化鈉（山東浩中化工科技有限公司）。

2 含量測定

2.1 色譜條件。依據查閱文獻及考查的結果 ，確定色譜條件如下[1-5]。色譜柱為安捷倫Cl8規格為（4.6mm×250mm，5um）；甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動相；檢測波長為238nm。理論板數按洛伐他汀峰計算應不得低于2000。

2.2 供試品溶液的制備。取洛伐他汀膠囊內容物，精密稱取，加甲醇超聲處理5分鐘，放冷，濾過，濾液置25ml量瓶中，用流動相分次洗滌容器和殘渣，洗液濾人同一量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3 對照品溶液的制備。精密稱取洛伐他汀對照品約5mg，用甲醇溶解并稀釋成每1ml中含50？滋g的溶液，作為對照溶液。

2.4 陰性溶液的制備。依照處方取除洛伐他汀的原輔料，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結果在洛伐他汀出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 準曲線的制備。制備濃度為30、40、50、60、70、80、90、100、110μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A（μg）為橫坐標，進樣量為縱坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。試驗表明，洛伐他汀對照品在30～110μg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.6 精密度試驗。依照2.3項下制備對照品溶液，精密吸取洛伐他汀對照品溶液10μL重復進樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.79%。結果表明，本實驗精密度良好。

2.7 重現性試驗。稱取同一批的洛伐他汀膠囊樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.73%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 穩定性試驗。依照2.2項下供試品制備方法制備供試品溶液，分別在0，2，4小時精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進樣測定，供試品洛伐他汀峰面積積分值的RSD為0.81%。結果表明洛伐他汀至少在4小時內穩定。

2.9 回收率試驗。采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的洛伐他汀對照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測定含量（同時測定樣品含量），計算回收率。6次測定的平均回收率為99.3%，RSD為0.81%。

2.10 樣品含量測定。依照上述含量測定方法，測定洛伐他汀膠囊三批樣品中洛伐他汀的含量，含量為標示量的99.1%、99.3%、100.5%。

3 討論

分別考察甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（60：40），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（10：20：70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫鉀（磷酸調節至pH3.0）（10：10：80），0.1%磷酸液（用氫氧化鈉調pH4.0）-乙腈（40：60），甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（55：45），甲醇-0.02mol/L磷酸二氫銨（0.1%三乙胺，磷酸調pH至7.0）（75∶25），甲醇-0.02mol/L磷酸二氫銨（0.1%三乙胺，磷酸調pH至6.0）（70∶30）不同比例的流動相，結果以甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-10mmol/L甲酸銨-0.2%甲酸水溶液（70：30）為流動相。此方法簡便、準確、重現性好，可用于洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量測定。洛伐他汀膠囊中洛伐他汀的含量應為標示量的95-105%。

參考文獻

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