中藥復方消毒劑對雞舍內空氣浮游菌殺滅和有害氣體降解的試驗研究

范建華，楊蘊蕾，顧華兵，蔣一秀，李尚民，竇新紅*

(1.中國農業科學院家禽所，江蘇揚州 225125；2.上海復振物科技有限公司 200437)

中藥復方消毒劑對雞舍內空氣浮游菌殺滅和有害氣體降解的試驗研究

范建華1，楊蘊蕾2，顧華兵1，蔣一秀1，李尚民1，竇新紅1*

(1.中國農業科學院家禽所，江蘇揚州 225125；2.上海復振物科技有限公司 200437)

為了解國內某廠家生產的植物源中藥復方消毒劑對雞舍現場空氣沉降菌和有害氣體的降解效果。隨機選用5間雞舍，3間分別使用濃度為1∶500、1∶1000的中藥消毒劑和百毒殺進行空氣消毒，2間為飲用水噴霧對照和空白對照，試驗重復3次，每次設計消毒前1 h，消毒后1、4、10和24 h五個時間監測點，采用了細菌自然沉降法和有害氣體檢測儀對雞舍內空氣浮游菌含量和氨氣、硫化氫等有害氣體進行了檢測，同時還挑選5個養殖工人對雞舍內除臭效果感官評分。2個濃度的中藥消毒劑，在消毒后4 h，殺菌率分別達到95.88%和97.32%，消毒后10 h殺菌率最高，分別為95.07%和99.12%，消毒后24 h殺菌率仍維持90%以上(90%殺菌率為消毒劑合格線)。1∶500濃度要優于1∶1000濃度，但二者間差異不顯著(Pgt;0.05)。與消毒前1 h比較，2個濃度的消毒劑四個時間段(消毒后1、4、10和24 h)對氨氣和硫化氫的降解，均差異顯著(Plt;0.05)；對照消毒劑百毒殺在消毒后1 h殺菌率即達到90%以上，并且持續至24 h后，但對氨氣和硫化氫的降解不明顯，僅在消毒后10 h顯著差異(Plt;0.05)；飲用水對照組在噴霧1 h后，殺菌率為12.17%，其后3個時間段都在1%以內，對對氨氣和硫化氫的降解幾乎無影響。消毒24 h后，通過養殖工人感官評判，1∶500稀釋的中藥消毒劑效果最佳，可判定為0級，1∶1000濃度試驗消毒劑組、百毒殺組、飲用水對照組和空白對照組均判定為1級，但藥物組明顯優于對照組。試驗設計的中藥消毒劑對雞舍內環境有顯著改善作用。

中藥復方消毒劑；沉降菌；降解

雞舍空氣中浮游有害菌和糞污發酵產生的氨氣、硫化氫等有害氣體是造成雞病發生和傳播的一個重要因素，同時對周邊居民生活環境也帶來一定威脅[1]。目前控制雞舍氣溶膠載菌和降低有害氣體排放的主要措施是加強飼養管理，改善舍內通風換氣條件，增加有害氣體排放；飼料中適量添加微生態制劑，提高飼料轉化率，從源頭減少有害氣體產生；以及適時向舍內噴灑生物抑菌除臭制劑和消毒劑等[2]。

隨著養殖戶對“防病重于治病”意識的逐步提高，消毒劑的使用在實際養雞生產中越來越顯得普遍和尤為重要[3]。然而，現階段常用的消毒劑多為化學性消毒劑，多數存在腐蝕性大、刺激性強，以及耐藥性頻率高等諸多不良特點[4]。因此，現階段積極研究和開發高效、低毒、無殘留的化學性消毒劑替代品，具有廣闊的前景和市場。

中藥是我國的自然瑰寶，現代醫學研究已證明，許多中藥制劑具有殺滅病原微生物和改善異味功能[5]。鑒于此，本研究將蘆薈、苦楝、麻籽、皂莢等多味中藥提取液，根據中醫藥配伍理論，采用現代復配技術，精煉而成的純天然植物源消毒劑。試驗嘗試用于雞舍現場環境消毒，旨在為今后進一步開發綠色、新型獸用消毒劑提供參考和依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥品 受試藥：植物源中藥復配消毒劑溶液，由上海復振科技有限公司提供，規格1000 mL；對照藥：百毒殺(10%癸甲溴銨溶液)，購自上海派斯德生化有限公司，產品批號111242，規格500 mL。

1.1.2 檢測培養基 空氣沉降菌檢測用TSA培養基平板(9 cm)，購自上海生工生物工程有限公司。

1.1.3 試驗器材 恒溫培養箱(HH-B型，天津試驗儀器廠)、高壓滅菌鍋(SP300F，上海人和科學儀器有限公司)、氨氣和硫化氫二合一便攜式檢測儀(KT602，廣州市白云區同和上林電子儀器商行)，由家禽研究所自行提供。

1.1.4 試驗雞及雞舍 家禽所試驗蛋雞場，隨機選試驗雞舍5間，每間飼養108日齡綠殼蛋雞3000只，階梯式籠具飼養。雞舍長110 m，寬12 m，自動化喂料、飲水和處理雞糞。

1.2 方法

1.2.1 試驗分組 試驗設計5個組別，即對應5間雞舍進行消毒除臭試驗，并重復3次。2間用于試驗藥物，按照廠家推薦濃度，用自然飲用水分別稀釋至1∶500和1∶1000。1間用于對照藥物，按照說明書規定1∶600濃度稀釋。另外2間分別作為飲用水噴霧對照和空白對照。具體藥物使用方法及分組情況見表1。

表1 試驗分組Tab 1 The test groups

1.2.2 樣品采集 樣品采集點按照GB/T 18204.3-2013[6]要求進行。在雞舍中間位置設置1個采集點(離地面1.5 m，離兩邊寬4 m)，在四分之一區域中間位置再設置4個采集點(離地面1.5 m，離兩邊寬6 m)，一共設置5個樣品采集點采集有害菌和有害氣體，如圖1所示。有害菌采集利用TSA一次性平板培養基，在樣品采集點打開蓋子放置5 min后，立即封蓋，并于冷藏包冷藏備用。每個采集點放置1個平板培養基。

圖1 樣品采集點設置方法Fig 1 Sampling point setting method

1.2.3 消毒處理 消毒劑和對照飲用水按照表1方法進行噴霧消毒，統計消毒前1 h、消毒后1、4、10、24 h四個時間段實際平板統計的菌落數和雞舍氨氣、硫化氫等有害氣體的濃度差異。

1.2.4 殺菌率統計及消毒效果判定 采集回的平板培養基于37±0.5 ℃恒溫培養箱培養16～18 h后，計數實際平板培養基上的菌落數，按照奧式公式[7]計算：C=5000N/AT(C表示每立方米菌落數；N表示每皿菌落數；A表示培養皿面積cm2；T表示采樣時間min)。根據菌落計數結果，計算殺菌率。殺菌率=[(消毒前菌落數-消毒后菌落數)/消毒前菌落數]×100%。殺菌率達90%以上者，判為消毒劑合格。

1.2.5 有害氣體監測及除臭效果判定 有害氣體直接采用氨氣和硫化氫二合一便攜式檢測儀進行監測。消毒24 h后，請5位養殖工人對雞舍除臭效果進行感官評分。判定分6個等級，即0級，無臭(80～100分)；1級，稍感覺有臭氣(60～80分)；2級，能感覺有弱臭(40～60分)；3級：明顯感到臭氣(20～40分)；4級：強臭氣(帶有刺激感)(0～20分)；5級：強烈臭氣(有嘔吐、流淚等感覺)(0分)。

1.2.6 試驗數據統計 所有數據采用SPASS 11.6軟件進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 消毒殺菌效果 消毒劑的現場殺菌消毒效果往往受雞舍內通風條件、溫濕度、浮游菌酸堿度和有機質含量等參數影響[8]，因此不同的消毒時間和不同的消毒空間，消毒效果是不一樣的。由表2和圖1顯示，試驗消毒劑和對照消毒劑在消毒后1 h能迅速顯效，在消毒后4 h殺菌率分別達到95.88%、97.32%和94.28%，在消毒后10 h達到峰值，然而隨著消毒時間延長，消毒效果逐漸減弱，但在消毒后24 h殺菌率仍然在90%以上；試驗消毒劑1∶500稀釋濃度要優于1∶1000濃度，但各消毒時間差異不顯著(Pgt;0.05)。對照消毒劑在短時間內顯效更快，在消毒1 h后殺菌率就達到91.05%，與其他組別差異顯著(Plt;0.05)，在消毒24 h后仍然維持95.33%的較高消毒水平。飲用水噴霧對照組消毒后1 h殺菌率為12.17%，但其后3個時間段殺菌率均在1%以內。

表2 消毒劑對雞舍空氣沉降菌消毒殺滅效果Tab 2 The efficacy of disinfectant to air bacteria killing in henhouse

本表僅將試驗消毒劑和對照消毒劑進行比較。試驗消毒劑和對照消毒劑同一作用時間的殺菌率同肩字母表示差異不顯著(Pgt;0.05)，反之不同肩表示差異顯著(Plt;0.05)

This table compares only the test disinfectants and the control disinfectants. There was no significant difference if the shoulder letters was the same at the same disinfection time (P gt; 0.05),but the difference of the shoulder was significant (P lt; 0.05)

圖2 中藥消毒劑殺菌消毒效果Fig 2 The efficacy of the Chinese herbal compound disinfectant to air bacteria killing

2.2 有害氣體降解效果 雞舍內臭味主要是由雞糞及其他微生物發酵后產生的氨氣和硫化氫等有害氣體造成[9]，因此對舍內有害氣體的消解對提高雞生產性能有重要意義。表3結果顯示，無論是試驗消毒劑，還是對照消毒劑，在消毒后1、4、10和24 h與消毒前1 h比較，對氨氣和硫化氫兩種有害氣體都有一定的降解效果，但均隨著使用時間延長，消毒效果逐漸消退。對照消毒劑效果較差，僅

在消毒后10 h和24 h才現顯著消毒效果。飲用水噴霧對照組幾乎對氨氣和硫化氫的降解無影響；除消毒前1 h外，無論是對照消毒劑，還是對照噴霧飲用水，在同一時間段，對有氨氣和硫化氫的降解，與2個濃度的試驗消毒劑比較，差異顯著(Plt;0.05)；試驗消毒劑1∶500濃度與1∶1000濃度比較，在消毒4 h后，對氨氣和硫化氫降解指數明顯小于前者，藥效略佳，但差異不顯著(Pgt;0.05)。

表3 消毒劑對雞舍有害氣體降解效果Tab 3 The efficacy of disinfectant to harmful gas in henhouse

續表

本表僅是將對照消毒劑和飲用水與與試驗消毒劑在同一作用時間進行比較。肩頭帶"*"，表示差異不顯著(Pgt;0.05)，反之表示差異顯著(Plt;0.05)

This table is a comparison of the control disinfectant and drinking water with the test disinfectant at the same disinfection time.There was no significant difference if the shoulder with "*"(P gt; 0.05), but the difference was significant (P lt; 0.05)

2.3 感官除臭效果判定結果 根據5位評分員的感官評分結果，試驗消毒劑和對照消毒劑均有一定的除臭效果，但試驗消毒劑明顯優于對照組，且1∶500稀釋度的試驗消毒劑效果最佳，在消毒24 h后可判定為0級，1∶1000稀釋度的試驗消毒劑、百毒殺組和飲用水組，以及空白對照組，則判定為1級。所有藥物組明顯要好于飲水噴霧和空白對照組，具體見表4。

表4 評分員對雞舍感官評分結果Tab 4 The score of sensory evaluation of raters to the henhouse

3 討論與小結

植物源中藥是我國的傳統國粹，許多中草藥的活性成分能直接抑制或殺滅病原微生物，誘生干擾素，改變細菌、真菌細胞膜的通透性，干擾部分病毒復制所需的酶[10]。因此利用我國豐富的中藥資源，積極開發中藥消毒劑，將是提升我國獸用消毒劑企業產品核心競爭力的一次良好契機。

近年來，關于中藥消毒劑的研究與應用報道越來越多。如胡曉蕙[11]等對一種主要由野菊花、厚樸、蒼術、金銀花、牛蒡子、辛夷等制成的水提劑預防上呼吸道感染進行觀察。結果表明有體外直接抗CBV3、CBV5的作用，從而滅活或減少空氣中的病原微生物，可降低上呼吸道感染發病率；王淑云[12]等研究的由藿香、艾葉、蒼術、石決明、佩蘭等12味藥物組成的復方消毒劑，應用結果表明，該消毒劑對醫院手術室、病房、治療室等場地具有較好的消毒效果，殺菌率達86.1%，對培養菌株金黃色葡萄球菌與大腸桿菌的空間和表面消毒，同樣具有較強的殺菌作用。

本次試驗設計的中藥消毒劑，其主要成分為蘆薈、苦楝、麻籽、皂莢、苦參根、大青葉等多種植物中提取有效成分，其中苦楝、麻籽、苦參根、大青葉等含有豐富的生物堿和植物多酚等活性成分，能夠抑制細菌和真菌等生物酶合成過程，迅速穿透和崩解細菌細胞壁，還能干擾某些腸道和呼吸道寄生病毒的RNA合成；蘆薈和皂莢分別含有蘆薈苷和皂苷，是優良的表面活性去污因子，具有良好的滲透能力和去污能力。其水溶液在振搖時能產生大量持久的蜂窩狀泡沫，可以乳化油脂，有效去除污垢，在實際消毒過程中，能夠有效地防止有機質對其他中草藥消毒效果的破壞。試驗消毒劑按1∶500和1∶1000稀釋，進行雞舍帶雞噴霧消毒，4 h后對空氣中浮游菌的殺菌率均達到了90%以上，但1∶500濃度略佳，與對照消毒劑百毒殺療效相當。飲用水噴霧對照組，在噴霧1 h后殺菌率為12.17%，可能是噴霧后的霧滴在短時間內形成的包膜，迅速隨粉塵沉降，降低了空氣浮游菌數或霧滴本身形成的表面張力，崩解了少量的浮游菌。

傳統觀念多數認為消毒劑主要是殺菌消毒效果[13]，然而本試驗用消毒劑中還含有柑橘果皮和金錢松根皮等中藥，柑橘果皮和金錢松根皮是較好的去味因子，經霧化后，霧化液滴具有很大的表面能，能有效地吸附、絡合空氣中的氨氣和硫化氫等異味分子，同時也能使被吸附的異味分子的立體構型發生改變，削弱了異味分子中的化合鍵，使得異味分子的不穩定性增加，容易與其他分子進行化學反應，最后生成無味、無毒的有機鹽，從而達到異味凈化和降解的目的。試驗證明，中藥消毒劑的兩個濃度梯度，在消毒后4個時間監測點，均對雞舍內氨氣和硫化氫等有害氣體有顯著降解作用，而且通過5位養殖工人的感官效果判定，確實對雞舍內有明顯除臭功效，但飲用水對照和百毒殺消毒劑對照效用不明顯，從而也充分說明了中藥消毒劑的優越性。

綜合以上試驗結果，兼顧實際使用成本，建議試驗設計的中藥消毒劑用于雞場雞舍的最佳消毒方法為，用飲用水1∶500倍稀釋，200 mL/m2的劑量，帶雞持續噴霧消毒10 min，1周3次，對雞舍內環境有較好的改善作用。

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(編輯：陳希)

TheStudyonEffectofChineseHerbalCompoundDisinfectanttoAirBacteriaKillingandDegradationofHarmfulGasesinaHenhouse

FAN Jian-hua1, YANG Yun-lei2, GU Hua-bing1, JIANG Yi-xiu1, LI Shang-min1, DOU Xin-hong1*

(1.Poultryinstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Yangzhou,Jiangsu225125China;2.ShanghaiFuzhenTechnologyCo.,Ltd,Shanghai200437China)

DOUXin-hong,E-mail:douxinhong611@163.com

To study the effect of the Chinese herbal compound disinfectant from a domestic manufacturers to air bacteria killing and degradation of harmful gases. 5 henhouse were selected randomly disinfection, 3 house respectively with a concentration of 1∶500, 1∶1000 Chinese herbal compound disinfectant and Baidusha air disinfection, 2 for drinking water spray control and blank control. The experiment was repeated 3 times, and each was designed 1 h before, 1,4,10 and 24 h five time monitoring points to detect the content of air bacteria, ammonia and hydrogen sulfide, using the bacterial natural sedimentation and harmful gas detection instrument. And 5 breeding workers were selected to sensory testing on the effect of deodorization. The 2 concentration of Chinese medicine disinfectant sterilization rate reached 95.88% and 97.32% respectively after 4 h disinfection, 10 h after were 95.07% and 99.12%, and 24 h after remained above 90% (90% disinfectant sterilization rate is pass line). The concentration of 1∶500 was better than that of 1∶1000, but there was no significant difference between the two groups (Pgt;0.05). Compared with 1 h before disinfection, the degradation of ammonia and hydrogen sulfide (1,4,10 and 24 h) of 2 concentrations of disinfectants for four time periods were significantly different (Plt;0.05). The sterilization rate of the control disinfectant Baidusha reached 90% after 1 h disinfection and continued to 24 h after, but the degradation of ammonia and hydrogen sulfide was not obvious, only after disinfection 10 h significant difference (Plt;0.05). The sterilization rate of drinking water group was 12.17% after spray 1 h, bur the follow of three periods were within 1%, and almost no effect on the degradation of ammonia and hydrogen sulfide. According to the sensory evaluation of the workers, the concentration of 1∶500 Chinese medicine disinfectant was the best, judged to be 0, and other groups were determined as 1. The drug groups was superior to the control group. The experimental results proved the disinfectant has significant effect on improving the henhouse environment.

the Chinese herbal compound disinfectant; settlement bacteria; degradation

10.11751/ISSN.1002-1280.2017.11.06

2017-03-13

A

1002-1280 (2017) 11-0036-08

S853.7

江蘇省農業三新工程項目[SXGC(2016)291]

范建華，博士，從事獸醫藥理和毒理學學研究。E-mail：jqsfjh@hotmail.com

竇新紅。E-mail:douxinhong611@163.com