等位基因特異性PCR檢測CYP3A5和MDR-1基因多態性方法的建立及臨床應用*

吳潔，侯佳展，程倩，李佳垚，李丹丹，尹逸叢，蘇薇

(中國醫學科學院北京協和醫院檢驗科，北京 100730)

·臨床檢驗技術研究·

等位基因特異性PCR檢測CYP3A5和MDR-1基因多態性方法的建立及臨床應用*

吳潔，侯佳展，程倩，李佳垚，李丹丹，尹逸叢，蘇薇

(中國醫學科學院北京協和醫院檢驗科，北京 100730)

目的用等位基因特異性PCR(ARMS-PCR)檢測細胞色素P450酶CYP3A5(A6986G) 和多藥耐藥基因MDR-1(C3435T)基因多態性，探討其與腎移植受者他克莫司(Tac)血藥濃度和劑量比的相關性。方法根據CYP3A5(A6986G) 和MDR-1(C3435T)基因多態性位點分別設計ARMS-PCR引物，分析72例腎移植受者外周血基因組DNA中該2個基因位點的多態性，同時以DNA測序法為金標準進行驗證。化學發光微粒子免疫分析法測定腎移植受者血Tac濃度，并比較術后1個月時不同基因型受者之間血Tac濃度、Tac劑量/Tac用量的差異。結果建立的ARMS-PCR法與DNA測序法檢測符合率為100%。72例腎移植受者中，CYP3A5 *1/*1、*1/*3和*3/*3基因型的發生頻率分別為18.1%、31.9%和50.0%，MDR-1 C/C、C/T和T/T基因型的發生頻率分別為27.8%、58.3%和13.9%。此外，不同CYP3A5基因型腎移植受者的血Tac濃度(P=0.014)和Tac濃度/Tac用量(P=0.019)均存在明顯差異，進一步兩兩比較發現，CYP3A5 *3/*3基因型受者血Tac濃度/Tac用量明顯高于*1/*1和*1/*3基因型(P均<0.05)。結論成功建立檢測CYP3A5和MDR-1基因多態性的ARMS-PCR法，腎移植受者CYP3A5*3基因多態性與Tac的藥代動力學明顯相關。

等位基因特異性PCR；細胞色素P450酶CYP3A5；多藥耐藥基因MDR-1；基因多態性

他克莫司(Tac)是鈣調神經磷酸酶抑制劑(CNI)家族的成員，以Tac為基礎的免疫抑制藥物已廣泛應用于臨床器官移植后抗排斥反應。然而，Tac的藥物治療窗窄,且生物利用度個體差異大[1]，臨床往往需要根據血藥濃度來調整用藥劑量。此外，藥物相關的副作用，如腎毒性，神經毒性和高血糖，會明顯降低移植后受體的生存質量[2]。……