冠心病患者經皮冠狀動脈介入治療前后早期外周血中血小板因子4及Toll樣受體4水平變化①

張明亮，高 山

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

冠心病患者經皮冠狀動脈介入治療前后早期外周血中血小板因子4及Toll樣受體4水平變化①

張明亮，高 山

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探討對于冠心病患者經皮冠狀動脈介入治療前后外周血中血小板因子4(PF4)及Toll樣受體4(TLR4)濃度變化及其臨床意義。方法：將85例PCI患者隨機分為4組，分別是置入一枚支架組32例，置入兩枚支架組23例，置入三枚支架組7例。對照組23例，為冠狀動脈造影正常患者。用ELISA法檢測二者在介入前后的濃度。結果：在PCI手術后，PF4濃度即刻較術前下降，隨后逐漸升高，術后24h達到峰值。其中置入三枚支架組PF4濃度在術前及峰值水平均較其他兩組最高，置入一枚支架組水平是最低的，置入兩枚支架組位于二者之間，對照組PF4在手術前后無明顯變化。結論：PF4和TLR4水平在PCI前后有動態改變，可能與內皮損傷有關，心臟支架的數量與術后造成的血小板激活及內皮損傷呈正相關。

PF4；TLR4；冠心病

冠狀動脈內支架植入術(percutaneous coronary intervention，PCI)是經皮冠狀動脈介入治療的一種重要方法。在臨床應用20多年來，正逐漸發展成為一種成熟的冠心病治療方法，為冠心病患者帶來了巨大的福音，但PCI手術的一些負面的影響仍然值得我們繼續去重視及研究，如何有效治療治療冠心病已以為我們面對的重要課題[1]。這些負面的影響機制涉及到血小板活化血栓形成，平滑肌細胞(smooth muscle cells，SMC)增殖、遷移，局部的炎癥反應、各種細胞因子的釋放等方面。Toll樣受體作為介導天然免疫與炎癥反應的主要模式識別受體，其識別內、外源性的配體后通過激活核因子-кB途徑誘導一系列炎癥因子參與動脈粥樣硬化的發生與發展[2]，Gibson等研究提示：在動脈粥樣硬化患者中TLR4的表達水平較正常人有顯著的升高，TLR4在刺激血管平滑肌細胞增殖方面具有重要的影響[3]。PF4是血小板活化及血栓形成過程的一種重要標志物。研究表明：PF4 可能通過上調TLR4影響細胞基質重建，在血管平滑肌細胞的增殖、遷移發揮重要作用[4]。但關于PCI治療是否對血小板因子4和Toll樣受體4的表達情況造成影響以及這種影響是否對血管內皮損傷具有作用，尚未見報道。本研究擬通過測定在PCI治療前后外周血中的PF4、TLR4濃度變化水平來進一步了解PCI前后血小板活性變化及SMC增殖、遷移的起始變化及局部的炎癥反應。本文的研究為PCI前后的預防性治療提供一種新途徑，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2015-09～2016-04在我院導管室行PCI術的85例患者為實驗對象，年齡48～76歲，平均(55±1.2)歲；其中，置入一枚支架組32例，置入兩枚支架組23例，置入三枚支架組7例，對照組23例。為冠狀動脈造影正常患者，各組之間在性別，年齡等基本情況上無顯著差別，不具有可比性。

1.1.1 入選標準

冠心病的確診參照第8版《內科學》冠心病診斷標準，選取的患者均為初步診斷為冠心病，所有患者常規給予：口服阿司匹林腸溶片，100mg每天一次；瑞舒伐他汀鈣，10mg每晚一次；氯吡格雷片75mg每天一次；行冠脈造影檢查，血管狹窄程度≥75%，且患者自愿接受支架置入治療。

1.1.2 排除標準

最近行手術治療及有外傷史；有嚴重肝、腦、腎等功能損害；存在感染、風濕及惡性腫瘤者；既曾經行主動脈夾層支架治療，腎血管狹窄行腎血管支架治療，外周血管病行支架治療等患者。

1.2 方法

實驗組于術前，術后即刻，24h，48h，72h取外周靜脈血4mL；對照組于術前及術后抽取外周靜脈血4mL。分別加入到一次性真空采血管中，3000r/min離心10min，離心后將血清分裝到Ep管中，-80℃冰箱保存待測。然后分別應用酶聯免疫試劑盒(ELISA技術)檢測兩個因子的濃度[5]。顯色后于酶標儀上分別測出二者的吸光度，并最終計算出樣品濃度。

1.3 統計學方法

采用SPSS19.0統計軟件包統計數據，所得實驗數據均以均數±標準差表示，多樣本均數比較及兩兩比較，方差采用P值檢驗，方差不齊采用Dunnett T3檢驗進行分析。

2 結果

2.1冠心病患者經皮冠狀動脈介入治療前后外周血中PF4濃度變化

冠心病患者與手術治療前相比，手術后即刻外周血中PF4濃度降低，此后開始升高，24h達高峰，然后開始回落，在72h基本回落到術前的水平。且隨著置入支架的數量的增加PF4濃度也隨著增加，三枚支架組濃度最高，對照組無明顯變化。

表1 患者經皮冠狀動脈介入治療前后外周血中PF4濃度變化

*與對照組相比較P<0.05，△與一枚支架組比較P<0.05，▲與二枚支架組比較P<0.05。

2.2冠心病患者經皮冠狀動脈介入治療前后外周血中TLR4濃度變化

分別測定在術前、術后0h、24h、48h、術后72h，手術后即刻外周血中TLR4濃度下降，此后開始升高，在48h達到高峰，此后開始回落，但回落幅度略緩慢，且隨著置入支架的數量的增加TLR4濃度也隨著增加，三枚支架組濃度最高，對照組無明顯變化。

表2 患者經皮冠狀動脈介入治療前后外周血中TLR4濃度變化

*對照組相比較P<0.05，△與一枚支架組比較P<0.05，▲與二枚支架組比較P<0.05。

3 討論

單純經皮血管內成形術(PTCA)已經開始了研究藥物洗脫支架置入等高精尖技術的綜合應用，使PCI術后患者支架內血栓形成及再狹窄率大大的降低了。但在PCI手術過程中對血管內膜的損傷及對斑塊的穩定性的破壞仍然存在，仍然需要我們不斷的研究來進一步降低這種負面的效應。

PCI置入術是一種有創性操作，術中會對血管造成機械性的刺激及損傷，這種持續性刺激及損傷能激活內皮細胞，血小板，單核巨噬細胞，血管平滑肌細胞，中性粒細胞，淋巴細胞等，引起機體和血管發生急性和慢性的炎癥反應，合成一系列炎癥因子，包括C反應蛋白，基質金屬蛋白酶，白細胞介素1、6、8，腫瘤壞死因子，粘附因子等，誘發炎癥反應，促進白細胞及血小板在內皮下的黏附和聚集，并使血管平滑肌細胞由收縮型轉化為合成型，使其從中膜向內膜遷移增生以及細胞外基質合成，最終導致血管再狹窄[6]。而研究顯示：Toll樣受體作為介導天然免疫與炎癥反應的主要模式識別受體，其識別內、外源性的配體后通過激活核因子-кB途徑誘導一系列炎癥因子參與動脈粥樣硬化的發生與發展[2]，Gibson等研究提示：在動脈粥樣硬化患者中TLR4的表達水平較正常人有顯著的升高，TLR4在刺激血管平滑肌細胞增殖方面具有重要的影響[3]。本實驗結果顯示在PCI術后0h一過性下降，24～48h開始升高，48h達到高峰，此后開始降低，且隨著支架放置數量的增多，Toll樣受體4的水平也隨之上升，這種結果與PCI術后Toll樣受體4水平發生改變，從而加重炎癥反應，在這一過程中Toll樣受體4起到關鍵作用。

同時，PCI造成血管內皮的損傷使內膜下基質暴露血流中，誘發了凝血反應，造成血小板的活化聚集，最終導致了血栓的形成。血小板因子4作為血小板激活后α顆粒分泌的兩種重要蛋白之一，能直接反應血小板的活化程度[7]，本實驗系統顯示了PCI前后血小板活性的改變，揭示了在PCI術中造成的血管內膜損傷及刺激所造成的炎癥反應，對血小板的影響。冠心病患者PF4水平在術后0h較術前下降，此后開始升高，24h達高峰，以后逐漸下降，72h回到術前水平。術后即刻下降考慮與術中給予肝素抗凝有關，此后升高考慮與內皮損傷帶來的急性炎癥反應有關，此后PF4水平逐步回落在72h到術前水平，可能與炎癥的消退有關。

本實驗通過系統研究揭示了冠心病患者PCI術治療前后PF4及TLR4的水平變化，同時明確了心臟支架置入數量與PCI術治療后血小板激活及內皮損傷程度呈正相關趨勢，對PCI術治療后的血管內皮損傷、血小板活化及炎癥反應有了更深入的了解，為PCI治療后PF4及TLR4的深入研究提供了理論基礎，為PCI術治療后的相關藥物臨床應用提供了新的研究思路。

[1]張弘興. 阿托伐他汀聯合曲美他嗪治療冠心病心絞痛的效果[J]. 黑龍江醫藥科學，2014, 37(5):56-58

[2]Adam E, Mullick Peter S, Tobias Linda K, et al. Toll-like receptors and atherosclerosis[J]. Immun Res, 2006, 34(3):193-209

[3]Gibson FC.Yumoto H, Takahashi Y. et al Innate immune signaling and Porphyromonas gingivalis-accelerated atherosclerosis[J]．JDents, 2006, 85(2):106-121

[4]趙戰芝，何釩，唐雅玲.血小板因子4經Toll樣受體4上調巨噬細胞基質金屬蛋白酶9表達[J]. 中國動脈硬化雜志，2014, 22(8):769-772

[5]張超，潘佳秋，郭曉聞. 新診斷男女性2型糖尿病患者血清Toll樣受體4水平變化及影響因素[J]. 黑龍江醫藥科學，2015, 38(5):6-8

[6]李巍，黃嵐. PCI術后再狹窄的病理生理及其危險因素[J]. 中國動脈硬化雜志，2013, 21(4): 378-379

[7]Kaplan KL, Owen J. Plasma levels of β-thromboglobulin and platelet factor 4 as indicators of platelet activation in vivo[J]．Blood, 2003,57:119

張明亮(1986～)男，黑龍江巴彥人，在讀碩士研究生。

高山(1963～)男，黑龍江佳木斯人，碩士，教授，主任醫師，碩士研究生導師。E-mail：gaoshan1963@sina.com。

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1008-0104(2017)05-0032-02

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