30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑的高效液相色譜分析方法研究

陸學云

（江蘇糧滿倉農化有限公司，江蘇揚州 225247）

30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑的高效液相色譜分析方法研究

陸學云

（江蘇糧滿倉農化有限公司，江蘇揚州 225247）

采用高效液相色譜法測定30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑，使用C18色譜柱，以乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液（體積比70∶30）為流動相，在柱溫25℃、波長230 nm、流量1.0 mL/min色譜條件下進行分析。吡唑醚菌酯和葉菌唑的標準偏差分別為0.032和0.028，變異系數分別為0.16%和0.27%，線性相關系數均為0.999 8，平均回收率分別為99.4%和99.6%。

吡唑醚菌酯；葉菌唑；高效液相色譜；分析

吡唑醚菌酯（pyraclostrobin）是巴斯夫公司于1993年發現的新型甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑。其為線粒體呼吸抑制劑，通過阻止細胞色素b和c1間電子傳遞而起效。吡唑醚菌酯高效、廣譜，毒性低，且對非靶標生物安全，對使用者和環境友好。吡唑醚菌酯不僅具有保護、治療、鏟除活性，還是一個植物保健品，能夠促進植物生長[1]。葉菌唑（metconazole）為三唑類殺菌劑，通過抑制麥角甾醇生物合成起效。其殺菌譜廣，活性高，兼具保護和治療活性。葉菌唑主要用于谷物防治多種葉部病害，其既可采用莖葉處理又可用于種子處理[2]。

吡唑醚菌酯與葉菌唑復配不僅能有效延緩抗性的產生，而且對小麥多種病害有很好的防治效果。目前有關吡唑醚菌酯和葉菌唑液相色譜分析方法已見報道，而二者復配產品的分析方法尚未見公開報道[3-5]。本文建立了在同一色譜條件下同柱分離測定吡唑醚菌酯與葉菌唑的方法。該方法操作簡單、快速、準確，可以為企業生產過程質量控制和質檢機構質量檢測提供參考。

1 實驗部分

1.1 試劑

乙腈：色譜純；水：2次蒸餾水；吡唑醚菌酯標樣（≥99.0%）、葉菌唑標樣（≥99.0%），北京勤誠亦信科技開發有限公司；30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑（20%吡唑醚菌酯＋10%葉菌唑），江蘇糧滿倉農化有限公司制。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：島津LC-20AT，具可變波長紫外檢測器；色譜工作站；色譜柱：不銹鋼柱（250 mm×4.6 mm），內裝Inertsil ODS-3（5 μm）填充物；微量進樣器：50 μL；過濾器：濾膜孔徑約0.45 μm；超聲波清洗器。

1.3 液相色譜操作條件

流動相：乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液（體積比70∶30）；流量：1.0 mL/min；柱溫：25℃；檢測波長：230 nm；進樣體積：25 μL。保留時間：葉菌唑約7.7 min；吡唑醚菌酯約11.7 min。

上述色譜操作條件系典型操作參數。實際操作時，可根據不同儀器的特點，對給定的操作參數進行適當調整，以期獲得最佳效果。典型的高效液相色譜圖見圖1、圖2。

圖1 標樣高效液相色譜圖

圖2 試樣高效液相色譜圖

1.4 測定步驟

1.4.1 溶液的配制

分別稱取葉菌唑標樣0.03 g、吡唑醚菌酯標樣0.06 g（精確至0.000 2 g），置于同一50 mL容量瓶中，加入約30 mL乙腈，在超聲波水浴中振蕩5 min，冷卻，乙腈定容。準確移取5 mL標樣母液于50 mL容量瓶中，用乙腈稀釋并定容，備用。

稱取30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑試樣0.3 g（精確至0.000 2 g），置于50 mL容量瓶中，加入約30mL乙腈，在超聲波水浴中振蕩5 min，冷卻，用乙腈定容。準確移取5 mL上述溶液于50 mL容量瓶中，用乙腈定容，過濾，備用。

1.4.2 測定及計算

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針標樣溶液峰面積相對變化小于1.0%，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）的峰面積分別進行平均。試樣中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）的質量分數w（%）按下式計算。

式中：A1—標樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）峰面積的平均值；A2—試樣溶液中吡唑醚菌酯（或葉菌唑）峰面積的平均值；m1—吡唑醚菌酯（或葉菌唑）標樣的質量，g；m2—試樣的質量，g；P—標樣中，吡唑醚菌酯（或葉菌唑）質量分數，%。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

對不同種類及體積比的流動相進行實驗對比。采用乙腈＋0.3%冰乙酸水溶液為流動相（體積比70∶30），流量在1.0 mL/min的條件下，有效成分與雜質能獲得較好分離，且峰形對稱，保留時間適當。

吡唑醚菌酯、葉菌唑在230 nm波長下有較好的吸收，而且所用試劑幾乎無響應，因此選擇230 nm為檢測波長。

2.2 分析方法的線性相關性測定

分別稱取葉菌唑標樣0.05 g和吡唑醚菌酯標樣0.05 g（精確至0.000 2 g）于25 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，充分搖勻。用移液管取1.0 mL上述母液，置于另一10 mL容量瓶中，乙腈定容。最后用移液管準確移取1次稀釋液0.5 mL、1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL于5個10 mL容量瓶中，乙腈定容，搖勻。在上述液相色譜條件下進行測定，并以吡唑醚菌酯（或葉菌唑）質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。吡唑醚菌酯的線性方程為y=377 469 x＋25 638，相關系數為0.999 8。葉菌唑的線性方程為y=366 837 x＋39 460，相關系數為0.999 8。

2.3 分析方法的精密度測定

稱取30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑樣品，進行5次平行測定，結果見表1。

表1 精密度實驗結果

統計分析結果顯示：吡唑醚菌酯的標準偏差為0.032，變異系數為0.16%；葉菌唑的標準偏差為0.028，變異系數為0.27%。

2.4 分析方法的準確度測定

采用標樣添加法，在已知含量的試樣中分別添加一定量的標樣，按照上述測定方法進行測定。測得吡唑醚菌酯的平均回收率為99.4%，葉菌唑的平均回收率為99.6%，見表2。

表2 準確度實驗結果

3 結論

本方法可同時測定30%吡唑醚菌酯·葉菌唑水乳劑中吡唑醚菌酯、葉菌唑質量分數。方法精密度和準確度較高，線性關系良好，具有簡便、快速，分離效果好等特點，是一種可行的分析方法，可滿足產品檢驗的要求。

[1]楊麗娟,柏亞羅.甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑——吡唑醚菌酯[J].現代農藥,2012,11(4):46-50;56.

[2]劉長令.國外農藥品種手冊（增補本）[M].沈陽:全國農藥工業信息站,2000:164-165.

[3]王秀云,葉進剛,張曉茹,等.12%己唑醇·吡唑醚菌酯懸浮劑的高效液相色譜分析[J].世界農藥,2014,36(2):55-57.

[4]徐妍,丁維成,王昌錦,等.30%唑醚·戊唑醇懸浮劑的高效液相色譜分析方法[J].現代農藥,2016,15(1):19-21.

[5]陳根良,夏俊,劉春杰,等.葉菌唑原藥高效液相色譜分析方法研究[J].農藥科學與管理,2014,35(9):43-45.

Analytical Method of Pyraclostrobin＋Metconazole 30%EW by HPLC

LU Xue-yun
(Jiangsu Liangmancang Agrochemical Co.,Ltd.,Jiangsu Yangzhou 225247,China)

An analysis method of pyraclostrobin+metconazole 30%EW was developed by HPLC.The mobile phase was acetonitrile+acetic acid aqueous solution,with volume ratio of 70∶30.The results showed that the standard deviations of pyraclostrobin and metconazole were 0.032 and 0.028,the relative standard deviations were 0.16%and 0.27%,the linear correlation coefficients were both 0.999 8,the average recoveries were 99.4%and 99.6%,respectively.The method met the requirements of analysis.

pyraclostrobin;metconazole;HPLC;analysis

TQ 450.7

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.06.012

2017-07-07；

2017-07-27

陸學云（1964—），男，工程師，主要從事農藥生產技術的管理工作。E-mail：xueyun1596@163.com

（責任編輯：柏亞羅）