EV71、COX16、白細胞計數和C-反應蛋白聯合檢測在手足口病早期診斷中的應用

廣東省云浮市婦幼保健計劃生育服務中心（527300）張微惠 徐建民 周麗銀

本研究通過對我院兒科和兒科門診就診的1170例疑似手足口病患兒同時檢測EV71、COX16、白細胞計數和C-反應蛋白，探討上述檢測指標對于手足口病患兒早期診療中的意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月～2016年7月云浮市婦幼保健院內兒科和兒科門診就診的1170例疑似手足口病患兒作為研究對象，所有患兒均存在有手足口病接觸史，大多數患兒出現發(fā)熱癥，手足口處有圓形或橢圓形皰疹，疑似為手足口病，年齡均在9個月～5歲，平均（2.1±1.7）歲。

1.2 方法

1.2.1 全部病例均于門診當日或入院當日抽取靜脈血2ml于EDTA-K2抗凝試管用于檢測血常規(guī)中的WBC，另一支3ml于干燥管中分別檢測EV71、COX16、hs-CRP。

1.2.2 WBC計數應用SysmexXT-4000I血液分析儀以及配套試劑及質控品檢測，嚴格按照儀器操作規(guī)程，將WBC計數＞12×109記為陽性。

1.2.3 EV71、COX16 兩者均采用膠體金法（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）進行檢測；檢測前按照操作要求將檢測卡、稀釋液及待測樣本平衡至室溫（30分鐘）后，吸取15μl樣本血清加入樣本稀釋管中充分混勻，在檢測卡加樣孔處加入80μl稀釋樣本，室溫放置15分鐘觀察結果。

1.2.4 CRP檢測應用免疫熒光干式定量法，韓國Boditech MED Inc.公司生產i-CHROMA 特種蛋白分析儀及配套試劑檢測hs-CRP濃度，hs-CRP＞5.0mg/L記為陽性。

1.3 統(tǒng)計學方法 本次研究實驗數據采用SPSS18.0軟件包進行數據統(tǒng)計，計量資料采用“±S”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例(n)表示，計數資料組間率（%）的比較采用X2檢驗，以P ＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

附表 各項指標檢測的陽性率[例數(%)]

2 結果

2.1 本次研究在1170例患兒用血清學檢測中，柯薩奇病毒A16型（COX16）檢測陽性為115例，陽性率為9.8%，腸道病毒71型（EV71）檢測陽性為139例，陽性率為11.9%；柯薩奇病毒A16型聯合腸道病毒71型檢測同時陽性的患兒為93例，陽性率為7.9%；柯薩奇病毒A16型聯合腸道病毒71型檢測任意一項陽性為347例，陽性率為29.7%；柯薩奇病毒A16型聯合腸道病毒71型檢測陽性檢出率高于單一項目檢出率，三者陽性率進行比較有統(tǒng)計學意義，(X2檢驗，P＜0.01）。見附表。

2.2 柯薩奇病毒A16型聯合腸道病毒71型檢測陽性組與薩奇病毒A16型（COX）陽性組、腸道病毒71型（EV71）陽性組三者的白細胞計數、hs-CRP的陽性率都有升高，但三者進行比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05)。

3 討論

WBC作為免疫炎性細胞，是機體防御系統(tǒng)的重要組成部分，當機體感染手足口病后，白細胞中的淋巴細胞升高，機體會發(fā)生應激反應而使兒茶酚胺升高，促進中性粒細胞從儲備池中釋放進入血循環(huán)，發(fā)生炎性反應，導致白細胞增高[1]。

相關研究表明，hs-CRP是由肝臟合成，屬于分泌型蛋白，是機體應激狀態(tài)下所產生的急性時相蛋白，hs-CRP水平升高的程度可對機體的感染程度進行評價，比白細胞更加快速敏感。在正常人血液中hs-CRP的濃度較低，而當機構感染細菌、術后或者組織損傷發(fā)生急性炎癥過程中，hs-CRP濃度會在6～8h開始升高，24～48h達到峰值。患兒感染了手足口病，hs-CRP能與腸道病毒等體內的多糖結合，其聚合物能激活補體系統(tǒng)，產生炎癥反應。本研究結果顯示手足口病患兒WBC、hs-CRP水平均有升高，柯薩奇病毒A16型聯合腸道病毒71型檢測陽性組中WBC陽性率為36.0%，hs-CRP陽性率為38.3%；薩奇病毒A16型（COX）陽性組中WBC陽性率為43.5%，hs-CRP陽性率為45.2%；腸道病毒71型（EV71）陽性組中WBC陽性率為36.9%，hs-CRP陽性率為42.4%。本組數據表明hs-CRP的陽性率高于白細胞計數的陽性率，說明hs-CRP在兒科感染疾病中比白細胞更敏感，是一種敏感而非特異的指標[2]。

對于WBC，hs-CRP陽性檢測結果顯示，hs-CRP陽性率高于WBC，進一步說明hs-CRP是手足口病感染早期更為敏感的一項檢測指標。目前普遍認為手足口病是病毒直接侵犯組織、以及病毒感染后激發(fā)全身免疫炎癥反應所引起的機理一致。將WBC、hs-CRP同時檢測能起到彌補WBC計數不敏感的不足，如果臨床疑是為感染病例，同時監(jiān)測到hs-CRP升高，則診斷感染的準確性加大，達到早期診治的目的。

綜上所述，EV71、COX16聯合檢測手足口病陽性病例，應結合臨床對其作出診斷與治療。然而對于初診懷疑為手足口病的患兒，hs-CRP檢測能夠靈敏地反映患兒有無炎性反應的程度，作為疾病急性指標優(yōu)于其他急性期的反應物質，但其僅能作為炎性初步判斷，必須與其他指標聯合應用才能提高臨床診斷價值。雖然WBC作為臨床診斷感染的常規(guī)指標，快速簡單，但個體差異，影響因素多，單一診斷具有局限性。因此在小兒手足口病早期診斷與治療方面，應緊密結合臨床，將EV71、COX16、白細胞計數和C-反應蛋白聯合檢測，彌補各單項檢測的不足之處，為小兒手足口病的早期診治、降低危重病例的死亡率提供科學依據。