食管鱗癌組織中P53、Caspase-3蛋白的表達及其臨床意義

馮怡錕(鄭州大學第二附屬醫院病理科，河南 鄭州 450014)

食管鱗癌組織中P53、Caspase-3蛋白的表達及其臨床意義

馮怡錕
(鄭州大學第二附屬醫院病理科，河南 鄭州 450014)

目的探討P53、Caspase-3在食管鱗癌組織中的表達及其臨床意義。方法采用免疫組化S-P法檢測80例食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織中P53、Caspase-3蛋白表達。結果食管鱗癌組織中P53蛋白陽性表達率為75.00%(60/80)，明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.50%(10/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽性表達率為40.00%(32/80)，明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。P53蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)。結論P53的高表達及Caspase-3蛋白的低表達與食管鱗癌發生、發展有關，兩者異常表達可能與食管癌的發生、發展關系密切，兩者的聯合檢測可能在食管鱗癌的診斷中具有重要價值。

食管鱗癌；P53；Caspase-3；免疫組化；原位雜交

食管癌是我國高發的消化系統惡性腫瘤之一，其在河南地區的發病率居全國前列，且有逐年增加的趨勢，食管癌治療的關鍵是早診早治，因此，探討臨床可以推廣應用的創傷輕、方法簡單且費用較低的確診食管癌的檢測手段一直是目前關于食管癌臨床診斷的熱點問題。P53是在多種腫瘤組織中均可發現的抑癌基因，現已被證實在多種腫瘤的發生、發展中發揮重要作用，也已經被用于多種腫瘤的定期檢查[1]。Caspase-3是Caspase家族中被研究較多，且功能較為廣泛的一種成員[2]。本研究采用免疫組化S-P法檢測80例食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織中P53、Caspase-3蛋白的表達，探討兩者的具體表達情況及其與食管癌臨床病理學參數之間的關系，并分析兩者在食管鱗癌發生、發展中的具體作用。

1 材料與方法

1.1材料入組鄭州大學第二附屬醫院病理科2017年1月至2016年6月收集的手術切除的食管鱗癌組織及其癌旁正常食管黏膜組織(手術切緣/距癌組織邊緣4 cm以外的組織)標本80對，所有80例入組食管鱗癌患者術前均未接受過放療、化療、靶向治療、免疫治療等治療，臨床數據完整，并由2名高年資病理科醫生復審病理切片證實為食管鱗癌。手術切除標本取出后均經質量分數4%多聚甲醛固定，經常規脫水、石蠟包埋等制成石蠟塊，并進行5 μm的連續切片。80例食管鱗癌患者中，男53例，女27例；年齡29～73歲，中位年齡56歲，其中≥60歲者30例，<60歲者50例；腫瘤浸潤程度：浸潤到黏膜下層或淺肌層者23例，浸潤到深肌層者26例，浸潤至全層或外膜者31例；有淋巴結轉移者47例，無淋巴結轉移者33例。

1.2主要藥品與試劑P53、Caspase-3蛋白鼠抗人多克隆抗體購自美國Santa Cruz公司，S-P免疫組化試劑盒及顯色試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.3免疫組化步驟按照S-P免疫組化試劑盒說明進行各組織的免疫組化染色，并經高壓抗原修復，DAB顯色,蘇木素復染等程序后，進行結果判定，其中采用已知陽性切片作陽性對照；用PBS代替一抗作陰性對照。

1.4免疫組化結果判斷P53陽性產物定位于細胞核，而Caspase-3陽性產物定位于細胞質，陽性染色均為黃色或棕黃色，根據組織標本中陽性細胞百分比以及其染色程度來進行綜合判定。每張切片隨機選取10個高倍鏡視野，分別計數100個細胞，陽性細胞計數：≤10%為0分，>10%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%～100%為3分。陽性細胞染色程度：無色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，黃褐色為3分。兩者乘積作為該切片的積分，≤2分為陰性，>2分為陽性。

1.5統計學處理采用SPSS 17.0處理實驗數據，P53、Caspase-3蛋白等陽性表達率的比較采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1P53、Caspase-3蛋白在不同食管組織中的表達食管鱗癌組織中P53蛋白陽性表達率為75.00%(60/80)，明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.5%(10/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽性表達率為40.00%(32/80)，明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2P53、Caspase-3蛋白的表達與食管鱗癌患者臨床病理參數的關系P53蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)。見表1、2。

表1 P53蛋白的表達與食管鱗癌患者臨床病理參數的關系

3 討論

目前，食管癌的治療，早期以手術切除為主，而晚期患者大多因周圍嚴重浸潤或淋巴結轉移而喪失了手術機會，使得預后較差，生存期也明顯縮短。因此，食管癌的早期診斷是非常重要的，而食管癌的活檢確診主要依靠病理切片，免疫組化的確診意義非常重要。P53在多種腫瘤組織中均存在高表達，且已被證實與腫瘤的發生、發展關系密切，而且P53的檢測也可用于多種腫瘤的預后和生存狀況評估[3-4]。Caspase-3是Caspase家族中外界刺激因素啟動細胞凋亡的關鍵因子，是細胞凋亡程序的主要執行者，是細胞凋亡蛋白酶級聯反應的關鍵步驟[5-6]。食管鱗癌組織中P53蛋白陽性表達率為75.00%(60/80)，明顯高于癌旁正常食管黏膜組織的12.50%(10/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。食管鱗癌組織中Caspase-3蛋白陽性表達率為40.00%(32/80)，明顯低于癌旁正常食管黏膜組織的91.25%(73/80)，比較差異有統計學意義(P<0.05)。P53蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)，Caspase-3蛋白的陽性表達率與腫瘤分化程度、淋巴結轉移均有關(P均<0.05)。綜上所述，P53的高表達及Caspase-3蛋白的低表達與食管鱗癌發生、發展有關，兩者異常表達可能與食管癌的發生、發展關系密切，兩者的聯合檢測可能在食管鱗癌的診斷中具有重要價值。

表2 Caspase-3蛋白的表達與食管鱗癌患者臨床病理參數的關系

[1] 宋慧琴，李道明，金家巖.乳腺癌組織中HPA 蛋白的表達及其與ER、PR、HER-2、P53表達的相關性[J].腫瘤基礎與臨床,2016,29(1):15-17.

[2] 南振華，潘靈輝.嗎啡對人食管癌細胞Ec109生長及p53、Caspase-3基因表達的影響[J].中國癌癥防治雜志,2016,8(2):73-77.

[3] 李鐵志，石彥濤，高少林, 等.VEGF、P53 的表達與食管癌臨床特征及預后的關系[J].河北醫藥,2017,39(12):1833-1835.

[4] 杜蘭寧，王麗娜，李淑萍.p53 和Bcl-2在食管鱗癌組織中的表達及與放化療療效的關系[J].蘭州大學學報(醫學版),2016,42(4):43-46.

[5] 馬玉靜,李道明, 朱俊興,等.HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白在食管鱗癌組織中的表達及相關性分析[J].腫瘤基礎與臨床,2008,21(2):96-98.

[6] 周正斌，周瑞，黃震，等.生存素和Caspase-3蛋白在食管癌前病變及癌組織中的表達及意義[J].江蘇大學學報(醫學版), 2014, 24(4): 342-345.

ExpressionsandSignficanceofP53andCaspase-3intheEsophagealSquamousCarcinomaTissues

FENG Yikun
(DepartmentofPathology,theSecondAffiliatedHospital,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450014,China)

ObjectiveTo investigate the expressions and clinical significances of P53 and Caspase-3 protein and mRNA in the esophageal squamous cell carcinoma tissues.MethodsThe expressions of P53 and Caspase-3 protein in the 80 cases of esophageal squamous cell carcinoma tissues and 80 cases of adjacent normal tissues were detected by immunohistochemistry.ResultsThe positive expression rate of P53 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [(75.00%(60/80)vs12.50%(10/80),P<0.05].The positive expression rate of Caspase-3 protein in the esophageal squamous carcinoma tissues was significantly higher than that of the adjacent normal tissues [40.00%(32/80)vs91.25%(73/80),P<0.05].The P53 protein expression was associated with tumor differentiated degree, infiltration depth and lymph node metastasis (P<0.05); the Caspase-3 protein expression was associated with tumor differentiated degree and lymph node metastasis (P<0.05).ConclusionThe P53 high expression and Caspase-3 low expression may be related to the occurrence and development of esophageal squamous carcinoma.

esophageal squamous cell carcinoma; P53; Caspase-3; immunohistochemistry

馮怡錕(1983-)，女，碩士，主要從事腫瘤病理學相關研究。E-mail:13783566437@163.com

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.05.005

R735.1；R730.23

A

1673-5412(2017)05-0382-03

2016-10-13)