大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥監測

汪 璐，曲遠青

(成都軍區總醫院 檢驗科，四川 成都610038)

大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥監測

汪 璐，曲遠青

(成都軍區總醫院 檢驗科，四川 成都610038)

目的研究大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供臨床參考。方法采用法國生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自動微生物鑒定分析儀對2016年1月到2016年12月我院臨床各類標本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯進行鑒定及藥敏分析。結果1920株大腸埃希菌檢出最多的標本分別為中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，膿液(11.15%)，1920株大腸埃希菌ESBLs陽性株943株，陽性率49.11%，其中以積液ESBLs陽性率(64.44%)、創面分泌物ESBLs陽性率(62.50%)較高；1236株肺炎克雷伯菌檢出最多的標本分別為痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，膿液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株549株，陽性率44.42%，其中以血液ESBLs陽性率(57.45%)、積液ESBLs陽性率(50.00%)較高。大腸埃希菌ESBLs陽性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、腫瘤科(12.83%)較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)較高。耐藥分析：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株對阿米卡星、環丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均高于ESBLs陰性株，差異有統計學意義(Plt;0.05)。結論腸桿菌科ESBLs陽性菌株的產生、耐藥率上升以及多重交叉耐藥的普遍性給臨床的治療帶來極大的困難，抗生素的合理使用有重要的臨床意義。

大腸埃希菌；肺炎克雷伯菌；分布；耐藥

(ChinJLabDiagn,2017,21:1893)

大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌均屬腸桿菌科，也是常見的臨床分離菌株，尤其在醫院感染致病菌中兩種菌株占較大比重[1]。由于抗生素的不合理應用，腸桿菌科主導耐藥模式也發生較大轉變，外排泵機制逐漸轉向超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)機制[2,3]。ESBLs可在菌株間傳遞等特質大幅提高了醫院感染的控制困難性。本研究回顧性分析2016年1月到2017年1月我院臨床各類標本分離的大腸埃希菌及肺炎克雷伯的檢出情況，旨在了解大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供臨床參考。

1 材料與方法

1.1菌株來源

菌株來源于2016年1月到2016年12月我院住院病人送檢的各類標本(尿液、痰標本、拭子、血液、積液、膿液等)，共檢出大腸埃希菌1920株、肺炎克雷伯1236株。

1.2培養鑒定

各類標本采集、接種嚴格按第三版《全國臨床檢驗操作規程》進行，標本接種于血瓊脂培養基及麥康凱培養基，35℃培養18-24 h，進行細菌鑒定及藥敏試驗，培養基由鄭州安圖生物有限公司提供。細菌鑒定藥敏分析采用法國生物梅利埃VITEK2COMPACT 全自動微生物鑒定藥敏儀，使用配套試劑，ESBLs檢測采用美國臨床實驗室標準化委員會NCCLS推薦的K-B法，藥物紙片為英國Oxid公司提供，質控標準菌株：大腸埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC70603，質控標準菌株由衛生部臨床檢驗中心提供。

1.3統計學處理

采用統計學軟件SPSS22.0對數據進行分析處理，率比較采用卡方檢驗，以Plt;0.05有統計學意義，藥敏檢測數據應用 WHONET5.6軟件進行統計。

2 結果

2.11920株大腸埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌來源及構成比

1920株大腸埃希菌檢出最多的標本分別為中段尿(38.28%)，痰液(29.11%)，膿液(11.15%)檢出較多，1920株大腸埃希菌ESBLs陽性株943株，陽性率49.11%，其中以積液ESBLs陽性率(64.44%)、創面分泌物ESBLs陽性率(62.50%)較高。1236株肺炎克雷伯菌檢出最多的標本分別為痰液(32.85%)，咽拭子(26.38%)，膿液(15.86%)，1236株肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株549株，陽性率44.42%，其中以血液ESBLs陽性率(57.45%)、積液ESBLs陽性率(50.00%)較高。見表1。

表1 1920株大腸埃希菌及1236株肺炎克雷伯菌來源及構成比(n，%)

2.2大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株科室分布

大腸埃希菌ESBLs陽性株科室分布以泌尿科(22.69%)、ICU(19.62%)、腫瘤科(12.83%)較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內科(30.05%)、泌尿科(19.67%)、ICU(15.85%)較高。見表2。

2.3大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥分析

大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥分析見表3，經卡方檢驗分析，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株對阿米卡星、環丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均高于ESBLs陰性株，差異有統計學意義(Plt;0.05)。

表2 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株科室分布(n，%)

表3 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥率分析(n，%)

注:*Plt;0.05.

3 討論

在臨床治療過程中因抗生素的不合理使用所導致的耐藥問題正日趨嚴重。致命性耐藥菌株在全世界范圍內均多有報道[4]，尤其部分發展中國家抗生素耐藥性問題蔓延迅速，其產生因素極為復雜且并不局限于臨床抗生素的濫用，部分畜牧業利用抗生素來促進牲畜的生長，或某些國家(例如印度)的藥物生產廠商將抗生素釋放到廢水之中導致環境的惡化[5,6]。抗生素使用的監管已刻不容緩。ESBLs為一種細菌質粒介導可水解和滅活諸如頭孢菌素類、青霉素類及氨曲南等單酰胺類抗菌素為特征的β-內酰胺酶，其編碼ESBLs基因可在同種和不同種細菌間擴散，產ESBLs菌株多呈現多重耐藥，由其誘發的感染極難控制[7]。

產ESBLs菌株以革蘭氏陰性桿菌居多，其中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌在臨床分離菌株中較為多見。本研究1920株大腸埃希菌產ESBLs菌株陽性率為49.11%，1236株肺炎克雷伯菌產ESBLs菌株陽性率為44.42%，稍高于臨床其他研究所報道的20%-40%[8,9]，大腸埃希菌引發的感染高于肺炎克雷伯菌，同時數據也說明本院大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌耐藥現象不容樂觀。大腸埃希菌檢出標本主要來源于中段尿、痰液及膿液，多見于尿路感染、呼吸道感染，與臨床研究相符[10]。肺炎克雷伯菌檢出標本則多見于痰液、咽拭子及膿液，多見于下呼吸道感染。大腸埃希菌ESBLs陽性株科室分布以泌尿科、ICU、腫瘤科較高；肺炎克雷伯菌科室分布以呼吸內科、泌尿科、ICU較高。ICU及腫瘤科患者多病情嚴重、免疫力低下、廣譜抗生素大量使用為發生醫院感染的高危人群，醫院感染發生率居高不下，醫院感染的發生加重了基礎疾病的治療難度，感染也是造成重癥患者死亡的重要因素，泌尿科多侵襲性操作、導尿管的留置(留置導管內壁容易形成細菌生物膜，使細菌產生耐藥[11])等，呼吸內科患者接觸各類病原菌、交叉感染的機率較高也是造成兩科室ESBLs陽性株檢出率較高的重要原因。ESBLs陽性質粒編碼，傳播方式多種，接合、轉化、轉導均可造成耐藥基因的擴散[12]，使同種或不同菌種敏感菌變成耐藥菌，另一方面抗生素的選擇作用使得耐藥菌株大量繁殖成為優勢菌群同時也加快了 細菌突變的速度產生相應耐藥菌株甚至新的耐藥菌株[13]。

經統計學分析，本研究中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs陽性株耐藥率對阿米卡星、環丙沙星、左氧氟沙星、頭孢吡肟、頭孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、妥布霉素耐藥率均顯著高于ESBLs陰性株，與臨床其他研究相符。據臨床報道[14]：ESBLs陽性菌株多同時攜帶其他抗生素如氨基糖苷類、磺胺類、氟喹諾酮類多種耐藥基因，菌株往往呈現多重交叉耐藥。國外研究顯示[15]：腸桿菌科ESBLs陽性菌株產生率與三代頭孢菌素的消費量呈現正相關，減少三代頭孢菌素的使用可減少相應腸桿菌科ESBLs陽性菌株產生。本研究中大腸埃希菌對妥布霉素、環丙沙星、左氧氟沙星具有較高的耐藥性，肺炎克雷伯菌對左氧氟沙星、阿米卡星、妥布霉素具有相對較高的耐藥性，與本院臨床相應的經驗性用藥習慣相符。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥情況的出現尤其值得引起臨床重點關注，在類似的國內研究中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對亞胺培南耐藥較少，亞胺培南在臨床仍是治療ESBLs的最后一道防線，其耐藥率上升的危害性不言而喻。腸桿菌科碳青霉烯類抗生素耐藥產生機制多見于AmpC酶過度表達聯合OMP丟失，及PBP對碳青霉烯類親和力的改變[16]。

綜上所述，腸桿菌科ESBLs陽性菌株的產生、耐藥率上升以及多重交叉耐藥的普遍性給臨床的治療帶來極大的困難，抗生素的合理使用有重要的臨床意義。

[1]梁 瓊,歐陽小峰,何文燕,等.重慶市三大片區二級及以下醫院感染病原菌分布及耐藥監測分析[J].國際檢驗醫學雜志,2017,38(3):311.

[2]梁海峰,汲宗惠,劉保紅,等.不同性別間尿路感染病原體分布及耐藥性的差異性分析[J].現代預防醫學,2017,44(5):890.

[3]錢 超,陳 恬,陸樹娟,等.人工誘導亞胺培南耐藥的醫院銅綠假單胞菌耐藥機制研究[J].中華醫院感染學雜志,2017,27(7):1441.

[4]馬煥先,何 蕾,蔡守旺,等.重癥急性胰腺炎繼發膿毒癥的病原菌菌譜及耐藥性分析[J].中華外科雜志,2017,55(5):378.

[5]盧 滔,全晶晶,王燕飛,等.浙江省縣市級醫院社區發作大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌血流感染患者產超廣譜β-內酰胺酶情況分析[J].中華傳染病雜志,2017,35(4):198.

[6]Martelius T,Jalava J ,K?rki T,et al.Nosocomial bloodstream infections caused by Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae resistant to third-generation cephalosporins,Finland,1999-2013:Trends,patient characteristics and mortality[J].Infectious diseases (London,England),2016,48(3):229.

[7]Hertz FB,Sch?nning K,Rasmussen SC,et al.Epidemiological factors associated with ESBL- and non ESBL-producing E.coli causing urinary tract infection in general practice[J].Infectious diseases (London,England),2016,48(3):241.

[8]全晶晶.中國社區發作血流感染產ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行現狀和危險因素分析[D].浙江大學,2016:1-69.

[9]Zykov IN Sundsfjord A,Sm?brekke L,et al.The antimicrobial activity of mecillinam,nitrofurantoin,temocillin and fosfomycin and comparative analysis of resistance patterns in a nationwide collection of ESBL-producing Escherichia coli in Norway 2010-2011.[J].Infectious diseases (London,England),2016,48(2):99.

[10]唐春進,楊淑雅,趙瑞珂,等.醫院獲得性尿路感染大腸埃希菌ESBLs基因型與耐藥性分析[J].檢驗醫學與臨床,2016,13(6):734.

[11]Sharma D,Kumar C,Pandita A,et al.Bacteriological profile and clinical predictors of ESBL neonatal sepsis.[J].The journal of maternal-fetal amp; neonatal medicine:the official journal of the European Association of Perinatal Medicine,the Federation of Asia and Oceania Perinatal Societies,the International Society of Perinatal Obstetricians,2016,29(4):567.

[12]徐 豪,司沛茹,劉 慧,等.4760例新生兒血培養病原菌分布及耐藥性分析[J].臨床兒科雜志,2016,34(5):399.

[13]張 莉,彭 麗,張曉兵，等.下呼吸道臨床分離菌的分布及敏感性變遷[J].中國感染與化療雜志,2016,16(3):363.

[14]Jamil B,Habib H,Abbasi S，et al.Cefazolin loaded chitosan nanoparticles to cure multi drug resistant Gram-negative pathogens[J].Carbohydrate polymers,2016,136:682.

[15]Müller A,Stephan R,Nüesch-Inderbinen M,et al.Distribution of virulence factors in ESBL-producing Escherichia coli isolated from the environment,livestock,food and humans.[J].The Science of the total environment,2016,541:667.

[16]劉曉露,楊 靜,陳新紅,等.抗生素臨床應用控制對新生兒血源性感染的影響[J].中國當代兒科雜志,2016,18(9):796.

ClinicaldistributionanddrugresistancemonitoringofEscherichiacoliandKlebsiellapneumoniae

WANGLu,QUYuan-qing.

(DepartmentofLaoratoryMedicine,GeneralHospitalofChengduMilitaryCommand,Chengdu610038,China)

ObjectiveTo study the clinical distribution and drug resistance of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae,and provide clinical reference for clinical rational drug use.MethodsThe biological Melly VITEK2COMPACT automatic microorganism analyzer on January 2016 to January 2017 in our hospital all kinds of isolates of Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae were identified and the drug sensitivity analysis.ResultsThe specimens of Escherichia coli was the most of 1920 strains were urine (38.28%),(29.11%) sputum,pus (11.15%) detected more,1920 strains of Escherichia coli Coli ESBLs 943 positive strains,the positive rate was 49.11%,the positive rate of ESBLs effusion (64.44%),the positive rate of wound secretion of ESBLs (62.50%) high; 1236 strains of Klebsiella pneumoniae were detected in most of the specimens were sputum (32.85%),pharynx (26.38%),pus (15.86%),1236 strains of Klebsiella pneumoniae ESBLs 549 positive strains,the positive rate was 44.42%,among which the blood ESBLs positive rate (57.45%),the positive rate of ESBLs (50%).Higher ESBLs positive strains of Escherichia coli; distribution of departments in urology (22.69%),ICU (19.62%),oncology (12.83%) high; Klebsiella pneumoniae clinical distribution in the respiratory department (30.05%),urology (19.67%),ICU (15.85%):high; drug resistance analysis of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae Klebsiella pneumoniae ESBLs positive strains to Amikacin,ciprofloxacin,levofloxacin,cefepime,cefoperazone sulbactam,piperacillin tazobactam,tobramycin resistance rate was higher than that of ESBLs negative strains,the difference was statistically Significance (Plt;0.05).ConclusionEnterobacteriaceae ESBLs positive strains,the resistant rate of rise and universal multiple cross resistance to clinical treatment brings great difficulties,has important clinical significance in the rational use of antibiotics.

Escherichia coli;Klebsiella pneumoniae;distribution;drug resistance

1007-4287(2017)11-1893-04

R372

A

2017-02-21)