PCR-RFLP法對蛇膽川貝散中川貝母的鑒別研究

朱林，蒲婧哲，張亞中,，程旺興，金斌

·藥物與臨床·

PCR-RFLP法對蛇膽川貝散中川貝母的鑒別研究

朱林1，蒲婧哲2，張亞中1,2，程旺興1，金斌2

目的：研究聚合酶鏈式反應-限制性內切酶長度多態性方法(PCR-RFLP法)對蛇膽川貝散(膠囊)中川貝母鑒定的可行性。方法本實驗選取8個廠家的蛇膽川貝散(膠囊)作為研究對象，對模板DNA的預處理方法進行考察，通過PCR-RFLP法對提取的DNA進行擴增和酶切。結果自提樣本中只有川貝母自提樣本的PCR產物可被酶切，8個廠家成藥樣本的PCR產物均不能被Sma I酶切。結論PCR-RFLP法對蛇膽川貝散(膠囊)中川貝母的鑒別具有很高的靈敏度和準確度，對市場上成藥中川貝母的真偽鑒別提供了較好的依據。

蛇膽川貝散； 川貝母； PCR-RFLP法； 鑒別； 可行性

蛇膽川貝散(膠囊)處方均由蛇膽汁和川貝母二味藥材組成，制法為川貝母粉碎成細粉，與蛇膽汁按6∶1的比例混勻，干燥，粉碎。具有祛風止咳，除痰散結的功效，適用于風熱咳嗽，痰多氣喘，胸悶，咳痰不爽或久咳不止等癥[1]。由于川貝母市場價格較高，且貝母屬的一些貝母與川貝母形態相似、價格較低，因此市售川貝母替代使用現象嚴重[2]，常見替代品有以下幾種：浙貝母、湖北貝母、伊犁貝母、新疆貝母、平貝母等。目前，川貝母常用的鑒別方法以性狀鑒別和色譜鑒別為主，但由于貝母屬的一些貝母與川貝母化學成分較為相似，因此常用的鑒別方法都存在一定的局限性[3-13]。尤其當川貝母以原料藥投入至成藥中，鑒別難度加大。近年來，學者們對聚合酶鏈式反應-限制性內切酶長度多態性方法(以下簡稱PCR-RFLP法)的研究突飛猛進，并廣泛應用到醫藥學領域，提供了一種新的分析方法[14-18]。……