口腔鱗癌中DPC4、轉化生長因子-β1表達及其與增殖的關系

王禹錕 董文杰 吳 婷 郭婧玉

(牡丹江醫學院附屬第二醫院口腔科,黑龍江 牡丹江 157000)

口腔鱗癌中DPC4、轉化生長因子-β1表達及其與增殖的關系

王禹錕 董文杰 吳 婷 郭婧玉

(牡丹江醫學院附屬第二醫院口腔科,黑龍江 牡丹江 157000)

目的應用免疫組化法檢測口腔鱗癌中胰腺癌第4座位缺失(DPC4)基因和轉化生長因子(TGF)-β1的表達，分析其與KI67增殖指數的關系。方法46例口腔鱗癌術后蠟塊組織及臨床資料為觀察組，腫瘤周圍非腫瘤性牙齦鱗狀上皮組織18例為對照組。應用免疫組化SP法檢測兩組中DPC4、TGF-β1和KI67的表達。結果兩組中DPC4、TGF-β1和KI67表達的陽性率差異有統計學意義。觀察組中DPC4、TGF-β1和KI67的表達均與腫瘤的最大徑、有無壞死和分化程度密切相關。相關分析顯示觀察組中DPC4與TGF-β1、DPC4與KI67呈負相關，TGF-β1與KI67呈正相關。結論口腔鱗癌術后組織中DPC4低表達、TGF-β1和KI67高表達對病變的形成和進展有一定作用。DPC4與TGF-β1具有負向協同作用，可能與對KI67標記的增殖有明顯調節作用。

口腔；鱗癌；DPC4；轉化生長因子(TGF)-β1；KI67；免疫組化

口腔鱗癌是一個具有不同程度鱗狀分化的侵襲性上皮性腫瘤，傾向于早期、廣泛淋巴結轉移，主要發生于40～70歲的煙酒嗜好者〔1，2〕。無論何種誘因形成的病變，其形成過程中均有相關蛋白的表達失調。胰腺癌第4座位缺失(DPC4)是一種新的腫瘤抑制基因，其蛋白產物Smad4是轉化生長因子(TGF)-β1的直接底物〔3〕，研究認為DPC4具有調節腫瘤細胞黏附和侵入的潛在功能，同時對腫瘤組織的血管增殖有明顯調節作用〔4〕。本文關注DPC4和TGF-β1在口腔鱗癌中作用及與細胞增殖的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年1月至2015年12月牡丹江醫學院附屬第二醫院行口腔鱗癌手術患者46例為觀察組，其中男27例，女19例，年齡41～75(平均58.4)歲。其中舌癌17例，牙齦癌13例，口底癌10例，頰癌5例，唇癌1例。患者臨床資料齊全，術前均未行放、化療。納入均符合世界衛生組織中的鱗癌診斷標準。腫瘤周圍非腫瘤性牙齦鱗狀上皮18例為對照組，其中男9例，女9例，年齡44～72(平均57.8)歲。兩組常規資料無明顯差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2DPC4、TGF-β1和KI67表達的檢測 DPC4、TGF-β1和KI67的檢測均應用免疫組化SP法完成，應用二氨基聯苯胺(DAB)顯色。做好質量控制。

1.3DPC4、TGF-β1和KI67結果的判定 DPC4和TGF-β1陽性部位為細胞質，呈棕黃色顆粒狀著色。KI67陽性部位為細胞核，呈棕黃色顆粒狀。選擇3個上皮細胞集中的高倍視野(400倍)進行觀察。陽性判定依據兩個因素進行綜合觀察：①陽性細胞數：<5%為0分；5%～25%1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76%為4分。②染色強度：無色為0分；淺棕黃色顆粒狀為1分；棕黃色顆粒狀為2分；深棕褐色顆粒狀為3分。二者相乘為判定結果。以0～4分為陰性，5～12分為陽性。

1.4統計學方法 應用SPSS統計軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組DPC4、TGF-β1和KI67表達比較 兩組DPC4、TGF-β1和KI67表達差異有統計學意義(P<0.01)。見表1。

表1 兩組中DPC4、TGF-β1和KI67陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中DPC4、TGF-β1和KI67在不同臨床特征中表達的比較 觀察組中DPC4、TGF-β1和KI67的表達均與腫瘤的最大徑、有無壞死和分化程度密切相關。見表2。

2.3觀察組中DPC4、TGF-β1和KI67的相關性 DPC4與TGF-β1(r=-0.48，P=0.041 1)、與KI67(r=-0.44，P=0.048 0)呈負相關，TGF-β1與KI67(r=0.47，P=0.031 3)呈正相關。

表2 觀察組中DPC4、TGF-β1和KI67陽性表達在不同臨床特征中表達的比較〔n(%)〕

3 討 論

口腔鱗癌可以發生在口腔的任一部位，最常發病部位有時也反映了不同的危險因素，其機制復雜，涉及的因素較多〔5〕。在口腔內，腫瘤的發生部位有：頰部黏膜、上下牙齦、硬腭、舌部前2/3、口底和唇。本病最主要的危險因素是吸煙和酗酒，這兩個因素具有很強的協同作用〔6〕。無論何種因素均可以誘導腫瘤形成中基因和蛋白的表達失調。DPC4基因的轉錄子長2 680 bp，編碼552個氨基酸組成的蛋白，共有11個外顯子，10個內含子，其cDNA全長1 656個堿基，與果蠅的有絲分裂阻滯缺陷蛋白(MAD)同源，這些蛋白都是TGF-β超家族信號轉導的成員，參與細胞內信號轉導〔7，8〕。TGF-β1是一種多功能肽，調節細胞的增殖和凋亡，在組織的發育、再生、修復中起重要作用〔9，10〕。也有研究認為DPC4既是TGF-β超家族受體的直接底物，也是將受體信號傳遞到核內的介質〔11，12〕。近年也有學者認為DCP4具有調節細胞黏附和侵入的潛在功能，同時有抑制腫瘤組織的血管增殖作用〔13〕。潘小季等〔14〕研究DPC4在胰腺癌組織中的表達，發現DPC4在胰腺癌中表達的陽性率明顯低于慢性胰腺炎組織，認為DPC4是胰腺癌中的一種抑癌基因，DPC4表達改變對胰腺癌的發生、發展可能起重要作用。

本研究提示DPC4、TGF-β1和KI67三種蛋白異常表達與口腔鱗癌腫瘤性改變有關。提示DPC4低表達、TGF-β1和KI67高表達可以有效促進腫瘤的形成和腫瘤的生長。DPC4正常表達時對腫瘤是一種抑制作用，DPC4低表達時具有調節細胞黏附和侵入腫瘤間質的功能，同樣DPC4正常表達時對血管形成有一定的抑制作用〔15〕，當其表達下調后DPC4對腫瘤血管的抑制作用減弱，血管內皮的增殖作用明顯，腫瘤血管生成增多，局部血供增強，腫瘤細胞營養供給增加，腫瘤體積增大〔16〕。本文提示三種蛋白異常表達參與腫瘤性壞死的形成。相關性分析提示三種蛋白具有協同作用，即DPC4與TGF-β1具有負向協同性，異常表達時對細胞增殖起重要影響，這也是DPC4與TGF-β1異常表達時對腫瘤細胞調節的重要功能之一〔17，18〕。但是DPC4與TGF-β1在腫瘤作用過程中的調節機制可能更趨于多元性，其調節過程及機制有待更多實驗證實。

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郭婧玉(1984-)，女，碩士，主治醫師，主要從事侵襲性牙周病致病因素研究。

王禹錕(1983-)，女，碩士，主治醫師，主要從事口腔頜面部腫瘤侵襲性研究。

R739.8

A

1005-9202(2017)20-5061-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.20.048

〔2016-07-17修回〕

(編輯 苑云杰)