自體CIK聯(lián)合rhIL-2對B細胞惡性淋巴瘤患者T 細胞亞群及β2 微球蛋白水平的影響

李 蒲 李 菲 魏艷林 張榮艷 莫瑞濱 紀德香

(南昌大學第一附屬醫(yī)院血液科，江西 南昌 330000)

自體CIK聯(lián)合rhIL-2對B細胞惡性淋巴瘤患者T 細胞亞群及β2 微球蛋白水平的影響

李 蒲 李 菲 魏艷林 張榮艷 莫瑞濱 紀德香

(南昌大學第一附屬醫(yī)院血液科，江西 南昌 330000)

目的探討自體細胞因子誘導殺傷細胞(CIK)聯(lián)合重組人白細胞介素(rhIL)-2對B細胞惡性淋巴瘤患者T 細胞亞群及β2 微球蛋白水平的影響。方法接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細胞惡性淋巴瘤患者為觀察組，并選擇同期未接受CIK聯(lián)合IL-2治療的46例B細胞惡性淋巴瘤患者為對照組。比較兩組T細胞亞群、β2 微球蛋白、生活質量及臨床療效。結果治療后，觀察組CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平均比同組治療前及對照組高(P<0.05)；β2微球蛋白比同組治療前及對照組低(P<0.05)；觀察組臨床療效總緩解率高于對照組(P<0.05)；觀察組軀體功能、角色功能、認知功能、情緒功能、社會功能得分均比同組治療前及對照組高(P<0.05)。結論在B細胞惡性淋巴瘤患者中應用自體CIK聯(lián)合rhIL-2方案效果顯著，可有效改善T細胞亞群和β2微球蛋白水平，提高生活質量，且安全性高。

B細胞惡性淋巴瘤；細胞因子誘導殺傷細胞；白細胞介素-2；T細胞亞群；β2 微球蛋白

惡性淋巴瘤發(fā)病機制較為復雜，與病毒或細菌感染、免疫缺陷、遺傳、環(huán)境等因素存在密切關系〔1〕。初診淋巴瘤患者大約有50%以上在65歲以上，而由于淋巴瘤致死的患者65歲以上的大約占70%〔2〕。細胞因子誘導殺傷細胞(CIK)是新類型免疫活性細胞，具有超強的增殖能力及細胞毒性，在抗腫瘤過繼細胞免疫治療中已得到廣泛應用〔3〕。本研究擬分析自體CIK聯(lián)合重組人對白細胞介素(rhIL)-2。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2013年1月至2016年1月南昌大學第一附屬醫(yī)院接診的接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細胞惡性淋巴瘤患者為觀察組，并選擇同期未接受CIK聯(lián)合rhIL-2治療的46例B細胞惡性淋巴瘤患者為對照組。納入標準：①符合B細胞惡性淋巴瘤診斷標準〔4〕，并經手術及病理組織、常規(guī)免疫組化檢查確診；②觀察組同意進行CIK細胞制備及相關治療方案；③年齡60～90歲；④在納入研究前已接受過多療程其余方案治療。排除標準：①伴有其余惡性腫瘤；②伴有神經系統(tǒng)、精神疾病；③伴有重要臟器功能、嚴重氣質性疾病；④難以完成治療。觀察組男31例，女15例；年齡62～89〔平均(75.45±2.73)〕歲；彌漫性大B細胞淋巴瘤27例，黏膜相關淋巴組織淋巴瘤8例，淋巴漿細胞淋巴瘤6例，霍奇金淋巴瘤5例。對照組男29例，女17例；年齡61～88〔平均(75.53±2.71)〕歲；彌漫性大B細胞淋巴瘤25例，黏膜相關淋巴組織淋巴瘤10例，淋巴漿細胞淋巴瘤7例，霍奇金淋巴瘤4例。本研究已獲得我院倫理委員會批準，兩組性別、年齡、腫瘤類型無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 自體CIK細胞制備方法：抽取患者54 ml清晨空腹靜脈血，將樣本中單個核細胞分離，放置無血清培養(yǎng)中，調整細胞濃度，加入2 000 U/ml的重組人干擾素(INF)-γ(規(guī)格：200萬IU/瓶，廠家：上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司，國藥準字S20020040)，混勻后，放置透氣性培養(yǎng)袋中，溫度37℃，5%CO2。第2天，在培養(yǎng)液中加入rhIL-2(規(guī)格：100萬IU/瓶，廠家：北京瑞得合通藥業(yè)有限公司，國藥準字S10980096)1 000 U/ml及抗人T細胞CD3單克隆抗體(anti-CD3McAb)(規(guī)格：復溶后每瓶1 ml包含5 mg單克隆抗體，廠家：武漢生物制品研究所有限責任公司，國藥準字S19990012)50 ng/ml。

觀察組在接受自體CIK聯(lián)合rhIL-2治療前1 w時，需先行胸腺五肽(規(guī)格：1 mg：1 ml，廠家：北京世橋制藥有限公司，國藥準字H20061223)的肌肉注射，20 mg/次，1次/d，連續(xù)1 w。之后調整為20 mg/次，3次/w；同時進行CIK細胞回輸，2×109個/次，1次/w，rhIL-2皮下注射，100 mU/次，1次/d，連續(xù)10 d。2 w為1個療程，中間間隔2 w后，再次制備CIK細胞，連續(xù)治療8個療程。

1.3觀察指標 ①比較治療前后T淋巴細胞亞群及β2微球蛋白的變化；②使用歐洲癌癥研究與治療協(xié)作組生存質量問卷-C30(EORTCQLQ-C30)〔5〕評分量表評價生活質量，總共30個條目，包括軀體、角色、認知、情感及社會5個鄰域，得分越高，表示生活質量越好；③記錄觀察組治療過程中毒副反應；

1.4療效評定標準 《實體瘤治療療效評定標準-RECIST》〔6〕，完全緩解：病灶完全消失，維持時間≥4 w；不確定完全緩解：不能確定屬完全緩解還是部分緩解；部分緩解：腫瘤病灶得到30%以上的縮小，維持時間≥4 w；無變化：病灶縮小程度≤30%。

1.5統(tǒng)計學方法 應用SPSS18.0軟件進行t檢驗，χ2檢驗。

2 結 果

2.1兩組治療前后T細胞亞群比較 治療前，兩組CD3+、CD3+/CD8+、CD3+/CD56+水平無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組均比同組治療前及對照組高(P<0.05)。見表1。

表1 兩組治療前后T細胞亞群比較

與治療前比較:1)P<0.05；與對照組比較:2)P<0.05，同表3

2.2兩組治療前后β2微球蛋白比較 治療前，觀察組和對照組β2微球蛋白〔(0.43±0.09)mg/dl、(0.45±0.08)mg/dl〕無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組〔(0.23±0.05)mg/dl〕比同組治療前及對照組〔(0.34±0.07)mg/dl〕低(P<0.05)。

2.3兩組治療后臨床療效比較 治療后，觀察組總緩解率高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組治療后臨床療效比較〔n(%)，n=46〕

與對照組比較：1)P<0.05

2.4兩組治療后生活質量比較 治療前，兩組生活質量各指標無顯著差異(P>0.05)；治療后，觀察組軀體功能、角色功能、認知功能、情感功能、社會功能得分均比同組治療前及對照組高(P<0.05)。見表3。

表3 兩組治療后生活質量比較

2.5觀察組毒副反應 治療初期，3例有輕微乏力、低熱現(xiàn)象，經對癥處理后得到緩解，患者生命體征、血常規(guī)、肝腎功能均未出現(xiàn)明顯變化。

3 討 論

近年來，有研究嘗試提高B細胞惡性淋巴細胞瘤患者對化療的敏感性和腫瘤的控制效果，但在遠期療效上效果不盡人意，主要原因和老年患者對大劑量化療藥物、化療產生的毒性耐受性較差有關，降低了腫瘤控制效果〔7〕。目前較多研究將B細胞惡性淋巴瘤的研究重心轉向生物治療、免疫治療等特殊治療方案〔8〕。

CIK細胞主要是由患者自體外周血單個核心細胞經過rhINF-γ、rhIL-2、anti-CD3McAb共同誘導而成的一群異質細胞，其主要的效應細胞可共同表達2種膜蛋白分子(CD3、CD56)，因此，在進行回輸自體CIK細胞后，可同時產生自然殺傷(NK)細胞的強大非組織相容性復合體(MHC)限制性消滅腫瘤效果和T淋巴細胞的強效抗腫瘤效果，可準確定位到腫瘤細胞上并將其殺死，對于惡性腫瘤細胞化療后殘留細胞效果顯著，可有效防止腫瘤細胞復發(fā)，提高機體免疫力〔9〕。周毅〔10〕在非小細胞肺癌患者中應用CIK聯(lián)合rhIL-2可上調機體免疫力，使CIK細胞活性增加。王若天等〔11〕在直腸和結腸癌患者中應用該方式也顯示出該方式和提高免疫功能，緩解化療不良反應，提高治療效果和生活質量。但目前在B細胞惡性淋巴瘤中應用CIK聯(lián)合rhIL-2的報道仍較少。本研究結果提示，該方式在清除微小殘留灶、提高疾病緩解率上具有明顯優(yōu)勢，并且證實自體CIK細胞回輸后，可增加T細胞亞群免疫活性細胞的比例，這也是CIK細胞所產生的抗腫瘤效應、提高機體免疫力的關鍵因素。

β2微球蛋白是種相對分子質量較小的蛋白質，是細胞膜上完整組織相容性抗原中的部分。在人體中，β2微球蛋白水平十分恒定，容易通過腎小球濾過膜，大多數(shù)是由近曲小管以胞飲形式攝取，在局部被代謝降解，成為氨基酸〔12〕。β2微球蛋白和腫瘤負荷之間存在密切關系，有研究指出，廣泛病變的患者β2微球蛋白水平明顯比局限性病變的患者高，在排除肝、腎、自身免疫性疾病后，β2微球蛋白水平的增加可能提示骨髓存在浸潤情況〔13〕。有學者提出，β2微球蛋白水平的持續(xù)增加，提示病情惡化，而腫瘤患者治療后β2微球蛋白水平下降的患者，病情多已穩(wěn)定〔14〕。本研究結果提示，在B細胞惡性淋巴瘤患者中應用自體CIK聯(lián)合rhIL-2方案效果顯著，可有效改善T細胞亞群和β2微球蛋白水平，提高生活質量，且安全性高。

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紀德香(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急性白血病、惡性淋巴瘤研究。

李 蒲(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事急性白血病、惡性淋巴瘤研究。

R73

A

1005-9202(2017)20-5068-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.20.051

〔2017-03-20修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)