頭孢拉定原料中殘留2—萘酚的控制

霍林林

摘 要：本文采用高效液相法對頭孢拉定原料中的2-萘酚的含量進行測定并對2-萘酚的控制方法進行研究。采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-甲醇-水（45：5：50）為流動相，檢測波長為225nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。2-萘酚在0.005～1.28μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。2-萘酚平均回收率分別為99.5%。結論：本法簡便、準確，可用于頭孢拉定原料中殘留2-萘酚的研究。

關鍵詞：頭孢拉定；2-萘酚；控制

頭孢拉定（Cephradine， Velosef）別名：先鋒霉素Ⅵ、頭孢菌素Ⅵ等，為第一代半合成頭孢菌素。頭孢拉定對耐藥性金葡菌及其它多種對廣譜抗生素耐藥的桿菌等有迅速而可靠的殺菌作用，主要用于呼吸道、泌尿道、皮膚和軟組織等的感染。部分生產企業用2-萘酚作為沉淀劑，將反應體系中的頭孢拉定完全得到分離。2-萘酚中文別名2-羥基萘、乙萘酚、β-萘酚、beta-萘酚、β-羥基萘、B萘酚。2-萘酚不溶于冷水，易溶于熱水、乙醚、氯仿、乙醇、苯、甘油及堿液。2-萘酚毒理和苯酚相似而且是更強的腐蝕劑。2-萘酚對血液循環和腎臟有毒害作用[1]。本文采用高效液相法對頭孢拉定原料中的2-萘酚的含量進行測定并對2-萘酚的控制方法進行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：ZXTA-20雙極反滲透實驗室超純水機（北京卓信博澳儀器有限公司）；SCQ-K001空氣超聲波清洗器（上海聲彥超聲儀器有限公司）；UV765紫外可見分光光度計（上海分析儀器廠）；FA124電子分析天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）；L-3000四元低壓自動進樣高效液相色譜系統（上海添時科學儀器有限公司）；LC-5520高效液相色譜儀（北京東西分析儀器有限公司）；STI-501Plus等度高效液相色譜儀（賽智科技（杭州）有限公司）；SPCC-220E-國產全自動實驗室洗瓶機（東莞市譜標實驗器材科技有限公司）；PHS-3C型PH計（上海雷磁儀器廠）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：2-萘酚

1.4 試劑：甲醇（山東省禹城市中美色譜產品廠）、乙腈（山東省禹城市中美色譜產品廠）、三乙胺（南京科捷分析儀器有限公司）、磷酸（南京科捷分析儀器有限公司）、磷酸二氫鉀（北京京科瑞達科技公司）、冰醋酸（山東省禹城市中美色譜產品廠）。

1.5 試藥：頭孢拉定原料

2 測定方法確定

2.1 色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[2-3]。流動相：乙腈-甲醇-水（45：5：50）為流動相，檢測波長：225nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數按2-萘酚峰計算應不得低于2000。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取2-萘酚對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含0.05μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取供試品，精密稱取，置容量中，精密加入流動相10mL，充分振搖后離心取上清液，即得。

2.4 檢測限以及定量限

取2-萘酚對照品，用流動相依次稀釋。以S/N=3計，檢測限為 0.0002%；以S/N=10計，定量限為0.0006%。

2.5 精密度試驗

精密稱取2-萘酚對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為0.05μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.93%，表明本方法精密度良好。

2.6 對照品的線性考察

精密稱取適量2-萘酚對照品，加入流動相溶液使溶解分別配制成每毫升含0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28微克的溶液。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，2-萘酚在0.005～1.28μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.7 重現性試驗

稱取同一批的頭孢拉定原料樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.96%，結果表明此方法的重現性良好。

2.8 準確度試驗

采用加樣回收法，將已知含量的頭孢氨芐供試品溶液，分別加入一定量的2-萘酚，按“含量測定”項下方法試驗，計算回收率為99.5%，RSD為0.86%。

2.9 樣品穩定性試驗

取同一批頭孢拉定原料樣品，按2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、1、2、3、4小時，精密吸取供試品溶液10？滋l 注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定頭孢拉定原料中2-萘酚的RSD=0.89%。結果表明供試品4小時內穩定。

2.10 耐用性

在不同天用L-3000四元低壓自動進樣高效液相色譜系統及LC-5520高效液相色譜儀，分別進行實驗，2-萘酚和主成分頭孢氨芐峰分離良好，顯示方法具有比較充分的色譜耐用性。

2.11 樣品含量測定

依照上述含量測定方法，測定頭孢拉定原料10批樣品中2-萘酚的含量，結果10批樣品的含量分別0.00078%、0%、0%、0.00681%、0.00081%、0%、0%、0%、0.00731%、0%。

3 討論

分別考察甲醇-水-三乙胺（70∶30：0.2），乙腈-甲醇-0.05%磷酸（15：15：70），乙腈-甲醇-水（45：5：50），乙腈-甲醇-水（50：5：45），乙腈-甲醇-0.2mol.L-1磷酸二氫鉀-冰醋酸（20∶5：75：0.1），甲醇-0.025moLKH2PO4（15∶85）不同比例的流動相，結果以乙腈-甲醇-水（45：5：50）為流動相為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-水（45：5：50）為流動相為流動相。2-萘酚有未檢出和檢出，檢出含量差異較大說明孢拉定原料在生產過程中2-萘酚回收工藝穩定性較差。有部分生產企業用2-萘酚作為沉淀劑，將反應體系中的頭孢拉定完全得到分離，但2-萘酚回收工藝穩定性較差。如不能很好的回收2-萘酚應考慮其他分離方法。

參考文獻

[1]Aqueous oxytetracycline degradation and the toxicity change of degradation compounds in photoirradiation process[J]. JIAO Shaojun～1 ZHENG Shourong～1 YIN Daqiang～（2，*）WANG Lianhong～1 CHEN Liangyan～1 1.State Key Laboratoo，of Pollution Control and Resource Reuse，School of the Environment，Nanjing University，Nanjing 210093，China. 2.Key Laboratory of Yangtze Water Environment of Ministry of the State Education，Tongji University，Shanghai 200092，China. Journal of Environmental Sciences. 2008（07）.

[2]萬有岳，李瓊莉.高效液相色譜法測定硫酸鋅電解液中的α-亞硝基-β-萘酚、β-萘酚[J].中國有色冶金，2012（03）.

[3]周建科，韓朝家，唐翠苓，王琳.固相分散萃取-液相色譜法測定番茄醬中2-萘酚[J].食品工程，2011（01）.endprint