巴東冬凌草二萜成分的研究

舒佳為　袁芳　文楚毛　楊光忠

摘要：利用溶劑提取法，正、反相硅膠柱和半制備高效液相色譜法對巴東冬凌草乙酸乙酯提取物進行了分離純化，從中分離得6個二萜化合物，并根據理化性質和現代波譜技術對其進行了結構鑒定，其結構分別鑒定為：冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6為首次從該地區的植物中分離得到。

關鍵詞：巴東冬凌草；化學成分；二萜

中圖分類號：R927

文獻標識碼：A文章編號：16749944（2017）18021603

1引言

冬凌草系唇形科香茶菜屬植物碎米椏（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）的地上部分，由于其冬天全株結滿薄如蟬翼的銀白色冰凌片，又名冰凌草 ＼[1＼]。收載于2015年版《中國藥典》，味甘苦、性微寒，具有清熱解毒、消炎止痛等功效＼[2＼]。冬凌草富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，其代表性化合物為冬凌草甲素，具有抗炎、抗菌、抗腫瘤等多種生物活性＼[3＼]。目前，國內學者相繼對產自河南、河北、貴州、湖北等多個不同地區的冬凌草的化學成分進行了廣泛深入的研究，發現不同地區的冬凌草都富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，但不同產地的冬凌草含有不同結構特點的二萜，呈現化學結構的多樣性＼[4～7＼]。近年從湖北建始產的冬凌草中分得3個結構新穎的二萜生物堿＼[8＼]，為進一步發現新的二萜化合物，筆者對產自湖北巴東冬凌草的二萜成分進行了的研究，從其乙酸乙酯提取物分離得6個二萜化合物，其結構分別鑒定為冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。其中化合物3～6為首次從該地區的植物中分離得到（圖1）。

2材料與方法

2.1儀器與試劑

核磁共振波譜儀（Bruker AVANCEIII-500 MHz全數字化超導核磁共振儀，布魯克公司）；高效液相色譜儀（Ultimate 3000半制備型，美國戴安公司），VWD，DAD檢測器；半制備型色譜柱為5C18-MS-II（250 mm×10 mm，5 μm）；柱色譜用硅膠（200～300目和300～400目，青島海洋化工廠）；分析純溶劑由國藥集團化學試劑有限公司生產；色譜純溶劑由昌泰興業有限公司生產。

冬凌草采于湖北恩施土家苗族自治州巴東縣，經中南民族大學生命科學學院宋發軍教授鑒定為唇形科香茶菜屬植物碎米椏（Rabdosia rubescens（Hemsl.） Hara）。

2.2提取與分離

11.2 kg干燥冬凌草粉碎后用95%的乙醇室溫浸泡3次，每次24 h，提取液真空抽濾后減壓旋蒸得乙醇提取物。乙醇提取物用甲醇溶解，石油醚脫脂3次后，減壓旋蒸脫去甲醇，然后用水溶解，乙酸乙酯萃取3次，得乙酸乙酯提取物556 g，乙酸乙酯提取物經硅膠柱（200～300目）層析分離，用氯仿∶丙酮（10∶0，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，1∶1，3∶7，0∶10）梯度洗脫，TLC檢測后合并相似組分，共收集到8個組分（Fr. A～H）。Fr. F（51.3 g）經反相硅膠柱色譜分離，用水∶甲醇（7∶3，1∶1，8∶2，3∶7，0∶10）梯度洗脫以及反復硅膠柱層析和半制備高效液相色譜得到化合物1～6。

3結構鑒定

4結語

對產自湖北巴東冬凌草的二萜成分進行了研究，從中分離得6個二萜化合物，其結構分別鑒定為冬凌草甲素（1）、lasiodin（2）、neolaxiflorin U（3）、hubeirubesin K（4）、hubeirubesin I（5）、epinodosinol（6）。研究結果表明：巴東冬凌草富含對映-貝殼杉烯二萜類化合物，其中冬凌草甲素的含量高，結構類型以7，20-環氧類為主，同主產區河南濟源的冬凌草所含的活性成分極為相似，具有很好的開發價值。

參考文獻：

[1]

高世勇，王瓏.冬凌草的化學和藥理作用研究＼[J＼]. 哈爾濱商業大學學報（自然科學版），2014，30（1）：1～6.

＼[2＼]國家藥典委員會編. 中華人民共和國藥典（2015年版一部） ＼[M＼]. 北京： 中國醫藥科技出版社，2015：115.

＼[3＼]齊琦，張配，李其響，等. 冬凌草甲素誘導三陰乳腺癌MDA-MB-231細胞凋亡及對細胞內活性氧水平的影響＼[J＼]. 中國中藥雜志，2017，42（12）：2361～2365.

＼[4＼]韓全斌，趙勤實，黎勝紅. 貴州冬凌草中的對映貝殼杉烷二萜化合物＼[J＼]. 化學學報，2003，61（7）：1077～1082.

＼[5＼]Xie R，Yan F，Hai G，et al. Two new diterpenoids and other constituents from Isodon rubescens ＼[J＼]. Fitoterapia，2011（82）：726～730.

＼[6＼]Huang S，Pu J，Xiao W，et al. ent-Abietane diterpenoids from Isodon rubescens var. rubescens ＼[J＼]. Phytochemistry，2007（68）：616～622.

＼[7＼]Liu X，Wang W，Xue D，et al. Enmein-type diterpenoids from the aerial parts of Isodon rubescens and their cytotoxicity ＼[J＼]. Fitoterapia，2012（83）：1451～1455.endprint

＼[8＼]Liu X，Yang J，WangW，et al. Diterpene Alkaloids with an Aza-ent-kaurane Skeleton from Isodon rubescens ＼[J＼].J. Nat. Prod.，2015（78）：196～201.

＼[9＼]孫漢董，許云，姜北. 香茶菜屬植物二萜化合物 ＼[M＼]. 北京： 科學出版社，2001： 241.

＼[10＼]韓全斌，張積霞，沈云亨，等. 毛葉香茶菜中的二萜化合物＼[J＼].中國天然藥物，2003，1（1）：24～28.

＼[11＼]Wang W，Yang J，Wu H，et al. Ent-kauranoids isolated from Isodon eriocalyx var. laxiflora and their structure activity relationship analyses ＼[J＼]. Tetrahedron，2015，71（48）：9161～9171.

＼[12＼]劉旭. 冬凌草和柔莖香茶菜的化學成分及生物活性研究＼[D＼].武漢：華中科技大學，2012.

＼[13＼]Sun H，Qiu S，Lin L，et al. Crystal structure of a 1：1 complex of natural diterpenoids： absolute configurations and unambiguous NMR spectral assignments of neoangustifolin and epinodosinol ＼[J＼]. J. Nat. Prod.，1997，60（3）：203～206.

Diterpenoids From Badong Rabdosia rubescens （Hemsl.） Hara

Shu Jiawei1， Yuan Fang2， Wen Chumao2， Yang Guangzhong3

（1. College of Environment and Bio-resources， Dalian Minzu University， Dalian 116600， China；

2. College of Biomedical Engineering， South Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China；

3. National Demonstration Center for Experimental Ethnopharmacology Education，

South-Central University for Nationalities， Wuhan 430074， China）

Abstract： The chemical constituents of Badong Rabdosia rubescens were isolated and purified by solvent extraction method， the normal and reverse phase silica gel column chromatography and semi-preparative HPLC. Their structures were elucidated on the basis of chemical and spectroscopic analysis. Six diterpenoids were isolated from the ethyl acetate extract of Rabdosia rubescens and were identified as oridonin （1） lasiodin （2） neolaxiflorin U （3） hubeirubesin K （4） hubeirubesin I （5） epinodosinol （6） Compound 3-6 were isolated from Badong Rabdosia rubescens for the first time.

Key words： Rabdosia rubescens； chemical Constituents； diterpenoidsendprint