血漿脂蛋白相關磷脂酶A2水平與動脈粥樣硬化腦梗死的相關性研究

吳 強， 張樂國， 呂曉影， 張俊玲

血漿脂蛋白相關磷脂酶A2水平與動脈粥樣硬化腦梗死的相關性研究

吳 強， 張樂國， 呂曉影， 張俊玲

目的探討血漿脂蛋白相關磷脂酶A2(LP-PLA2)水平與動脈粥樣硬化腦梗死(LAA)之間的相關性。方法選取2015年12月-2016年12月我院神經內科收治的LAA患者60例作為研究對象，選取同期我院體檢中心健康體檢者40例作為對照組，分別測定兩組對象LP-PLA2水平，并同時檢測血糖、血脂、同型半胱氨酸等生化指標，兩組對象均行頸部血管超聲檢查觀察有無動脈粥樣硬化斑塊以及斑塊性質。結果LAA組LP-PLA2水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；LAA組患者中，隨神經功能缺損嚴重程度的增加，LP-PLA2水平呈現顯著升高的趨勢，組間比較差異有統計學意義(P=0.001)；LAA組患者中隨斑塊不穩定性的增加，LP-PLA2水平逐漸升高，且差異有統計學意義(P=0.000)。結論血漿LP-PLA2可能是動脈粥樣硬化腦梗死的新型危險因素，其水平的高低與動脈粥樣硬化腦梗死患者的嚴重程度顯著相關，并能夠輔助預測動脈粥樣硬化斑塊的穩定程度。

動脈粥樣硬化； 腦梗死； LP-PLA2； 頸動脈斑塊

血漿脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)是近年來引起廣泛關注的與動脈粥樣硬化(AS)密切相關的新炎癥標記物，眾多研究證實，在動脈粥樣硬化斑塊發展的各個時期(初期、中期以及末期)，LP-PLA2均施加了一定影響，因此，其可能為獨立影響缺血性腦卒中的一類新危險因素[1]。本課題通過檢測動脈粥樣硬化腦梗死患者的LP-PLA2水平來探討二者之間的相關性。

1 材料與方法

1.1 樣本資料 選取2015年12月-2016年12月我院神經內科收治的LAA患者60例作為研究對象，其中男性32例，女性28例，平均年齡(61.08±11.10)歲。LAA組入選標準：(1)均為急性起病，發病72 h以內入院；(2)全部患者均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南(2014)》的診斷標準；(3)均經詳細的神經系統檢查及頭部CT或MRI掃描確診，并根據改良TOAST分型嚴格進行病因分型，明確動脈粥樣硬化血栓形成；(4)所有患者均簽署知情同意書，并且研究方案經醫院醫學倫理委員會討論批準通過。對照組入選標準：詢問病史既往否認腦血管疾病史，經頭部MRI檢查證實無缺血性腦卒中，所有入選者均簽署知情同意書。對照組共納入40例，男性24例，女性16例，平均年齡(61.58±11.54)歲。排除標準：(1)腦梗死后出血、出血性腦卒中以及各種凝血機制異常所致的腦梗死；(2)腔隙性腦梗死、無癥狀性腦梗死；(3)糖尿病性腦梗死、動脈炎性腦梗死；(4)有明確栓子來源的腦栓塞；(5)由先天發育異常所導致的腦梗死；(6)合并有冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、周圍血管疾病、自身免疫性疾病、嚴重的心肝腎或血液系統疾病的腦梗死；(7)其他不明原因的腦梗死。

1.2 檢測方法

1.2.1 標本采集和檢測方法

1.2.1.1 LP-PLA2標本的采集 LAA組及對照組分別于入院次日清晨采集空腹靜脈血2 ml，無需抗凝，4 ℃下放置30 min，以1500 r/min離心10 min，分離血清，置于-20 ℃冰箱統一保存。

1.2.1.2 生化標本的采集 LAA組及對照組分別于入院次日清晨采集空腹靜脈血2 ml，使用EDTA作為抗凝劑，混合10 min后以3000 r/min離心20 min，分離血清，置于-20 ℃冰箱統一保存。

1.2.1.3 應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)對標本中LP-PLA2水平進行測定，試劑盒由天津康爾克生物技術有限公司生產提供，操作由我院中心實驗室完成。其余常規生化檢測指標應用日本羅氏全自動生化分析儀Cobas 8000于我院生化室完成。

1.2.2 超聲檢查 應用美國GE公司LOGIQ E9彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率9 MHz。檢查方法：被檢查者取仰臥位，頸后墊薄枕，頭部稍抬高，充分暴露頸部，頭略偏向對側。自頸動脈近心端開始，逐漸向遠心端依次掃描雙側頸總動脈(CCA)、頸內動脈(ICA)、頸外動脈(ECA)、椎動脈(VA)、鎖骨下動脈(SA)及無名動脈(INA)。測量內中膜厚度(intimal medial thickness,IMT)，觀察內膜是否光滑、有無斑塊(如有斑塊，觀察其形態、特點)。所有超聲檢測均由本院超聲科5 y以上工作經驗的專業人員操作。

1.3 分組方法 (1)將入組患者根據是否存在動脈粥樣硬化性腦梗死分為：LAA組、對照組；(2)LAA組根據NIHSS評分分為神經功能缺損輕、中、重3組；(3)LAA組根據頸部血管超聲斑塊性質的不同分為無斑塊組、穩定性斑塊組、易損性斑塊組；頸動脈硬化斑塊評定標準：IMT≥1.5 mm，凸出于血管管腔內，或局限性內膜增厚高于周邊IMT的50%，則定義為動脈粥樣硬化斑塊形成[2]。綜合分析斑塊形態學、內部回聲及表面纖維帽的完整性，將斑塊分為：(1)扁平斑,局部輕微增厚、隆起，表面纖維帽完整、連續，呈均勻低回聲；(2)硬斑，斑塊為強回聲，部分可伴有聲影；(3)軟斑，斑塊凸出于管腔，呈低回聲；(4)混合斑，內部回聲呈低回聲、強回聲混雜信號；(5)潰瘍型斑塊，表面纖維帽破裂、不連續，呈“火山口”征。將扁平斑、硬斑納入穩定性斑塊組，將軟斑、混合斑和潰瘍型斑塊納入易損性斑塊組[3]。

2 結 果

2.1 LAA組和對照組一般資料比較 LAA組的吸煙比例、飲酒比例、高血壓比例、糖尿病比例均高于對照組，差異無統計學意義(P>0.05);LAA組的平均年齡、男性性別比例均低于對照組，差異亦無統計學意義(P>0.05)(見表1)。

2.2 LAA組LDL、TC、TG以及Fib水平均高于對照組，其差異有統計學意義(P<0.05)；對照組HDL水平高于LAA組，差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

2.3 LAA組LP-PLA2水平和HCY水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)(見表3)。

2.4 LAA組患者中，隨著神經功能缺損嚴重程度的增加，LP-PLA2水平呈現顯著升高的趨勢，組間比較差異有統計學意義(P=0.001)(見表4)。

2.5 LAA組患者共檢出斑塊者56例，其中穩定性斑塊者11例，LP-PLA2水平為(170.59±38.16)ng/ml，易損性斑塊者45例，LP-PLA2水平為(192.86±37.29)ng/ml，均顯著高于無斑塊組LP-PLA水平(112.38±26.17)ng/ml，且差異有統計學意義(P=0.000)(見表5)。

表1 LAA組和對照組一般資料比較

表2 LAA組和對照組常見生化指標比較

表3 LAA組和對照組LP-PLA2和HCY比較

表4 LAA組不同程度神經功能缺損患者

表5 斑塊性質與LP-PLA2水平比較

3 討 論

動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是腦梗死、冠心病等缺血性心腦血管疾病的主要病理生理基礎[4]，而炎癥反應是動脈粥樣硬化過程中的核心因素[5]。炎癥反應貫穿于動脈粥樣硬化過程中的全部環節，在動脈粥樣硬化斑塊的發生、發展以及穩定性喪失、破裂過程中，均有不同的炎癥因子參與其中[6]。血漿脂蛋白相關磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2,LP-PLA2)是近年來發現的一種新型炎癥標志物，是磷脂酶A2超家族成員之中的一個亞類[7]，人體循環中的LP-PLA2主要由各型炎癥細胞分泌(包括主要為成熟的單核-巨噬細胞、T淋巴細胞、肥大細胞等)[8]，血漿中約80%的LP-PLA2與低密度脂蛋白(LDL)結合，約20%與高密度脂蛋白(HDL)、極低密度脂蛋白(VLDL)結合，LP-PLA2可以特異性水解LDL中的氧化型磷脂，并生成兩種強效促炎物質溶血卵磷脂(lysopho- sphatidyl choline,Lyso-PC)和氧化游離脂肪酸(oxidized free fatty acids,OxFA),后兩者通過上調細胞因子和粘附因子的表達，促進單核細胞由管腔向動脈壁趨化，并促進內皮細胞凋亡，與此同時，Lyso-PC和OxFA還可以促進金屬蛋白酶生成，最終加速動脈粥樣硬化斑塊形成[9,10]。

本試驗研究結果顯示LAA組對象LP-PLA2水平(174.59±21.29)ng/ml顯著高于對照組(114.03±18.16)ng/ml，差異有統計學意義(P=0.000)，提示LP-PLA2水平可能是動脈粥樣硬化腦梗死的一個新型危險因素，這與以下國內外相關研究結論相符。

Rotterdam研究[11]對1822名無心腦血管疾病的社區居民進行觀察隨訪，并監測其LP-PLA2水平，平均隨訪6.4 y后，110例發生腦梗死，校正傳統危險因素以及hs-CRP后，LP-PLA2水平最高四分位者腦梗死發生風險為最低四分位者的兩倍。該研究首次證實LP-PLA2水平與腦梗死風險相關。魯內克研究[12]對7650名隨機抽取的健康人群進行10 y的跟蹤隨訪，發現在校正年齡、性別以及傳統危險因素以后，LP-PLA2水平最高三分位者腦梗死發生風險為最低三分位者的兩倍(95%CI：0.8～4.8)。提示LP-PLA2水平與腦梗死存在獨立相關性。一項針對社區的動脈粥樣硬化研究[13]，對12762名健康中年人群平均隨訪6 y，校正吸煙等傳統危險因素后，動脈粥樣硬化腦梗死發生風險增加91%(95%CI：1.15～3.18；P=0.01)。顯示LP-PLA2水平與動脈粥樣硬化性腦梗死存在獨立相關性。

本試驗研究結果顯示LAA組對象隨神經功能缺損嚴重程度增加，血漿LP-PLA2水平呈現出不斷升高的趨勢，且差異具有統計學意義(P=0.001)，提示LP-PLA2水平高低與神經功能缺損嚴重程度相關，并可能對于預測進展性腦梗死有一定的臨床意義。這與以下國內外相關研究結論相符。

梁江紅[14]等人對128例動脈粥樣硬化性腦梗死(ACI)患者進行研究，研究結果表明，與對照組相比，ACI組患者LP-PLA2水平顯著升高，且差異有統計學意義(P=0.000)，且隨神經功能缺損程度的增加，LP-PLA2水平呈現不斷升高的趨勢，差異有統計學意義(P=0.000)。提示LP-PLA2水平是缺血性腦血管病的預測因素，其水平高低與神經功能缺損嚴重程度相關。王磊[15]等人對168例急性腦梗死的患者進行研究，并根據NIHSS評分，將其分為進展性腦梗死組(發病第3天NIHSS評分較發病時增加≥2分)和穩定性腦梗死組(發病第3天NIHSS評分較發病時無變化或增加<2分)，結果顯示，與穩定性腦梗死組相比，進展性腦梗死組LP-PLA2水平顯著升高，且差異有統計學意義(P<0.01)。提示LP-PLA2水平對于預測進展性腦梗死有一定的臨床意義。

本試驗研究結果顯示，LAA組對象隨斑塊不穩定性的增加，LP-PLA2水平呈現顯著升高的趨勢，且差異有統計學意義(P=0.000)，提示LP-PLA2水平可間接反映頸動脈粥樣硬化程度，并且可以在一定程度上反應動脈粥樣硬化斑塊的穩定性。吳倩[16]等人對動脈粥樣硬化性腦梗死患者的LP-PLA2水平及其頸動脈粥樣硬化斑塊進行研究，結果顯示，頸動脈粥樣硬化斑塊組患者LP-PLA2水平隨斑塊Crouse積分的增高，呈現不斷升高的趨勢，提示LP-PLA2水平可間接反映頸動脈粥樣硬化程度。盧衛國[17]等人對131例動脈粥樣硬化性腦梗死(ACI)患者進行LP-PLA2水平檢測，并同時分析其頸動脈粥樣硬化斑塊性質，根據斑塊性質，將患者分為穩定性斑塊組和不穩定性斑塊組，結果顯示，與穩定性斑塊組相比，不穩定性斑塊組患者血漿LP-PLA2水平顯著升高，提示血漿LP-PLA2水平可以在一定程度上反應動脈粥樣硬化斑塊的穩定性。

4 結 論

本實驗研究結果顯示，血漿LP-PLA2可能是動脈粥樣硬化腦梗死的新型危險因素，其水平的高低與動脈粥樣硬化腦梗死患者的嚴重程度顯著相關，并能夠輔助預測動脈粥樣硬化斑塊的穩定程度。早期檢測LP-PLA2水平能夠對動脈粥樣硬化腦梗死患者的二級預防及個體化治療提供一定的幫助。

[1]王 磊,儲照虎.脂蛋白相關磷脂酶A2與缺血性卒中[J].國際腦血管病雜志,2009,17(6):463-466.

[2]國家衛生計生委腦卒中防治工程委員會.中國腦卒中血管超聲檢查指導規范[J].中華醫學超聲雜志,2015,12(8):599-610.

[3]蘇 博,勇 強,李治安.超聲技術檢測腦梗死患者頸動脈不穩定斑塊[J].診斷學理論與實踐,2008,7(2):211-212.

[4]Hansson GK.Inflammation,athcrosclcrosis,and coronary artery disease[J].N EngI J Med,2005,353(4):429-430.

[5]何德化,李衛華.脂蛋白相關磷脂酶A2與冠心病的相關性研究進展[J].心血管病學進展,2008,29(1):57-60.

[6]陳仁玉, 王慧娟,于慧丹,等.人血漿脂蛋白相關磷脂酶A2與缺血性腦血管病的關系[J].腦與神經疾病雜志,2014,22(2):109-113.

[7]季 茳,張春妮.六種動脈粥樣硬化標志物的研究進展[J].標記免疫分析與臨床,2012,2(19):59-62.

[8]Macphee CH.Lipoprotein-associated phospholipase A2:a potential new risk factor for coronary artery disease and a therapeutic target[J].Curr Opin Pharmacol,2001,1(2):121-125.

[9]卓明峰,徐尚華.脂蛋白相關磷脂酶A2與動脈粥樣硬化相關研究進展[J].中國實用醫藥,2009,4(5):226-230.

[10]Zalewaki A,Macphee C.Role of lipoprotein-associated phospholipase A2 in atherosclerosis :biology, epidemiology, and possible therapeutic target[J].Arterio Scler Thromb Basc Biol,2005,25:923-931.

[11]Oei HH,van IM,Hofman A,et al.Lipoprotein- associated phospholipase A2 activity is associated with risk of coronary heart disease and ischemic stroke:The rotterdam study[J].Circulation,2005,111(5):570-575.

[12]Tsimikas S,Willeit J,Knoflach M,et al.Lipoprotein-associated phosph- olipase A2 activity,ferritin levels,metabolic syndrome,and 10-year cardiovascular and non-cardiovascular mortality:results from the Bruneck study[J].Eur Heart J,2009,30(1):107-115.

[13]Ballantyne CM,Hoogeveen RC,Bang H,et al.Lipoprotein-associated phospholipase A2,high-sensitivity C-reactive protein,and risk for incident ischemic stroke in middle-aged men and women in the Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) study[J].Arch Intern Med,2005,165(21):2479-2484.

[14]梁江紅,魏麓云,何亞麗.動脈硬化性腦梗死患者血漿LP-PLA2水平及臨床意義[J].實用醫學雜志,2009,25(14):2264-2267.

[15]王 磊,章 瑩,費世早,等.血漿脂蛋白相關磷脂酶A2水平對進展性腦梗死的預測價值[J].J Clin Neurol,2011,24(4):308-310.

[16]吳 倩,胡為民.LP-PLA2與動脈粥樣硬化性腦梗死及頸動脈粥樣硬化斑塊的關系探討[J].中西醫結合心腦血管病雜志,2013,11(10):1216-1217.

[17]盧衛國,朱 曄,梁志偉.脂蛋白磷脂酶A2在動脈粥樣硬化性腦梗死中的臨床價值[J].檢驗醫學與臨床,2015,12(12):1733-1737.

Studyontherelationshipbetweenplasmalipoprotein-relatedphospholipaseA2levelandatheroscleroticcerebralinfarction

WUQiang,HANGLeguo,LVXiaoying,etal.

(DepartmentofNeurology,CangzhouCentralHospital,Cangzhou061000,China)

ObjectiveTo investigate the relationship between plasma lipoprotein-associated phospholipase A2(LP-PLA2) levels and atherosclerotic cerebral infarction (LAA).MethodsA total of 60 patients with LAA were enrolled in this study.From December 2015 to December 2016,60 patients with LAA were selected as the subjects.40 healthy subjects were selected as the control group.The LP-PLA2levels were measured.Simultaneous detection of blood glucose,blood lipids,homocysteine and other biochemical indicators,the two groups of subjects were underwent cervical vascular ultrasonography to observe whether the atherosclerotic plaque and plaque properties.ResultsThe level of LP-PLA2in LAA group was significantly higher than that in control group (P<0.05).The level of LP-PLA2in LAA group increased significantly with the severity of neurological deficit (P=0.001).The level of LP-PLA2increased gradually with the increase of plaque instability in LAA group (P=0.000),and the difference was statistically significant (P=0.000).ConclusionPlasma LP-PLA2may be a novel risk factor for atherosclerotic cerebral infarction,which is significantly associated with the severity of atherosclerotic cerebral infarction and is helpful in predicting the stability of atherosclerotic plaques.

Atherosclerosis； Cerebral infarction； LP-PLA2； Carotid plaque

R743.1

A

1003-2754(2017)10-0880-04

2017-08-17；

2017-10-03

(滄州市中心醫院神經內科，河北 滄州 061000)

張俊玲，E-mail：cznbzx@126.com