規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)豬瘟抗體水平的檢測(cè)

秦陳林 印向陽(yáng) 張 杰

（如東縣馬塘畜牧獸醫(yī)站，江蘇南通 226401）

規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)豬瘟抗體水平的檢測(cè)

秦陳林 印向陽(yáng) 張 杰

（如東縣馬塘畜牧獸醫(yī)站，江蘇南通 226401）

準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)抗體水平是防控豬瘟的重要環(huán)節(jié)。為了跟蹤普查豬瘟免疫狀況和評(píng)價(jià)免疫效果，2015～2017 年期間，采集江蘇省部分地區(qū)28家規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)的豬血清，采用阻斷ELASA 方法進(jìn)行豬瘟疫苗免疫抗體水平檢測(cè)，以及時(shí)了解豬瘟免疫效果。結(jié)果顯示，28家規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟抗體平均免疫合格率達(dá)80.44%。

豬瘟抗體；檢測(cè)分析；規(guī)模豬場(chǎng)

豬瘟是由豬瘟病毒引起的一種急性、接觸性傳染病。一年四季均可發(fā)病，主要通過直接接觸，或因接觸被污染的媒介物而發(fā)病。豬瘟在我國(guó)被列為一類動(dòng)物傳染病，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。生產(chǎn)上，主要通過疫苗免疫預(yù)防，抗體水平監(jiān)測(cè)是評(píng)價(jià)免疫效果的重要手段，可為制定免疫程序提供科學(xué)依據(jù)。本試驗(yàn)應(yīng)用美國(guó)IDEXX 公司提供的豬瘟病毒抗體阻斷ELASA 檢測(cè)方法及試劑盒，對(duì)2015 年至2017 年采集28 家規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)不同生長(zhǎng)階段的豬血清進(jìn)行豬瘟抗體水平檢測(cè)，以及時(shí)了解免疫效果，為豬瘟防控提供依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 待測(cè)血清樣品

2015～2017 年，采集了 28 家規(guī)模豬場(chǎng)進(jìn)行抽樣普查。經(jīng)耳靜脈或前腔靜脈無菌采集血液樣品，自然凝固后低溫離心分離血清，置4℃冰箱，保存?zhèn)溆谩Ｆ渲?0～65 日齡仔豬血清1326 頭份，90～95日齡生長(zhǎng)豬血清1326頭份，150～160 日齡育肥豬血清1208 份。

1.2 檢測(cè)試劑

包被豬瘟病毒96 孔板、10 倍濃縮洗液、樣品稀釋液、酶標(biāo)抗豬瘟抗體、TMB 底物、終止液、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品、陰性標(biāo)準(zhǔn)品，均為美國(guó)IDEXX公司診斷試劑產(chǎn)品。全自動(dòng)酶標(biāo)儀為美國(guó)伯樂產(chǎn)品（BIO-RAD 550），移液器為德國(guó)EPPENDORF產(chǎn)品。

1.3 檢測(cè)方法

抗體檢測(cè)按照美國(guó)IDEXX 公司《豬瘟抗體的阻斷診斷方法》進(jìn)行。結(jié)果計(jì)算用%IN 判定，計(jì)算公式：% IN =[（陰性對(duì)照- 樣品數(shù)）/陰性對(duì)照]×100。

陰性對(duì)照的平均OD450 大于0.50，陽(yáng)性對(duì)照的阻斷率大于50%，檢測(cè)結(jié)果有效。如果被檢樣本的阻斷率大于或等于40%，該樣本可判為陽(yáng)性（有CSFV 抗體存在）；如果被檢樣本的阻斷率小于或等于30%，該樣本可判為陰性（無抗CSFV 抗體存在）；如果被檢樣本的阻斷率在30～40% 之間，該樣本可判為可疑。可疑樣品2 周后再次進(jìn)行檢驗(yàn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同年份豬瘟抗體水平的檢測(cè)結(jié)果（詳見表1）

由表1 可以認(rèn)為不同年份的規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟免疫統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差異。

表1 不同年份規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟抗體水平的檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同豬群豬瘟抗體水平的檢測(cè)結(jié)果（詳見表2）

由表2可以認(rèn)為不同日齡的規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟免疫統(tǒng)計(jì)學(xué)分析有顯著性差異。

表2 不同豬群豬瘟抗體水平的檢測(cè)結(jié)果

3 討論

本次規(guī)模豬場(chǎng)豬瘟抗體檢測(cè)28家豬場(chǎng)，豬瘟免疫保護(hù)狀態(tài)尚可，豬群具有一定的群體免疫力，降低了規(guī)模豬場(chǎng)對(duì)豬瘟的易感性和傳染性。但在飼養(yǎng)環(huán)境條件不良、氣候改變、應(yīng)激等情況下，難以抵御強(qiáng)毒攻擊，仍存在著一定的安全隱患。2015～2017年期間某地區(qū)28家規(guī)模化豬場(chǎng)的豬瘟抗體水平基本穩(wěn)定，陽(yáng)性率在76.16～88.39%，說明近年來該省大力推行豬瘟疫苗免費(fèi)接種，提高豬群群體免疫力，已經(jīng)取得一定成效。雖然各規(guī)模豬場(chǎng)均十分重視和主動(dòng)實(shí)施豬瘟疫苗的免疫接種工作，但仍有部分生長(zhǎng)豬血清抗體水平達(dá)不到保護(hù)水平。推測(cè)其可能原因，一是抗體水平的高低與采樣時(shí)間有一定影響，由于60 日齡左右仔豬的部分血樣是在豬瘟第二次免疫后較短時(shí)間內(nèi)采集，有可能檢測(cè)不出抗體或抗體水平較低有關(guān)。二是某些豬場(chǎng)普遍表現(xiàn)為低水平的抗體可能與豬場(chǎng)圓環(huán)病毒等疾病混合感染有關(guān)。三是可能與疫苗因素或疫苗接種技術(shù)有關(guān)，免疫程序不合理，往往可導(dǎo)致抗體水平較低。60～65 日齡仔豬抗體陽(yáng)性率相對(duì)較低，可能與二免接種時(shí)間及母源抗體抑制有關(guān)，但都高于農(nóng)業(yè)部要求的豬瘟免疫合格率70%以上。規(guī)模化豬場(chǎng)應(yīng)定期開展豬瘟免疫抗體水平檢測(cè)，及時(shí)掌握豬瘟群體免疫力，以有利于豬瘟預(yù)防和控制流行。有報(bào)道規(guī)模豬場(chǎng)應(yīng)開展種豬扁桃體中豬瘟病毒檢測(cè)，筆者建議豬場(chǎng)應(yīng)定期采血檢測(cè)豬瘟抗體，一般每年應(yīng)進(jìn)行3～4 次，采樣比例為5～10%。

從檢測(cè)結(jié)果可以看出，抗體合格率基本與養(yǎng)殖規(guī)模成正比，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)免疫效果普遍較究其原因主要是因?yàn)橐?guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)防疫意識(shí)更強(qiáng)烈，思想上一般更積極主動(dòng)，有專門獸醫(yī)專人專職負(fù)責(zé)防疫，防疫效果有保障，在防疫上也更能投入大量人力物力，且能夠按照免疫程序嚴(yán)格執(zhí)行。值得一提的是規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)因?yàn)榻?jīng)常進(jìn)行抗體檢測(cè)，因而對(duì)免疫時(shí)機(jī)把握更加準(zhǔn)確。目前散養(yǎng)戶還不能做到免疫抗體的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，在免疫前未能掌握其具體抗體水平，容易造成盲目免疫，達(dá)不到理想的免疫效果。除此而外，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)畜禽的飼養(yǎng)環(huán)境更為注重，能夠采取嚴(yán)格的消毒措施，最大限度降低養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)病原微生物的含量，減少病原微生物滋生藏匿的空間。

[1]馬強(qiáng).規(guī)模化豬場(chǎng)非典型豬瘟綜合防治措施研究及應(yīng)用[D].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.