臨床血液檢驗中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用

●唐媛媛

臨床血液檢驗中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用

●唐媛媛

目的：探索在臨床血液檢驗中兩種不同細(xì)菌鑒定方法的應(yīng)用。方法：隨機選取我院在2015年2月至2017年2月間就診的480例發(fā)燒合并全身感染的患者血液標(biāo)本進行細(xì)菌陽性鑒定，對標(biāo)本同時使用直接藥敏試驗和常規(guī)藥敏試驗方法進行細(xì)菌檢測，對兩種鑒定方法的藥敏試驗結(jié)果與敏感度進行統(tǒng)計分析。結(jié)果：480份血液標(biāo)本中，有412份經(jīng)檢測為陽性，兩種鑒定方法對藥物耐藥性、敏感度及中度敏感的符合率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：直接藥敏試驗與常規(guī)藥敏試驗符合率較高，是臨床常用的檢測手段，但鑒于直接藥敏試驗報告時間短，操作簡便，耗材少，結(jié)果準(zhǔn)確，在臨床上更為常用。

血液檢驗；細(xì)菌鑒定；直接藥敏試驗；常規(guī)試驗

自上世紀(jì)初抗生素發(fā)明以來，細(xì)菌感染和致病微生物感染類疾病的發(fā)病率逐年下降。但進入二十世紀(jì)后，在我國患者中抗生素使用率高達70%，隨之而來的抗生素濫用使病菌耐藥性及對抗生素敏感性發(fā)生了變化，因此，細(xì)菌鑒定法的正確選擇有利于疾病的診斷，提高檢驗工作者的效率[1]。本文就兩種不同鑒定法在臨床血液檢驗中的應(yīng)用進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

480例發(fā)燒合并全身感染的患者血液樣本進行細(xì)菌陽性鑒定，在無菌操作方式下對患者發(fā)熱初期或發(fā)熱高峰期采集血液，每人采集30ml，只采集一次，樣本需冷藏保存，并及時送到檢驗科鑒定。以上患者注意排除其他血液系統(tǒng)疾病；入院前未服用藥物或進行過相關(guān)治療；患者凝血功能正常。

1.2 研究方法

把采集到的樣本進行直接藥敏試驗和常規(guī)藥敏試驗，對兩種檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

1.2.1 常規(guī)藥敏試驗

把采集的陽性血液樣本分別接種到巧克力平板、麥康凱平板和血平板上，要求溫度達到35℃、濃度達到5%的CO2下孵育20h至24h，然后取出菌落涂片并對其進行革蘭氏染色鏡檢，根據(jù)檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的酶。用Walk-away4.0系統(tǒng)進行藥敏試驗與鑒定。

1.2.2 直接藥敏試驗

將血液樣本置于Bactec9240系統(tǒng)中自動培養(yǎng)與鑒定，當(dāng)出現(xiàn)陽性結(jié)果后，用無菌注射器抽取10ml樣品，置入無菌試管中，對細(xì)菌進行密度梯度離心分離，要求速度為1700r/min，時間為5min收集上清液，再次以3000r/min，離心15min后去除上清液，用PBS洗滌兩次沉淀，再重懸。取20μl懸液涂片，然后進行革蘭氏染色鏡檢，在顯微鏡下倒著放置觀察。若出現(xiàn)鏈狀的革蘭陽性菌選擇MH+6%的羊血的血平板進行初次藥敏試驗。根據(jù)檢測結(jié)果選擇相應(yīng)的酶，菌落濃度要求控制到6.2×108cfu/L后將其在NC21藥敏綜合板上接種，并進行藥敏試驗與鑒定。除真菌外的一般菌種取1至3滴懸液接種到MH平板上，用無菌試紙將其涂抹均勻，將合適的藥敏紙片貼到板上,用2005NCCLSI標(biāo)準(zhǔn)對其耐藥性和敏感性進行檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析，定性資料組間比較采用χ2檢驗，p＜0.05作為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 兩種檢測方法藥敏試驗結(jié)果與敏感度比較

480份血液標(biāo)本中共檢測出412份陽性樣本，G-球菌和G+桿菌的耐藥、敏感、中度敏感符合率分別是97.47%、95.65%、90.48%和94.69%、97.55%、91.19%，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

3 討論

在臨床上抗生素的使用是十分普遍的，在細(xì)菌感染類疾病得以控制的同時，抗生素濫用也變得廣泛起來，隨之而來的是細(xì)菌耐藥性和敏感性的變化，給臨床檢驗工作帶來新的挑戰(zhàn)，增加了患者疾病確診的等待時間，甚至錯過最佳治療時間，因此菌種的及時確定及藥敏試驗的快速合理選擇可以說是疾病治愈的關(guān)鍵[2]。

細(xì)菌耐藥性的增加，引起敗血癥、菌血癥等疾病發(fā)生率也不斷增加，血液系統(tǒng)疾病患者病死率逐年上升，快速、有效、合理的檢測細(xì)菌種類成為臨床治愈疾病的關(guān)鍵，近些年來，臨床上應(yīng)用比較廣泛的細(xì)菌鑒定方法主要有鏡檢、常規(guī)檢驗、直接藥敏試驗、血清學(xué)凝集試驗等，藥敏試驗原理是不同細(xì)菌對抗菌藥物敏感性不同來確定的[3]。

本研究采用的是直接藥敏試驗和常規(guī)藥敏試驗對480份血液樣品進行檢測，結(jié)果顯示兩種方法檢測陽性樣本藥敏試驗總符合率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果表明直接法能夠替代常規(guī)藥敏試驗，而且直接法易操作，時間短，耗材少，更適合應(yīng)用于臨床檢驗中。

（作者單位：濰坊市第二人民醫(yī)院）

[1]孫捷民.臨床血液檢驗中的兩種不同細(xì)菌鑒定法的應(yīng)用[J].山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報,2013,35(6):456-458.

[2]李祖新.臨床血液檢驗中的兩種不同細(xì)菌鑒定法應(yīng)用分析[J].中外醫(yī)療,2013,32(6):185-186.

[3]楊化芹.臨床血液檢驗中的兩種不同細(xì)菌鑒定法應(yīng)用分析[J].中國醫(yī)藥指南,2014(24):108-109.