宮頸組織中白介素-2、白介素-4在HPV感染不同類型宮頸病變中的表達

劉易斯 王敏 陶陶

宮頸組織中白介素-2、白介素-4在HPV感染不同類型宮頸病變中的表達

劉易斯 王敏 陶陶

目的探究與分析IL-2、IL-4在HPV感染不同程度宮頸病變中的表達及意義。方法選取我院自2015年3月—2017年3月收治的40例行宮頸活檢組織切片顯示為正常宮頸組織作為正常組，另選擇同時期收治的行宮頸活檢組織切片顯示的CINⅠ 12例，CINⅡ10例，CINⅢ 9例，宮頸浸潤性鱗癌組織30例。采用原位雜交法檢測上述樣本中IL-2、IL-4及HPV16/18的表達水平。結果IL-2在HPV16/18陽性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異具有統計學意義（P＜0.05）。即IL-2的表達與宮頸病變程度呈負相關（r=-0.783，P＜0.05）。IL-2在HPV16/18陰性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。IL-4在HPV16/18陽性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異具有統計學意義（P＜0.05）。即IL-4的表達與宮頸病變程度呈正相關（r=0.668，P＜0.05）。IL-4在HPV16/18陰性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。結論在HPV感染宮頸組織后可見局部IL-2表達水平降低，IL-4表達水平升高，提示發生HPV感染宮頸的原因可能與宮頸局部免疫細胞水平降低有關。

白細胞介素-2；白細胞介素-4；人乳頭瘤病毒；宮頸病變

近年來，隨著Th1/Th2漂移的研究逐漸成為熱點，有部分專家學者認為絕大多數宮頸癌患者體內均存在著Th1/Th2的漂移現象，且隨著宮頸病變程度的不斷加重，此種漂移現象就更加明顯[1]。據研究資料顯示，HPV感染的宮頸病變患者中同樣存在著Th1向Th2的漂移現象，但相關報道較少[2]。我院現針對三者的結合展開研究，對IL-2及IL-4的表達水平展開研究，由于二者分別為Th1及Th2型細胞因子的代表，判斷其與HPV感染宮頸病變的關系具有重要的臨床意義，現將結果總結報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院自2015年3月—2017年3月收治的40例行宮頸活檢組織切片顯示為正常宮頸組織作為正常組；另選擇同時期收治行宮頸活檢組織切片顯示的CINⅠ 12例，CINⅡ10例，CINⅢ 9例，宮頸浸潤性鱗癌組織30例。全部患者均符合第7版《婦產科學》診斷標準，組織切片經HE染色病理診斷確診，均因陰道出血、接觸性出血、白帶異常等主訴來院檢查，且未接受過手術或放化療等治療，并排除了妊娠期及哺乳期患者，排除合并嚴重心肺肝腎疾病患者，排除了2周內接受過局部抗病毒藥物治療者；排除了長期使用免疫抑制劑/增強劑等藥物者[3-4]。正常組年齡為25～67歲，平均年齡為（45.6±2.48）歲；CIN組年齡為26～68歲，平均年齡為（45.1±2.34）歲；宮頸浸潤性鱗癌組年齡為24～65歲，平均年齡為（44.2±2.56）歲，三組患者的一般資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。并簽署了關于本次試驗的知情權同意書，符合我院醫學倫理會審核批準。

1.2 檢測方法

采用原位雜交法檢測上述樣本中IL-2、IL-4及HPV16/18的表達水平，其中IL-2、IL-4按照原位雜交試劑盒上說明書對切片中IL-2 mRNA及IL-4 mRNA進行檢測，HPV16/18按照原位雜交試劑盒上說明書完成，陽性對照為IL-2、IL-4、HPV16/18表達呈陽性的子宮頸組織切片，陰性對照為PBS液代替探針[5]。所用儀器及相關試劑盒均由北京博奧森生物技術有限公司生產提供。于光鏡下對切片組織進行觀察，IL-2 mRNA及IL-4 mRNA的陽性結果為：可見宮頸鱗狀上皮細胞的胞漿內存在均勻一致分布的棕黃色顆粒，HPV16/18的陽性結果為可見宮頸鱗狀上皮細胞細胞核內存在均勻一致分布的棕黃色顆粒[6]。觀察部位分別如下：宮頸正常組定位在鱗狀上皮，CIN組定位在CIN病灶，宮頸鱗癌定位在病灶。在同一個切片中觀察5個高倍鏡視野，若觀察到陽性信號細胞存在10個以上則為陽性，在10個以下即為陰性[7]。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件對數據進行分析處理，計量資料以（均數±標準差）表示，兩個樣本均數比較采用t檢驗，多于兩組樣本均數的比較，采用方差分析（ANOVA）；不滿足正態分布的計量資料或等級資料采用Spearmen相關性分析；計數資料以（n，%）表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 IL-2在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達對比

IL-2在HPV16/18陽性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異具有統計學意義（P＜0.05），即IL-2的表達與宮頸病變程度呈負相關（r=-0.783，P＜0.05）。IL-2在HPV16/18陰性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 IL-2在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達對比 [例（%）]

2.2 IL-4在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達對比

IL-4在HPV16/18陽性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異具有統計學意義（P＜0.05），即IL-4的表達與宮頸病變程度呈正相關（r=0.668，P＜0.05）。IL-4在HPV16/18陰性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 IL-4在感染及未感染HPV16/18宮頸組織中的表達對比 [例（%）]

3 討論

在人類的免疫系統中，多按照細胞因子的分泌不同將CD4+細胞分為Th1細胞及Th2細胞，前者多包括腫瘤細胞因子、IL-2、IL-12等，后者多包括IL-4、IL-5、IL-6等，在一般狀況下，Th1與Th2多處于動態平衡狀態，一旦發生失衡，則可誘發多種疾病。IL-2作為一種具有強效免疫調節作用的淋巴因子，可維持T淋巴細胞正常分化與增殖，促進提高自然殺傷細胞的活性，并促進誘導B淋巴細胞及細胞毒性T細胞的分化與增殖，從而發揮顯著的抗病毒及殺滅腫瘤細胞的作用。而IL-4作為一類對多種細胞生長及分化可起到廣泛作用的細胞因子，同時還可促進腫瘤組織產生IL-10降低抗原提呈細胞的表達，保證并維持Ⅱ型淋巴細胞在腫瘤組織中的浸潤，從而形成新的Th2細胞，來維持動態平衡。但有研究報道指出，腫瘤細胞在分化與增殖期間可通過直接分泌Th1細胞，促進發生Th1向Th2漂移的過程，當Th2類細胞形成后可對Th1細胞的增生產生抑制作用，而形成惡性循環，這就進一步證實了以IL-2、IL-4為代表的Th1、Th2細胞與腫瘤的發生發展具有一定的相關性[8]。

HPV為一類在臨床工作中較為常見的DNA病毒，可對人體皮膚及黏膜組織產生侵蝕作用，且幾乎全部宮頸癌組織中均存在著HPV感染的情況，并以HPV16/18型的感染作為常見。有專家學者在以往的研究報道中指出，隨著宮頸病變程度的增加，Th1型細胞因子下降情況就越明顯。本次研究結果顯示，IL-2、IL-4在HPV16/18陽性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異具有統計學意義（P＜0.05）。IL-2、IL-4在HPV16/18陰性表達的正常組、CIN組及鱗癌組中陽性表達率相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。結果提示，若宮頸病變患者未合并發生HPV感染，那么其宮頸病變程度并不受到IL-2及IL-4的影響，但若宮頸病變患者合并發生HPV感染，那么隨著疾病程度的加重，IL-2及IL-4的表達也隨之出現變化，即IL-2的表達與宮頸病變程度呈負相關，而IL-4的表達與宮頸病變程度呈正相關。分析出現此結果的原因是當IL-2水平降低時，可對T淋巴細胞的增殖與分化過程造成影響，對其調節做用產生阻礙，此時機體免疫細胞功能出現障礙，而當IL-2的分泌量增加時，進一步對IL-2的分泌產生抑制作用，增加了機體對HPV病毒的易感性，使得局部宮頸組織持續受到HPV的感染，表現出疾病的病程較長且難治愈。

綜上所述，在HPV感染宮頸組織后可見局部IL-2表達水平降低，IL-4表達水平升高，提示發生HPV感染宮頸的原因可能與宮頸局部免疫細胞水平降低有關，臨床醫師可針對此結果給予局部應用細胞因子治療，從而提高HPV感染的治愈率，阻礙宮頸癌的進一步發展，改善患者的生存質量。

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Expression and Significance of IL-2, IL-4 in Different Types of Cervical Lesions With HPV Infection

LIU Yisi WANG Min TAO Tao Department of Obstetrics and Gynecology,Shengjing Hospital Affiliated to China Medical University, Shenyang Liaoning 110004, China

ObjectiveTo explore and analyze the expression and significance of IL-2, IL-4 in different types of cervical lesions with HPV infection.Methods40 routine cervical biopsys from March 2015 to March 2017 were displayed by our hospital diagnosed normal tissue as the normal group. At the same time, 12 cases of chronic cervicitis were displayed by our hospital diagnosed the CINⅠ, 10 cases were diagnosed CINⅡ, 9 cases were diagnosed CINⅢ, 30 cases of cervical invasion of squamous carcinoma were diagnosed. the level of the IL-2, IL-4 and the expression of HPV16/18 were detected by in situ hybridization method.ResultsThe positive expression rate of IL-2 in HPV16/18 positive expression group,CIN group and squamous cell carcinoma group were compared, the difference was statistically significant (P<0.05). There was a negative correlation between the expression of IL-2 and the degree of cervical lesions(r=-0.783,P<0.05). There was no significant difference in the positive expression rate of IL-2 between HPV16/18 negative expression group,CIN group and squamous cell carcinoma group (P>0.05). The positive expression rate of IL-4 in HPV16/18 positive expression group, CIN group and squamous cell carcinoma group were compared, the difference was statistically significant (P<0.05). There was a positive correlation between the expression of IL-4 and the degree of cervical lesions (r=0.668,P<0.05).There was no significant difference in the positive expression rate of IL-4 between HPV16/18 negative expression group, CIN group and squamous cell carcinoma group (P>0.05).ConclusionIn the cervical organization with HPV infection, the level of IL-2 expression has decreased, However the level of IL-4 has risen, which may reveal that cervical HPV infection in the tip may be associated with the drop of cervical local immune cell levels.

interleukin-2; interleukin-4; human papilloma virus; cervical lesions

R737

A

1674-9308（2017）27-0056-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2017.27.030

中國醫科大學附屬盛京醫院婦產科，遼寧 沈陽 110004

王敏