大興安嶺被松櫟柱銹菌侵染的蒙古櫟葉上真菌種群的分布與多樣性

張華叢燕劉奇

大興安嶺被松櫟柱銹菌侵染的蒙古櫟葉上真菌種群的分布與多樣性

張華叢燕劉奇

（黑龍江省林業科學院，哈爾濱 150081）

蒙古櫟是重要的森林植物，其葉常常被松櫟柱銹菌（Cronartium quercuum）侵染。真菌與植物的共生關系是森林生態系統穩定和發展的重要基礎，而真菌的多樣性往往與森林生態系統的健康有著不可忽視的密切聯系[1-3]。本研究通過對被松櫟柱銹菌侵染的蒙古櫟葉上真菌的分離、培養，確定真菌的種類、組成和優勢種群，以期為蒙古櫟資源的開發、利用和松瘤銹病的發病規律提供科學依據。

1 試驗材料與方法

1.1 樣品的采集與鑒定

2016年春季、秋季，在大興安嶺塔河林業局秀峰林場50年生蒙古櫟純林中，隨機選擇有代表性的蒙古櫟病樹5株,每株樹按上、中、下3個部位分別采集被松櫟柱銹菌侵染的蒙古櫟葉子5片，放入紙袋中。在室內進行標本的干燥處理、整理,借助高倍顯微鏡進行觀察和鑒定。

1.2 真菌的分離培養與鑒定

1.2.1 真菌的分離培養

將蒙古櫟病葉樣本切成2 cm×2 cm小塊，用漂白粉1∶14倍液消毒3 min左右取出，用無菌水漂洗3次，用鑷子挑取葉片分別接種到PDA和玉米粉培養基上，每個培養皿內放5塊材料，設5個重復。將接種后的培養皿倒置放入25℃培養箱中培養，定期觀察菌落生長情況。

1.2.2 真菌種類鑒定

待菌落形成后，挑取培養基上培養的真菌制成臨時玻片或永久玻片，在顯微鏡下觀察、記錄出現的頻率、形態特征，并結合培養特性及菌落的特征，根據真菌分類學資料進行種類鑒定[4-6]。

1.3 真菌群落多樣性計算

根據所采集樣本中分離到的真菌種類、數量及出現的頻率等信息，統計分析真菌的Shannon多樣性指數（H′）和豐富度指數（E）。

Shannon-Wiener多樣性指數：H′=-∑Pi×lnPi

豐富度指數：E=（S-1）/lnN

式中：Pi=ni/N，表明第i個種所占的比例，n為第i種的個體數目；N為所有物種的個體總數；S為物種數目[7-9]。

2 結果與分析

2.1 不同培養基上真菌菌群種類與分布

由表1可知，在蒙古櫟病葉上共分離到真菌12種，其中PDA培養基上分離出11種，玉米粉培養基上分離出9種。玉米粉培養基上分離的真菌不僅較少，而且生長狀態也明顯不旺盛。

由分離結果還可以看出，無論在PDA培養基上，還是玉米粉培養基上，鏈格孢菌都只出現在越冬葉子上，說明該菌是該生境真菌群落的后來者。在PDA培養基上無論越冬病葉，還是當年病葉，粉紅單端孢、鐮刀菌、青霉菌都是該群落中的固定成員。

2.2 越冬病葉和當年病葉真菌菌群種類與分布

由表1可知，在PDA培養基上，越冬病葉和當年病葉分離出的真菌存在差異，其中越冬病葉上共分離出7種,帶菌率最高的是鏈格孢菌，為36%，為該真菌群落的優勢種；其次為假絲酵母菌和青霉菌，分別為24%和12%。當年病葉上共分離出7種真菌，帶菌率最高的是粉紅單端孢和毛霉菌，同為20%，其次為木霉菌和鐮刀菌，分別為16%和12%。

表1 蒙古櫟病葉上真菌群落在不同培養基上的分布

在玉米粉培養基上，越冬病葉和當年病葉分離出的真菌也存在差異，其中越冬病葉上分離出4種，帶菌率最高的是芽枝霉菌，為40%；其次是鏈格孢菌，為16%。當年病葉上共分離出6種，帶菌率最高的是芽枝霉菌，為76%；其次是黑孢菌，帶菌率為28%。

2.3 越冬病葉和當年病葉上真菌種群多樣性

由表2可知，在大興安嶺地區蒙古櫟病葉上銹菌的多樣性指數和豐富度指數存在著微弱差異。在相同培養基上，當年病葉的真菌種群多樣性指數略高于越冬病葉，這與真菌相同種群出現的頻率多少有關，二種葉子真菌種群的豐富度指數相似；在玉米粉培養基上，當年病葉上的真菌種群多樣性指數低于越冬病葉。在不同培養基上，當年病葉在PDA培養基上銹菌種群的多樣性指數和豐富度指數都高于玉米粉培養基，說明真菌生長發育所需要的環境和營養條件不同。

3 結論

表2 大興安嶺蒙古櫟病葉上真菌種群多樣性

在大興安嶺地區蒙古櫟葉上共分離出真菌12種，其中PDA培養基上分離出11種，玉米粉培養基上分離出9種。在PDA培養基上，越冬病葉上共分離出7種，帶菌率最高的是鏈格孢菌，為該真菌群落的優勢種；當年病葉上共分離出7種，帶菌率最高的是粉紅單端孢和毛霉菌，同為20%。在玉米粉培養基上，越冬病葉上分離出4種，帶菌率最高的是芽枝霉菌；當年病葉上共分離出6種，帶菌率最高的是芽枝霉菌。蒙古櫟病葉上銹菌的多樣性指數和豐富度指數存在差異，不同培養基上，越冬病葉和當年病葉的多樣性指數和豐富度指數存在較大區別。說明環境、養分會影響到真菌種群的生長發育。由分離結果可看出，無論在PDA培養基還是玉米粉培養基上，鏈格孢菌都出現在越冬病葉上，說明該菌是該生境真菌群落的后來者。在PDA培養基上無論越冬病葉還是當年病葉，粉紅單端孢、鐮刀菌、青霉菌都是該群落中的固定成員。

［1］ 于順利,馬克平,陳靈芝.中國北方蒙古櫟林起源和發展的初步探討［J］.廣西植物,2000,20(2)∶131-137.

［2］ 夏潤璽,秦利.柞樹常見病害及防治［J］.中國蠶業，2013,34(1)∶91-92.

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［4］ 戴芳瀾.中國真菌總匯［M］.北京∶科學出版社,1979.

［5］ 鄧叔群.中國的真菌［M］.北京∶科學出版社,1963.

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［8］ 吳金卓,馮亮,蔡小溪,等.森林生物多樣性評價指標選擇分析［J］.森林工程,2015,31(1)∶30-33.

［9］ 陳穎彪,千慶蘭.涼水自然保護區植物群落多樣性的研究［J］.廣州師院學報(自然科學版),1996,19(9)∶15-19.

1001-9499（2017）06-0025-02

2017-08-20

（責任編輯：王 岳）