化膿性中耳炎患者病原菌分布及耐藥性分析

羅仙忠 閆濤 樓正青

化膿性中耳炎患者病原菌分布及耐藥性分析

羅仙忠 閆濤 樓正青

目的 分析耳鼻喉科門診中耳炎患者的病原菌分布及耐藥性，指導(dǎo)臨床合理用藥。方法 調(diào)查分析2014年1月至2016年12月338例化膿性中耳炎患者的耳道分泌物的分離培養(yǎng)結(jié)果和涂片鏡檢結(jié)果，統(tǒng)計涂片鏡檢的敏感性和特異性、病原菌的分布，并對主要病原菌進(jìn)行藥敏分析。結(jié)果 共分離出258株病原菌，分離出前5位病原菌為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、曲霉菌、銅綠假單胞菌、念珠菌。葡萄球菌耐藥率前3位為青霉素G、紅霉素、克林霉素。銅綠假單胞菌耐藥率前4位為替加環(huán)素、復(fù)方新諾明、呋喃坦因、頭孢曲松。念珠菌對5種抗真菌藥物耐藥率為0%。革蘭染色后鏡檢共檢出病原菌119例，敏感率35.21%，陽性預(yù)測值47.60%。鏡檢白細(xì)胞（＞30/低倍視野）189例，敏感率55.92%，特異性75.60%。結(jié)論 本地區(qū)門診中耳炎患者的病原體分布以葡萄球菌、曲霉菌、銅綠假單胞菌、念珠菌為主，涂片鏡檢有較高的敏感率和特異性，對耳分泌物的病原菌變化及耐藥趨勢進(jìn)行監(jiān)測對門診罹患中耳炎患者的臨床診斷和治療有重要指導(dǎo)意義。

中耳炎 病原菌 耐藥性 鏡檢

化膿性中耳炎是耳鼻喉科常見病之一，多數(shù)門診患者無需住院，經(jīng)積極有效藥物治療可獲痊愈，但治療不及時或不合理可發(fā)展為慢性中耳炎，影響聽力，嚴(yán)重者可導(dǎo)致聽力減退甚至引起敗血癥而導(dǎo)致死亡［1］。本文分析耳鼻喉科門診中耳炎患者的病原菌分布及耐藥性，指導(dǎo)臨床合理用藥。現(xiàn)報道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2014年1月至2016年12月本院耳鼻喉門診化膿性中耳炎患者338例，男204例，女134例；年齡6～45歲，平均年齡31.5歲。

1.2 標(biāo)本采集 嚴(yán)格無菌操作取患者耳道內(nèi)膿性分泌物，并迅速將分泌物轉(zhuǎn)移至無菌管中，立即送往檢驗科微生物室。在取分泌物前，保證患者未使用或停用抗菌藥物＞48h。

1.3 分離培養(yǎng)與鑒定藥敏試驗 患者分泌物于1h內(nèi)接種于血平板、麥康凱平板、巧克力平板及沙保弱平板進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)24h后，對病原菌進(jìn)行鑒定及藥敏試驗。細(xì)菌的鑒定和藥敏采用BD Phoenix?-100全自動細(xì)菌鑒定/藥敏系統(tǒng)，念珠菌的鑒定采用法國生物梅里埃VITEC-2全自動微生物鑒定儀，藥敏試驗采用法國梅里埃ATB FUNGS 2。

1.4 標(biāo)本涂片鏡檢 接種后的標(biāo)本加入適量的生理鹽水，涂片，革蘭染色后鏡檢觀察病原微生物、白細(xì)胞的數(shù)量及白細(xì)胞的吞噬情況。

1.5 質(zhì)控菌株 大腸桿菌ATCC（25922），金黃色葡萄球菌（ATCC25923），銅綠假單胞菌（ATCC27853），購自衛(wèi)生部臨檢中心。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用細(xì)菌耐藥監(jiān)測軟件WHONET5.6進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 病原菌種類及分布 338例標(biāo)本中檢出病原菌250例，檢出率73.96%，其中檢出兩種病原菌8 例，共分離出病原菌258株。其中革蘭陽性球菌134株（51.94%），分別為金黃色葡萄球菌66株，凝固酶陰性葡萄球菌58 株，鏈球菌10 株；革蘭陰性桿菌42株（16.28%），分別有銅綠假單胞菌28 株，腸桿菌科8 株，流感嗜血桿菌6株；真菌74例（28.68%），其中曲霉菌40例，毛霉菌16例，念珠菌18例（10株白色假絲酵母菌，8株近平滑酵母菌）。罕見的其他細(xì)菌8株，占3.10%。

2.2 革蘭染色后鏡檢結(jié)果 338例標(biāo)本共檢出病原菌119例，敏感率35.21%，陽性預(yù)測值47.60%。鏡檢檢出革蘭陽性菌63例，占52.94%，陽性預(yù)測值47.01%；革蘭陰性菌17例，占14.29%，陽性預(yù)測值40.48%；真菌39例，占32.77%，陽性預(yù)測值52.70%。鏡檢白細(xì)胞＞30/低倍視野189例，敏感率55.92%，特異性75.60%；白細(xì)胞吞噬136例，敏感性40.24%，特異性54.40%。

2.3 主要病原菌的分布及藥敏結(jié)果 （1）金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌的耐藥情況：耐藥率較高的抗菌藥物為青霉素G、紅霉素、克林霉素，未檢出對奎奴普汀-達(dá)福普汀、利奈唑烷、萬古霉素、替加環(huán)素、利福平耐藥的葡萄球菌。見表1。（2）銅綠假單胞菌的耐藥情況：耐藥率較高的抗菌藥物為替加環(huán)素、復(fù)方新諾明、呋喃坦因、頭孢曲松，耐藥率為100.00%；敏感性較好的抗菌藥物為哌拉西林/他唑巴坦、亞胺培南、多粘菌素B、頭孢哌酮/舒巴坦、喹諾酮類和氨基糖苷類，敏感率均高于90.00%。見表1。（3）念珠菌的耐藥情況：18株念珠菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑5種抗真菌藥物耐藥率為0%。

表1 金黃色葡萄球菌與凝固酶陰性葡萄球菌耐藥率［n（%）］

3 討論

有關(guān)中耳炎的病原菌分布和藥敏結(jié)果的報道，國內(nèi)不同地區(qū)差異較大。本資料顯示，338 例化膿性中耳炎患者耳分泌物標(biāo)本中查出258株病原菌，檢出率為73.96%，排名前5位的分別為金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、曲霉菌、銅綠假單胞菌、念珠菌。龍彬等［2］報道，中耳炎患者耳分泌物真菌的檢出率有上升趨勢，原因可能是耳部炎性疾病患者外耳道深部及鼓室腔內(nèi)溫暖濕潤，適宜真菌生長；廣譜抗生素、抗腫瘤藥物、腎上腺皮質(zhì)激素、免疫抑制劑的廣泛應(yīng)用，導(dǎo)致耳真菌病的發(fā)病率有較大的升高［3］。

葡萄球菌為化膿性中耳炎的主要病原菌，主要原因為：（1）廣泛分布于自然界，是人類重要致病菌。存在于人和動物的皮膚黏膜上的菌株可致多種化膿性感染。（2）致病性主要與各種侵襲性酶類和多種毒素有關(guān)。（3）對營養(yǎng)要求不高。（4）抵抗力比其他無芽孢細(xì)菌強(qiáng)，耐干燥，耐藥性增強(qiáng)，對多種抗菌藥物不敏感［4］。對于葡萄球菌，奎奴普汀-達(dá)福普汀、利奈唑烷、萬古霉素、替加環(huán)素、利福平耐藥率為0%，且對喹諾酮類和氨基糖苷類抗菌藥物的耐藥率也較低。臨床治療應(yīng)避免使用不耐酶的β-內(nèi)酰胺類和大環(huán)內(nèi)酯類抗生素。對于銅綠假單胞菌，可選用喹諾酮類和氨基糖苷類，對于念珠菌，體外藥敏試驗對常見抗真菌藥物保持高度敏感，可首選氟康唑。對于曲霉菌，根據(jù)文獻(xiàn)報道［5］，體外藥敏試驗MIC90由低到高依次為卡泊芬凈、泊沙康唑、伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B，唑類藥物對于曲霉菌屬的體外抗菌活性優(yōu)于兩性霉素B，可首選伏立康唑或伊曲康唑。對于毛霉菌，可選用兩性霉素 B或泊沙康唑足療程治療。治療真菌過程中需密切注意患者的腎功能。

涂片鏡檢作為病原菌檢查的一種檢驗分析前質(zhì)量控制的手段日益受到重視［6］。此以，涂片鏡檢對臨床用藥可提供指導(dǎo)方向，臨床醫(yī)師可根據(jù)病原菌的染色性及流行病學(xué)資料用藥。本調(diào)查發(fā)現(xiàn)，涂片鏡檢在分泌物標(biāo)本的病原菌檢測中有較高的敏感性和特異性，且具有較高的陽性預(yù)測值（47.60%）。因此檢驗科應(yīng)重視涂片鏡檢的檢查，同時臨床醫(yī)師應(yīng)關(guān)注涂片鏡檢的結(jié)果，并據(jù)此指導(dǎo)用藥。

［1］ 管鴿,黃可兒,朱陶,等．化膿性中耳炎患者的病原菌分布及其耐藥性分析．浙江臨床醫(yī)學(xué),2016,18(9):1722-1723．

［2］ 龍彬,韓淑貞,王玉杰,等． 慢性化膿性中耳炎患者的病原菌特點(diǎn)及藥敏分析．中國衛(wèi)生檢驗雜志,2013,23(8):1993-1995．

［3］ 陳麗杰．慢性中耳炎真菌感染的臨床分析．中國現(xiàn)代醫(yī)師,2015,53(20):58-60．

［4］ 楊志偉,肖振清,何芳． 化膿性中耳炎330 例病原菌分布與藥敏分析臨床研究． 臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(10)12:941-942．

［5］ 栗方,王龍,曹彬,等．侵襲性肺曲霉菌體外藥敏試驗與分子鑒定及基因分型研究．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(6):1301-1303．

［6］ 黃芳,林佩玲,蔡媛媛,等． 創(chuàng)面分泌物培養(yǎng)前涂片鏡檢的臨床意義．臨床軍醫(yī)雜志,2015,43(4):406-408．

Objective To analyze the pathogenic bacteria distribution and drug resistance that were isolated from the out-patients of ENT department，so as to guide the rational use of antimicrobial therapy in clinical practice. Methods The distribution and drug resistance of the pathogenic bacteria isolated from ear secretions of 338 out-patients who were suffered with otitis media from 2014 to 2016 were analyzed，and the sensitivity and specificity of the microscopic examinations of ear secretions smear were observed. Results A total of 258 strains of pathogens were isolated and the top five major pathogens were Staphylococcus aureus，Coagulase-negative staphylococc，Aspergillus，Pseudomonas aeruginosa and Monilia. The top three high resistance rates to Staphylococcus were Penicillinum G，Rrythromycin and Clindamycin. The top four high resistance rates to Pseudomonas aeruginosa were Tigecycline，Trimethoprim-Sulfamethoxazole，Nitrofurantoin，Ceftriaxone. Monilia were susceptible to 5 antimycotic drugs（100%）. 119 pathogenic bacteria were detected by microscopic examinations of ear secretions smear，and the sensitivity was 35.21%，the specificity was 75.60%，the positive predictive value was 47.60%. Conclusions The major pathogens of otitis media were Staphylococcus，Aspergillus，Pseudomonas aeruginosa and Monilia. It’s important for clinical diagnosis and treatment to monitor ear secretions of pathogenic bacteria and drug resistance trend of the out-patients with otitis media.

Otitis media Pathogenic bacteria Drug resistance Microscopic examinations

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