高效液相色譜法測定10%甲維鹽·甲蟲肼懸浮劑中有效成分含量方法研究

顧愛國　曹磊　王莉

摘要 本文采用高效液相色譜法建立了甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑含量測定方法。結果表明，該方法能夠快速準確測定該樣品中有效成分甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽及甲氧蟲酰肼的含量，符合對其進行質量控制的要求。

關鍵詞 高效液相色譜法；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽；甲氧蟲酰肼；含量測定

中圖分類號 X839.2 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）21-0126-02

Abstract Determination of content on 10% emamectin benzoate·methoxyfenozide SC by HPLC was evaluated.The results showed that the method could be used for rapid and accurate determination of the effective components（emamectin benzoate and methoxyfenozide） in this sample.The aim of this study is to provide scientific basis for the laboratory quality management and control of this product.

Key words HPLC；emamectin benzoate；methoxyfenozide； content determination

10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑為復配低毒殺菌劑，用于防治水稻二化螟與水稻大螟，效果佳[1-2]。因目前尚無該產品質量分析方面的報道，故本文旨在建立高效液相色譜法測定該產品中有效成分含量的方法，以供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀，美國安捷倫公司生產；250 mm×4.6 mm（i.d）不銹鋼柱，內裝ODS-C18，粒徑5 μm填料；電子分析天平（XS105DU型，METTLER TOLEDO）；超聲清洗儀（KQ-300E，昆山市超聲儀器有限公司）；甲醇（含量99.9%，色譜純，德國Merck）；新蒸二次蒸餾水（18.2 MΩ·cm，Milli-Q）；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標樣（純度96.9%，國家農藥質檢中心提供）；甲氧蟲酰肼標樣（純度99.0%，國家農藥質檢中心提供）；10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑（企業提供）。

1.2 色譜條件

流動相：甲醇+乙腈+0.3%氨水溶液=45+55+10（v/v/v）；流速1.2 mL/min；柱溫25 ℃；檢測波長230 nm；進樣體積10 μL。

1.3 試驗方法

1.3.1 標樣溶液的配制。分別精密稱取0.02 g甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標樣及0.02 g甲氧蟲酰肼標樣（精確至0.000 1 g），置于同一100 mL容量瓶中，加甲醇后超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻并過濾即得[1-2]。

1.3.2 樣品溶液的配制。稱取0.4 g試樣（精確至0.000 1 g），置于100 mL容量瓶中，加甲醇后超聲溶解，冷卻至室溫后用甲醇稀釋至刻度，搖勻并過濾即得[3-4]。

1.3.3 測定。在上述條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針有效成分峰面積相對變化小于1.5%后，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序測定。

1.3.4 計算。試樣中甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽及甲氧蟲酰肼的質量分數ω按下式計算：

1.4 方法學驗證

1.4.1 檢出限及定量限。按照1.3.1所述，配置成0.2 mg/mL的標準物質混合溶液進行測定，按3倍信噪比和10倍信噪比分別計算檢出限和定量限。

1.4.2 線性關系。分別精密稱取甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽標樣及甲氧蟲酰肼標樣各0.05 g（精確至0.000 1 g）置于同一50 mL容量瓶中，加入甲醇后超聲溶解并稀釋至刻度即得到1.0 mg/mL工作標準液，再分別稀釋至濃度為0.05、0.10、0.20、0.50 mg/mL的工作標準溶液，根據結果擬合回歸線性方程[5-6]。

1.4.3 精密度。將1.3.1所述配置的標準物質混合溶液連續進樣5次，計算平均峰面積及相對標準偏差（RSD）。

1.4.4 回收率。在空白樣品中分別添加0.05、0.20、1.00 mg/mL的混標溶液，進行加標回收率測定，每個添加水平各配置3份供試品溶液（n=9），計算平均回收率及相對標準偏差（RSD）。

2 結果與分析

2.1 檢出限及定量限

試驗得出甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和甲氧蟲酰肼的檢出限分別為1.98、0.16 μg/mL，定量限分別為 6.59、0.53 μg/mL。

2.2 線性關系

如圖1所示，甲氧蟲酰肼線性方程 y=6 560.7x+2 098.1（n=5，R2=0.999 8）；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽線性方程y=3 966.5x+1 280.7（n=5，R2=0.999 4），線性范圍均為50～1 000 μg/mL。

2.3 精密度和回收率

如表1所示，該方法精密度良好，滿足檢測要求。被測物為甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽時，添加水平為0.05 mg/mL時，測得3 份供試樣品的平均回收率分別為98.7%、98.9%、98.9%；添加水平為0.20 mg/mL時，測得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.0%、98.9%；添加水平為1.00 mg/mL時，測得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.2%、98.9%。RSD為0.15%。被測物為甲氧蟲酰肼時，添加水平為0.05 mg/mL時，測得3份供試樣品的平均回收率分別為99.1%、99.0%、99.3%；添加水平為0.20 mg/mL時，測得3份供試樣品的平均回收率分別為99.3%、99.0%、98.9%；添加水平為1.00 mg/mL時，測得3份供試樣品的平均回收率分別為99.2%、98.8%、99.1%。RSD為0.18%。可見，在添加3個濃度混標溶液后，回收率及相對標準偏差均符合檢測要求。

2.4 樣品測定

用10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑作樣品，對其有效成分進行檢測，結果如圖2、3所示。可知該檢測方法具有峰型好、分離度高、定量準確等特點。

3 結論

建立的10%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽·甲氧蟲酰肼懸浮劑含量的高效液相色譜檢測方法，完全適用于該產品有效成分的含量測定。

4 參考文獻

[1] 王春，張顧旭，陸爽，等.25%阿維菌素·甲氧蟲酰肼SC防治稻縱卷葉螟藥效試驗簡報[J].上海農業科技，2015（4）：141-142.

[2] 孫淑君，游秀峰.阿維菌素與甲氧蟲酰肼混配對稻縱卷葉螟的聯合作用研究[J].現代農藥，2014，13（5）：41-43.

[3] 張慧榮.高效液相色譜法在氨基苯磺酸類物質和植物生長調節劑中的檢測方法研究[D].蘭州：西北師范大學，2013.

[4] 張小軍.水產品中三類藥物多殘留的HPLC和UPLC-MS/MS分析方法研究[D].杭州：浙江工商大學，2012.

[5] 吳藻光.高效液相色譜在環境監測中的應用[J].環境研究與監測，2011，24（1）：53-56.

[6] 許海棠.高效液相色譜—質譜法在中成藥分析中的應用研究[D].南寧：廣西大學，2008.endprint