中藥對照制劑研制指導原則和技術要求

聶黎行+戴忠+馬雙成

[摘要] 中藥對照制劑是中藥標準物質發展的新形式。為指導該標準物質的建立，規范其研究及在國家藥品標準中的應用，提出本指導原則。規定了中藥對照制劑的定義，介紹其研制指導原則和技術要求，分析其在中藥質量控制中的應用，并提出發展思路。對照制劑在中藥質量控制中有廣泛的應用前景，探索并推行以中藥對照制劑為對照的質量評價體系具有實際意義。

[關鍵詞] 中藥； 對照制劑； 標準物質； 指導原則； 技術要求； 質量控制

[Abstract] Traditional Chinese medicine （TCM） reference drug is a new form of TCM standard reference substance. The purpose of this guideline is to guide the establishment of the reference drug and standardize its investigation and application in national drug standards. Definition of TCM reference drug was specified and relating guideline and technical requirement were introduced in this paper. Its application in quality control of TCM was analyzed and the developing train was proposed. There is a wide prospect for the application of reference drug in quality control of TCM. Thus it has practical significance to explore and conduct the quality evaluation system by using TCM reference drug as the reference substance.

[Key words] traditional Chinese medicine； reference drug； reference substance； guideline principle； technical requirement； quality control

中藥標準物質是中藥材（含飲片）、提取物、中成藥檢測中使用的實物對照，用于確定中藥的真偽、評價其質量優劣，在控制藥品生產，提高和保證藥品質量方面發揮著重要作用^[1]，主要包括中藥化學對照品、對照藥材和對照提取物。中藥化學對照品是從中藥材、動植物原料或天然產物中提取、制備，并經標定的單一成分或混合組分，用于鑒別、檢查、含量測定等。對照藥材作為我國首創和特色的標準物質形式，系基原明確、藥用部位準確的原生藥材粉末，主要用于薄層鑒別。對照提取物為中藥或天然產物經特定提取工藝制備的含有多種主要有效成分或指標性成分的混合物，主要用于薄層或其他色譜鑒別?！吨袊幍洹纷?985年版起開始使用中藥化學對照品和對照藥材，2005年版首次收載了對照提取物^[2]。

按照《藥品管理法》和《藥品注冊管理辦法》的規定，中國食品藥品檢定研究院承擔著國家藥品標準物質標定和管理的職責^[3]。經過30余年的努力，目前已建立中藥化學對照品630余種、對照藥材740余種、對照提取物40余種，為國家藥品標準的順利實施和中藥的規范化生產提供了有效的物質保證。然而，隨著藥物分析學科的發展，現有的中藥標準物質已不能完全滿足中藥研究、新藥開發等諸多方面的需求。尤其中藥復方作為一個有機整體，其多成分的特性決定了單一或幾個指標性成分難以反映中藥所體現的整體療效，使得有效控制其質量，尤其是評價其優劣存在很大困難。在這種形勢下，中藥對照制劑作為中藥標準物質的新形式應運而生，在中藥質量評價和控制方面顯示出廣泛的應用前景。本文提出中藥對照制劑的定義，就其研制指導原則和技術要求做出介紹，并對其應用進行展望，以期為藥品質量監管、檢驗及研發提供有益參考。

1 中藥對照制劑的定義

中藥對照制劑系指采用道地、優質、規范加工的原料藥材（飲片）和輔料，嚴格按照制法和生產工藝規程，并遵循藥品生產質量管理規范制備的實物對照，主要用于中成藥的質量控制，評價產品投料的真實性（是否投正確的原料）和投料量的可靠性（是否按處方量投料）。根據用途可以將中藥對照制劑分為定性對照制劑和定量對照制劑：定性對照制劑主要用于中成藥的TLC 鑒別、LC 鑒別、GC鑒別、指紋/特征圖譜或含量測定時色譜峰定位；定量對照制劑標示多成分含量，通過量值傳遞直接對中成藥進行定量。

由于中成藥成方歷史悠久，部分品種的原研廠家難以界定，另一方面，原研廠家生產的藥品質量未必最佳，故中藥對照制劑的研制不宜照搬與化學藥品一致性評價選用原研藥品為對照制劑的作法^[4-6]。近幾年，研究學者已經開始將目光投向中藥對照制劑。孫國祥教授團隊^[7-9]采用內標定量指紋/特征圖譜法，在購買的樣品中優選出標準制劑，用于冠心蘇合丸的質量控制。并進一步提出，保證中藥化學物質一致性（等位）和療效穩定一致性（等價）的基礎方法是建立中藥標準制劑控制法。中藥標準制劑也稱中藥本底制劑，是在中藥研制和創新過程中經過藥效學和毒理學試驗證明為最佳中藥組方和具有恒定化學成分含量和分布比例的規范制劑，能直接用于控制和檢驗中藥和植物藥工業化產品質量。在中藥實際生產過程中，制藥廠家可根據實際情況和自身條件采用不同方法選取標準制劑，如根據藥典處方自制嚴格的標準制劑，選取知名廠家產的優等產品作為標準制劑，根據藥效學研究選出標準制劑等。耿婷等^[10]篩選多批經法定標準檢驗合格的樣品，每10批混為1批制成自身對照制劑，隨行生成指紋圖譜，用于桂枝茯苓膠囊的企業內控。endprint

2 中藥對照制劑的研制指導原則^[14]

中藥對照制劑的品種根據國家藥品標準制定及修訂的需要確定。候選樣品應滿足適用性、代表性及可獲得性的原則，其性質應符合使用要求，均勻性、穩定性及相應特性量值范圍應適合其具體用途。選擇合理的制備方法和工藝流程，防止特性量值發生變化并避免污染。候選中藥對照制劑在發放前要進行標定，以確證其原料真實可靠，外源性雜質可控，組分分布均勻。為保證中藥對照制劑的代表性，在進行首批研制時，需制備3批以上的候選樣品進行以上所有項目的研究。對于含量測定用對照制劑，符合上述要求后，還需進行定值。此外，中藥對照制劑應在規定的貯藏或使用條件下，定期進行穩定性考察。

3 中藥對照制劑的研制技術要求

3.1 原輔料的優選 原、輔料的選擇是對照制劑研制的基礎，研究表明中藥材及飲片的質量問題是影響中成藥質量的關鍵因素，原料存在的有害殘留污染、摻偽造假、化工染料染色等質量風險可能向制劑轉移^[11-13]。按照對照制劑相應品種的執行標準，確定原料藥材（飲片），查閱其收載標準，確定其法定基源和采收加工方法?？甲C調研，掌握原植物/動物/礦物的道地產區、藥用資源和質量現狀。購買基源正確、規范種植/養殖、加工的道地藥材（飲片），盡量選擇按GAP規范種植的藥材和GMP廠家生產的飲片。了解輔料的基本情況和其潛在的質量風險，從信譽度高的大企業購買優質輔料。按照各自的法定標準（包括補充檢驗方法），對購買的原料藥材（飲片）和輔料進行檢驗，要求所有項目均符合規定。并根據調研結果開展其他檢驗，進一步排除重金屬、農藥殘留、真菌毒素、二氧化硫超標及摻雜摻假、染色等風險。

由于中藥對照制劑未來可能會更多地應用于中成藥質量標準的前瞻性研究工作，可以提供包括化學成分（群）從原料到制劑的轉移率等關鍵信息，故原料藥材（飲片）應留樣妥善保存，其檢驗和研究結果應建立檔案。

3.2 中藥對照制劑的制備 與其他中藥標準物質不同，中藥對照制劑一般應在GMP車間以至少中試的規模制備，這是由于實驗室操作與大規模生產在浸膏得率等方面存在巨大差異，前者難以體現制劑的真實狀況。制備時使用的飲片規格，應符合相應中成藥品種實際工藝的要求，投料量系指中成藥品種標準正文【制法】項規定的，切碎、破碎或粉碎后的藥量。中藥對照制劑的研制單位可委托信譽良好、工藝規范、實力雄厚、自身要求嚴格的企業，嚴格按照GMP規定進行生產。對于存在不同規格的制劑，在初期可以只制備市場主流規格的對照制劑，在評價其他規格樣品質量時折算稱樣量。對照制劑的內、外包裝材料應與相應品種市場流通產品基本一致，分裝規格可按需要自行調整。標簽及說明書應標明標準物質編號、批號、名稱、制備日期、用途、使用方法、制備單位、量值、貯存條件、裝量、使用中注意事項等。

關于滅菌步驟，原則上應采用各品種批準工藝中的滅菌方法，但對于處方中含熱敏性、揮發性成分，且為原粉入藥的制劑，所含熱敏感的活性成分（如揮發油類、黃酮苷類等）在濕熱殺菌工藝下損失較大，因而目前很多中藥廠普遍采用60Co-γ輻射殺菌^[15-17]。對于衛藥發第[1997]號通知規定的允許輻照的品種以外的品種，輻照對其有效性和安全性的影響尚不明確，在制備對照制劑時既不能盲目采用輻照滅菌，又不能罔顧現實情況延用傳統滅菌工藝（市場流通的藥品普遍采用輻照滅菌，熱敏性成分保留更多），建議暫不滅菌，樣品包裝后冷凍保存。

3.3 中藥對照制劑的標定 中藥對照制劑的標定應在分裝成最終產品之后進行，首先應滿足相應品種國家藥品標準的要求（未滅菌的品種衛生學不作要求），均勻性、穩定性以及特性量值范圍應適合該標準物質的具體用途。可以結合相應品種的執行標準，再引入指紋/特征圖譜技術進行標定，以保證中藥對照制劑質量穩定、可追溯。標定項目主要包括：①性狀。觀察候選對照制劑的顏色、形態等特征，描述其性狀。②鑒別。一般采用色譜方法進行鑒別，首選TLC鑒別。對于TLC分離效果差的品種，可考慮采用HPLC或GC鑒別。③檢查。水分、重量差異、裝量差異等應符合相應品種執行標準的規定。必要時可開展其他檢查項。④特征圖譜或指紋圖譜。一般采用HPLC或GC方法建立指紋圖譜，并對結構明確的主要色譜峰進行指認和歸屬。在換批制備時，候選對照制劑指紋圖譜與標準圖譜或前一批次對照制劑指紋圖譜比較，其相似度應大于0.90。⑤含量測定。采用色譜方法測定主要成分的含量，應不低于相應品種標準各論的規定。

均勻性評估的目的是判定單元間的變動性在統計學上是否顯著^[18]。在抽樣時應充分考慮中藥對照制劑制備方法的潛在缺點，采用適宜的抽樣方式，或從特性量值可能出現差異的部位抽取樣品。原則上應在分裝過程勻速逐步抽取，照時間順序編號、標記并記錄。抽樣數一般不少于10個最小包裝單元。每個抽取單元應獨立取樣重復測試至少2次?？梢赃x擇相應品種執行標準中含量測定項規定的方法和指標（如有多個指標，選用含量最高的指標）進行均勻性檢驗。如標準未規定含量測定項，研制單位需開發相應含量測定方法，并且以最不容易混勻的原料的含量測定為優先（如原粉制劑中的貴細藥、礦物藥、質地偏輕或偏重的藥材）。均勻性的評估一般采用方差分析法，若樣品之間無顯著性差異，則表明樣品是均勻的。

穩定性評估可為標準物質的生產、包裝、貯藏、運輸條件和質量監測時間間隔提供合理的科學依據^[18]。穩定性分為長期穩定性和短期穩定性。長期穩定性是指在規定貯藏條件下，定期開展的穩定性考察，主要通過國家藥品標準物質質量監測完成。短期穩定性是指在運輸條件下標準物質在運輸過程中的穩定性，在發放首批對照品時需要考察，主要目的為確定運輸條件，保證標準物質在運輸過程中不發生顯著變化。在運輸中出現的溫度下，選取3～5個時間點（如0，5，10 d），每個時間點考察1～3個最小包裝單元。可以選擇相應品種執行標準中含量測定項規定的方法和指標（如有多個指標，選用含量最高的指標）進行穩定性檢驗。如標準未規定含量測定項，研制單位需開發相應含量測定方法，并且以最不穩定的成分的含量測定為優先（如揮發性、熱敏性成分）。穩定性的評估一般可采用t檢驗法、回歸分析、方差分析等方法。endprint

中藥對照制劑一般供鑒別或指紋/特征圖譜用，如制備供含量測定用對照制劑，則需標示多個待測成分含量。為保證藥品標準物質特性值的準確性，應開展多個實驗室協作標定。

3.4 中藥對照制劑的質量監測 根據國際藥品標準物質管理的慣例，目前國家藥品標準物質不設“有效期”，由中檢院對藥品標準物質進行監測^[19]。中藥對照制劑質量監測的時間間隔可以按先密后疏的原則安排，選擇易變的和有代表性的成分進行監測，并考察標準物質在貯藏過程中指紋/特征圖譜的變化。在中藥對照制劑發放期間不斷積累穩定性數據，以延長使用期限。當對照制劑發生明顯改變損害了標準物質的一致性，應立即公示并停止使用該批對照制劑，并立即開展換批研制。

4 中藥對照制劑的應用

中藥對照制劑是標準物質，不是藥品，不作臨床使用，也不能用于釋放度、藥理、藥動、毒理研究用。如果超出規定的用途，使用者應對標準物質的適用性負責。

中藥對照制劑是傳統中醫藥理論與現代制藥技術及國際標準化規范相結合的產物，將其應用于中藥質量評價和控制具有如下意義：①相對于化學對照品，中藥對照制劑易制備、價格低、穩定性好、化學信息豐富，作為標準物質使用可以大大減少單體對照品的使用，從而節約中藥稀有資源，降低檢驗成本。②中藥復方物質基礎復雜，中藥對照制劑可以同時對多個組分進行控制，為建立更加全面、完善的質量評價模式提供參照，體現了中藥整體質量控制的思想。③中成藥一般為復方，處方藥味在制劑過程中化學成分可能會相互影響而發生變化，這種變化是對照藥材或對照提取物無法重現的。中藥對照制劑按照和中成藥品種相同的處方、制法研制，其色譜行為與實際樣品更加一致，當其用于鑒別時，可有效彌補對照藥材或對照提取物與藥品斑點/色譜峰以及背景差異較大的問題，能夠有效避免誤判，提高方法的準確性和專屬性。④以中藥對照制劑作為標準物質隨行生成指紋/特征圖譜輔助或代替對照指紋/特征圖譜對中藥復方制劑進行質量評價，可消除因儀器和色譜柱等實驗條件不同引入的誤差，同時解決無對照指紋/特征圖譜不能擬合的問題，提高方法的重現性。⑤中藥對照制劑可以在含量測定中作為隨行對照，在不同色譜柱、不同儀器及不同實驗室條件下比替代對照法具有更好的適用性，保證了色譜峰指認的準確性。⑥標示多個待測成分含量的中藥對照制劑可供含量測定用，對于減少化學對照品的使用，提高檢驗效率，降低檢驗成本具有重要意義。⑦國家藥品標準僅僅是中成藥需要滿足的最低標準，部分標準質量控制項目不夠全面，使不法企業有機可乘，偷工減料；即使是對所有藥味均設定了檢驗項目，可以依據其判斷“真偽”，但往往難以衡量產品“優劣”。如果不及時發展以質量與安全為核心的藥品標準，“合格的劣藥”甚至“合格的假藥”還將長期混跡于流通市場，威脅患者健康。以道地優質原料投料，嚴格按制法和GMP規范生產，并經準確標定的中藥對照制劑，可為研究中成藥質量評價創新模式，提出中藥優質認證標準或等級標準提供實物參照，對于規范市場秩序，打擊行業潛規則，引導中醫藥產業健康有序發展，預防藥品監管系統性風險，保障人民用藥安全有效具有重要和迫切的現實意義。

5 小結

中藥對照制劑作為藥品標準物質的新形式，具有化學信息豐富、價格低廉、穩定性好、具備指紋/特征圖譜特性等優點，可作為其他標準物質的有益補充，發揮不可替代的重要作用，值得廣泛推行、大力發展。目前其研制和應用還處于起步和摸索階段，中藥材原料質量的變化也給其研制尤其是換批研制帶來了挑戰，需要不斷完善、發展制備和標定技術，確保其可準確地表征與傳遞相應中成藥品種的質量特征。隨著我國中藥產業的不斷擴大，質控標準的不斷完善，相信中藥對照制劑將在促進中藥規范化、標準化、現代化進程中發揮愈來愈大的作用。

[參考文獻]

[1] 馬玲云，馬雙成. 中藥標準物質的發展現狀與展望[J]. 中國藥事，2010，24（12）：1232.

[2] 王清君，孫磊，劉峰，等. 標準物質的發展和挑戰與數字化新形式[J]. 中國藥學雜志，2016，51（18）：1537.

[3] 馬玲云，劉明理，馬雙成. 國家藥品標準物質的發展歷程與現狀[J]. 中國藥學雜志，2012，47（13）：1017.

[4] 高永堅，袁春平，黃后楷，等. 自研硝苯地平緩釋片（Ⅲ）與對照制劑體外釋放度一致性評價[J]. 藥物分析雜志，2017，37（2）：362.

[5] 國家食品藥品監督管理總局. 國務院辦公廳關于開展仿制藥質量和療效一致性評價的意見[EB/OL]. [2016-03-15]. http：//www.sda.gov.cn/WS01/CL1035/146200.html.

[6] 李瑞芳，程秀民. 自制恩替卡韋片與上市對照制劑體外溶出度對比研究[J]. 藥物分析雜志，2011，31（7）：1333.

[7] 孫國祥，張宇，高嘉悅，等. 內標定量指紋/特征圖譜法篩選冠心蘇合丸對照制劑[J]. 中草藥，2014，45（5）：642.

[8] 孫國祥，侯志飛，張晶，等. 中藥標準制劑控制模式和定量指紋/特征圖譜雙層次控制模型理論引領中藥一致性評價[C]. 杭州：第二屆中藥配方顆粒研究開發與質量控制技術交流研討會，2016.

[9] 孫國祥，侯志飛，張晶. 標準制劑控制模式和中藥定量指紋/特征圖譜雙層次控制引領中藥質控變革[C]. 天津：第一屆《藥學學報》藥學前沿論壇暨2015年中國藥學會中藥與天然藥物專業委員會會議，2015.

[10] 耿婷，張在娟，李艷靜，等. 中藥對照制劑自身對照法用于桂枝茯苓膠囊的質量評價[J]. 中國中藥雜志，2014，39（21）：4127.

[11] 聶黎行，張燁，張南平，等. 顯微技術在牛黃清心丸（局方）質量控制中的應用[J]. 中國中藥雜志，2016，41（20）：3741.

[12] 劉義梅，陳科力. 當前中藥材市場幾種常見假劣藥形式[J]. 中國中藥雜志，2012，37（8）：1089.

[13] 丁晴，仇雅靜，房克慧，等. 動物來源中藥材、飲片質量現狀及原因分析[J]. 中國中藥雜志，2015，40（21）：4309.

[14] 中國藥典.四部[S]. 2015： 416.

[15] 趙永富，汪昌保，王超. 輻射滅菌技術在制藥業上的最新應用進展[J]. 核農學報，2006，20（2）：143.

[16] 張立雯，江英橋，林彤，等. 中藥輻照檢測研究現狀概述[J]. 中藥材，2011，34（3）：482.

[17] 張立雯，林彤，畢福鈞，等. 輻照中藥光釋光鑒別法的建立與評價[J]. 中藥新藥與臨床藥理，2013，24（1）：91.

[18] 陳亞飛，李曉東，劉明理，等. 藥品標準物質基本特性與規范生產有關質量管理要求[J]. 中國藥事，2017，31（2）：134.

[19] 馬玲云，寧保明，陳國慶，等. 國家藥品標準物質研制技術要求的介紹[J]. 藥物分析雜志，2010，30（10）：1990.

[責任編輯 孔晶晶]endprint