免疫印跡法檢測門診消化不良患者幽門螺桿菌感染及其分型

北京懷柔醫院（101400）梁文燕

幽門螺桿菌感染一直被認為是慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌的主要致病因素，是世界上感染率最高的細菌[1]。人們對幽門螺桿菌的感染心生恐懼，紛紛要求根除Hp，近年來隨著抗菌藥物的廣泛使用，抗生素的不良反應越發嚴重，抗Hp治療的效果也不斷降低。門診經常遇到表現為消化不良的患者，主動或是被動來檢查Hp，要求治療，那么這些Hp陽性患者該不該一概而論的全部治療呢？現已有研究表明，并非所有Hp感染都會引發疾病，Hp感染時20%～30%沒癥狀，50%以上感染者能引起慢性炎癥發生，可能會有有消化不良的表現[2]。本研究旨在探討經13C呼氣試驗檢測幽門螺桿菌（H.pylori）為陽性消化不良者，針對這部分患者再進行免疫印跡法分型檢測，觀察分析其結果。

1 資料和方法

1.1 一般資料 入選標準：2015年9月～2016年12月本院收治的312患者例因消化不良表現為上腹部不適或疼痛、胃脹、燒心、噯氣等癥狀，經行13C呼氣試驗檢測Hp陽性的患者，男性156例，女性146例，年齡14～44歲為青年組，平均（28.6±14.2）歲，74例；45～59歲為中年組，平均（51.3±7.2）歲，123例；60歲以上為老年組，平均（67.4±6.6）歲，105例，所有患者抽靜脈血2ml，離心取10μL血清檢測。

1.2 儀器及試劑 Hp抗體分型檢測（免疫印跡法）（深圳市伯特勞生物制品有限公司提供）。

1.3 研究方法 嚴格按照說明書操作：將10μL血清與緩沖液同時加至孵育槽中與印跡膜孵育30分鐘，再次洗凈后加入顯色劑反應5～10分鐘后，與Hp標準區帶比較，檢測細胞毒素相關蛋白（CagA、空泡毒素A(VacA)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)）的結果。

1.4 Hp感染判斷標準 采用我國衛生部發布的Hp感染標準對結果進行判斷：①HpⅠ型：結果顯示CagA和（或）VacA抗體陽性，尿素酶抗體A、B均為陽性；②HpⅡ型：結果僅有尿素酶抗體A、B呈陽性，而CagA和VacA抗體呈現陰性；③Hp陰性：CagA、VacA、UreA、UreB抗體均表現為陰性。

1.5 統計學處理 采用SPSS17.0軟件進行統計，采用χ2檢驗和多組之間兩兩比較的χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Hp感染分型與性別關系 312例再行Hp抗體分型檢測（免疫印跡法）分型檢測302例，Ⅰ型235例，男性為121例，陽性率77.6%，女性114例，陽性率78.%，應用SPSS軟件進行卡方分析，卡方值為0.1121，P＞0.05，表明在Hp抗體分型檢測（免疫印跡法）分型檢測，Ⅰ型、Ⅱ型陽性率在男女間并不存在差異，見附表1。

2.2 312例患者行Hp抗體分型檢測（免疫印跡法）分型，檢測出陽性結果302例，陽性率96.7%，其中Ⅰ型235例，占總陽性77.8%（235/302)；Ⅱ型67例，占總陽性22.2%（67/302），HP陰性10例，Ⅰ型陽性率高于Ⅱ型，具體見附表2。

2.3 幽門螺桿菌兩型分布的特征 按年齡分布分3組。年齡14～44歲為青年組，陽性74例，陽性率53.4%（40/74）；45～59歲為中年組，陽性123例，陽性率80.5%（99/123）；60歲以上為老年組陽性105例，陽性率91.8%（96/105）；應用SPSS軟件進行多組間的兩兩比較，并行χ2檢驗，經計算青年組和中年組的χ2值為101.66，P<0.0125，青年組和老年組的χ2值為191.05，P<0.0125，中年組和老年組的χ2值為56.65，P<0.0125有統計學意義，老年感染率最高，以Ⅰ型為主，見附表3。

附表1 Hp抗體分型檢測及性別關系

附表2 Hp抗體分型檢測及臨床分型

附表3 Hpylori感染和年齡的關系

3 討論

我國是幽門螺桿菌高發國家，世界衛生組織（WHO）已將其列為胃癌的頭號致癌因子，臨床上一般將其分為兩類[3]：即Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型可產細胞毒素Hp菌株，其中細胞毒（Cag A）蛋白，空泡毒素（Vac A）蛋白毒力較強。這類菌株能使上皮細胞出現空泡、變形和損害，易引起潰瘍和誘發癌變。Ⅱ型是不產生細胞毒素的Hp，即CagA 和VacA 陰性菌株，這類菌株毒性較小，感染后一般只是引起慢性淺表性胃炎而無臨床癥狀[4]，因此檢測HP分型對指導Hp感染的治療具有非常重要的意義。本研究顯示，Ⅰ型感染在男女間并不存在差異，老年患者感染率最高，13C呼氣試驗檢測陽性患者接受分型檢測其陽性率為96.7%，兩種檢測方式一致性較高，在檢測有無Hp感染方面二者均可，Hp分型檢測更加對臨床工作有指導意義。若為Ⅰ型感染，主張積極給予抗HP治療，若為Ⅱ型感染，可不予治療，隨訪觀察。這樣就可以避免見Hp就殺，廣泛應用抗生素的現象發生。臨床上用來診斷感染的方法很多，如胃組織做快速尿酶測定，組織切片染色，細菌培養。13C呼氣試驗等，但這些結果易受試劑質量，標本量，反應時間，環境溫度，用藥情況的影響，還需采用侵入性、創傷性的手段來采集樣本，給患者帶來一定的痛苦和心理負擔；而免疫印跡法為無創傷性診斷檢測方法，還具有敏感性高、特異性強、方法簡單、時間短等特點，免疫印跡法檢測門診消化不良患者HP感染及其分型簡便易行，同時對抗HP治療有很好的指導作用。