干燥綜合征患者肺功能與血小板活化之間的關系

劉健,章平衡,萬磊,黃旦,黃傳兵,張曉軍,孫玥,劉磊

(安徽中醫藥大學第一附屬醫院風濕科，合肥 230031)

·論著·

干燥綜合征患者肺功能與血小板活化之間的關系

劉健,章平衡,萬磊,黃旦,黃傳兵,張曉軍,孫玥,劉磊

(安徽中醫藥大學第一附屬醫院風濕科，合肥 230031)

目的探討干燥綜合征患者肺功能與血小板活化之間的關系。方法選取干燥綜合征患者66例設為觀察組，同時選取健康體檢者30例設為對照組。采用肺功能儀檢測患者肺功能，流式細胞術檢測外周血血小板分化抗原CD40 配體(CD40L)表達，魏氏法檢測血小板(PLT)，ELISA試劑盒檢測血小板活化因子(PAF)、血小板α顆粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生長因子(PDGF)的水平。結果與對照組相比較，觀察組肺功能參數明顯降低，PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明顯升高(Plt;0.05)；在觀察組患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為75%肺活量位的最大呼氣流量(FEF75)，其次是FEV1/ FVC、50%肺活量位的最大呼氣流量(FEF50)、25%肺活量位的最大呼氣流量(FEF25)、呼氣峰流速值(PEF)。與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的觀察組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高(Plt;0.05)。相關性分析顯示：SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負相關，FEF25與CD40L呈負相關(Plt;0.01)，FEF50與PAF、GMP-140呈負相關(Plt;0.05，Plt;0.01)，FEF75、PEF與PLT呈負相關(Plt;0.05，Plt;0.01)。結論干燥綜合征患者存在肺功能降低，且肺功能降低與血小板活化及其活化產物的水平密切相關。

干燥綜合征;呼吸功能試驗；血小板活化

干燥綜合征(SS)是一種慢性炎癥性自身免疫性疾病，主要為外分泌腺體的分泌功能損害，故又名自身免疫性外分泌病[1]。其臨床表現主要為口眼干燥、猖獗性齲齒、間歇性交替性腮腺腫痛等。并且常出現其他外分泌腺及腺體外其他臟器受累導致多系統損害的癥狀。其中以肺間質病變最為常見，肺間質病變是SS臨床分期、疾病評估、治療預后的重要指標[2-3]。SS繼發肺間質病變臨床表現之一是肺功能水平的降低，因此，應及早進行肺功能水平的檢測，及時診斷，并予以早期治療。研究發現，在干燥綜合征患者體內存在著血小板(PLT)參數的異常，并且還出現血小板活化因子(PAF)的水平升高[4]。本研究通過觀察SS患者肺功能水平與血小板活化產物PAF、血小板α顆粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血小板源性生長因子(PDGF)、血小板分化抗原CD40配體(CD40L)表達的水平的變化，以期探討SS肺功能降低與血小板活化之間存在的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2014年3月至2015年4月在安徽中醫藥大學第一附屬醫院風濕科門診及住院治療的66例SS患者作為觀察組(SS組)。其中男4例，女62例;年齡31～74歲，平均(53.5±11.6)歲；病程1～24年，平均病程(11.3±7.8)年。另從安徽中醫藥大學第一附屬醫院體檢中心選取30例經體檢和免疫學檢查排除自身免疫性疾病、身體健康、無明顯器質性疾病者作為健康對照組(NC組)。男3例，女27例；年齡20～70歲，平均(34.6±7.4)歲。兩組在年齡、性別等方面比較，差異無統計學意義(Pgt;0.05)，具有可比性。

1.2 觀察組納入標準 (1)符合原發干燥綜合征診斷標準；(2)年齡在30～75歲之間；(3)自愿參加本項研究，同意藥物治療方案并簽署知情同意書，按醫囑服用藥物，依從性好。

1.3 觀察組排除標準 (1)不符合上述納入標準者；(2)年齡小于30歲或大于75歲者；(3)長期服用慢作用抗風濕藥或激素，且在本研究前至少1個月內未停用，或使用非甾體抗炎藥，且在本研究前至少1周內未停用；(4)合并心血管、肺、肝、腎和造血系統等嚴重原發性疾病；(5)精神病患者；(6)妊娠及哺乳期婦女；(7)研究者認為不宜進行此項臨床試驗者。

1.4 方法 檢測用力呼氣量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、25%肺活量位的最大呼氣流量(FEF25)、50%肺活量位的最大呼氣流量(FEF50)、75%肺活量位的最大呼氣流量(FEF75)和最大呼氣流量(PEF)。按照ELISA試劑盒說明書操作測定PAF、GMP-140、PDGF的含量。并用SysmexXT-2000i全自動血細胞分析儀檢測PLT。用流式細胞術檢測CD40L表達。采集SS患者外周靜脈血5 mL，肝素抗凝；取肝素抗凝的全血100 μL，加入小鼠抗人CD40L-FITC 10μL，室溫閉光反應30 min；加2 mL溶血劑在室溫下溶解紅細胞，室溫閉光約10 min；PBS洗滌2次，離心5 min(1500 r/min)，棄上清；每份標本加入0.1%多聚甲醛500 μL后用Epics XL流式細胞儀檢測，用CeQuest軟件分析,計算CD40L的陽性表達率。

2 結果

2.1 SS的肺功能變化 與NC組相比較，SS組肺功能參數FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明顯降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。見表1。

2.2 SS患者外周血血小板及血小板活化產物的變化 與NC組比較，SS組PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平明顯升高(Plt;0.05)。見表2。

2.3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化產物的變化 與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的SS組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高(Plt;0.05)。見表3。

表1 RA患者肺功能的變化

表2 SS患者外周血血小板及血小板活化產物的變化

表3 伴或不伴肺功能降低的SS患者外周血血小板及血小板活化產物的變化

2.4 SS患者肺功能參數與血小板及血小板活化產物的相關性分析 相關性分析顯示：SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負相關(Plt;0.05)，FEF25與CD40L呈負相關(Plt;0.01)，FEF50與PAF、GMP-140呈負相關(Plt;0.05，Plt;0.01)，FEF75、PEF與PLT呈負相關(Plt;0.05，Plt;0.01)。見表4。

表4 SS患者肺功能參數與血小板及血小板活化產物的相關性分析

注：表格內為r值；aPlt;0.05，bPlt;0.01

3 討論

SS肺間質病變導致感染以及呼吸功能的衰竭，是其死亡的主要原因之一[5-6]。因此，早期對SS患者肺功能及其影像學的監測尤為重要。通過本研究可以發現，SS組肺功能參數FEV1/ FVC、FEF25、FEF50、FEF75、PEF明顯降低；在SS患者中，肺功能降低的40例，占所有病例的60.61%，肺功能異常率最高為FEF75，其次是FEV1/FVC、FEF50、FEF25、PEF。FEV1/ FVC反映其限制性通氣功能障礙的改變；PEF反映其阻塞性通氣障礙的改變；FEF25、FEF50、FEF75反映其小氣道阻塞及通氣功能的減退。有報道[7]提示，結締組織病肺間質病變可引起小氣道阻塞，表現為FEF25、FEF75下降，且發生率高，本研究結果提示SS患者肺功能改變主要表現為小氣道功能障礙。SS屬結締組織病范疇，病理基礎是血管炎，常表現為血液黏稠度增加，血液流行緩慢，微循環障礙，皮膚血管病變[8]、血管內皮細胞損傷[9]等。在臨床上還發現SS患者存在血小板的水平異常[10]。而血小板活化后可產生多種活性物質PAF、GMP-140、PDGF、CD40L。在我們的研究中發現，SS患者體內存在PLT、PAF、GMP-140、PDGF、CD40L水平的升高。

PAF能激活血小板、單核-巨噬細胞和中性粒細胞，還可直接作用于肺血管內皮細胞膜受體，致使血管內皮細胞的損傷[11]。肺組織可存在PDGF活性增加，從而促進肺動脈平滑肌細胞的增殖、肥大和遷移。GMP-140是一種顆粒膜蛋白。CD40L還可刺激炎癥部位的單核巨噬細胞分泌血管內皮生長因子,增加血管通透性,提高炎性滲透,促進內皮細胞生長、遷移和新生血管形成[12]。當SS患者出現血管受累表現為血管炎時，肺部的血管很容易發生病變，從而出現血管內皮的損傷，導致肺功能的降低，通過我們的研究分析發現與不伴肺功能降低的SS組比較，伴肺功能降低的SS組的PLT、PAF、PDGF水平明顯升高，并且通過相關性分析發現SS患者FEV1/ FVC與PDGF呈負相關，FEF25與CD40L呈負相關，FEF50與PAF、GMP-140呈負相關，FEF75、PEF與PLT呈負相關。說明血小板活化及血小板活化產物的水平升高能夠導致SS患者肺功能的降低。

綜上所述，SS患者不僅存在肺功能的降低，還存在血小板的活化及血小板活化產物的大量分泌，且血小板的活化及其活化產物的大量分泌與SS肺功能降低密切相關。

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Relationshipbetweenplateletactivationandlungfunctioninpatientswithsjogren′ssyndrome

LiuJian,ZhangPingheng,WanLei,HuangDan,HuangChuanbing,ZhangXiaojun,SunYue,LiuLei

(DepartmentofRheumatology，theFirstAffiliatedHospitalofAnhuiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Hefei230031，China)

ObjectiveTo explore the relationship between platelet activation and lung function in patients with sjogren′s syndrome.MethodsSixty-six cases of SS and 30 cases of healthy control were selected.The German Jager MasterScreen automatic lung function tester was used to detect the pulmonary function parameters.Flow cytometrydetection was used to detect the CD40L.PLT was analyzed by automatic blood cell analyzer.And the levels of PAF,GMP-140 and PDGF were detected by ELISA.ResultsCompared to the NC group,pulmonary function parameters of RA were significantly decreased,but PLT,PAF,GMP-140,PDGF and CD40L were significantly increased (Plt;0.05).Forty patients with abnormal lung function,accounted for 60.61%,was observed,in which the highest abnormal lung function was FEF75,followed by FEV1/FVC,FEF50,FEF25and PEF.Compared with SS patients without lung function reduced,PLT,PAF,and PDGF were significantly increased in SS patients with lung function reduced(Plt;0.05).Spearman analysis showed that FEV1/ FVC was negatively correlated with PDGF,and FEV25was negatively correlated with CD40L(Plt;0.01),FEF75and PEF were negatively correlated with PLT(Plt;0.05).ConclusionThere is decreased lung function in patients with SS,which is closely related to platelet activation and products .

Sjogren′s syndrome；Respiratory function tests；Platelet activation

國家自然基金青年項目(81403388);安徽省自然基金項目(1508085QH159);安徽省高校自然科學基金重點項目(KJ2017A281)；安徽省重點實驗室資助項目(1606c08238)

劉健，主任醫師，教授，博士生導師，Email:liujianahzy@126.com

R442.8

A

10.3969/J.issn.1672-6790.2017.06.008

2017-06-16)