西藏白肉靈芝栽培關(guān)鍵技術(shù)

謝 榮

（西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所，西藏拉薩850032）

市場上的靈芝或者靈芝產(chǎn)品主要是赤芝（Ganoderma lucidum）、紫芝和松杉靈芝。白肉靈芝（Ganoderma leucocontextum）是新發(fā)現(xiàn)的種類[1]。西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所與中國科學(xué)院微生物研究所合作開展的白肉靈芝活性物質(zhì)分析與功效研究[5]，目前白肉靈芝藥效作用也成為學(xué)術(shù)研究的熱點(diǎn)[2，3]。為實(shí)現(xiàn)西藏白肉靈芝產(chǎn)業(yè)品牌化發(fā)展，規(guī)范化繁育菌種和標(biāo)準(zhǔn)化栽培提供技術(shù)支持，筆者總結(jié)了自2012年馴化栽培[4]至今，白肉靈芝（保藏菌株X033）在西藏拉薩地區(qū)菌種制作、溫室栽培關(guān)鍵技術(shù)。

1 菌種制作

1.1 菌種制作流程種源（組織分離）→母種（試管）→原種（試管轉(zhuǎn)麥粒）→栽培用種（麥粒轉(zhuǎn)麥粒）→栽培袋（麥粒轉(zhuǎn)木屑+棉子殼）。

1.2 麥粒原種批量制作石灰水浸泡2～4 d，3～4 d期間須換水、翻攪，防止麥粒泡爛，容器均為250 mL聚丙烯組培瓶，菌種量少，栽培種轉(zhuǎn)接率1∶4～1∶6，因口徑較大，在接種室內(nèi)，容易交叉感染，因此，接種工具須一瓶一更換。

1.3 栽培種制作主料預(yù)處理青岡木屑加工為0.5～1.0 cm方塊，預(yù)先浸水（添加石灰，石膏各1%），堆漚3 d軟化處理，防止木片浸水不透，成為污染源。

將培養(yǎng)料按表1比例調(diào)配、拌料，調(diào)pH8，料含水量60%～65%（判別方法：用拇指、食指和中指捏培養(yǎng)料，如有水滲出，含水量在50%～55%；用拳攥培養(yǎng)料，如有水連續(xù)滴下，含水量在65%以上）。沖壓式裝袋機(jī)填裝于17 cm×36 cm×0.005 cm聚丙烯折角塑料袋，檢查無破損袋后插入打孔棒。裝料掌握在15～20 cm，袋口用套環(huán)、套蓋及兩個無紡布濾片封口，套環(huán)距袋肩2 cm以上空間。周轉(zhuǎn)料包提袋口套環(huán)，確保密封，避免料包磕碰和過分?jǐn)D壓。

表1 各級菌種主要參數(shù)

2 滅菌與接種

2.1 滅菌料袋豎放于周轉(zhuǎn)筐，立式碼放滅菌車上，多次排冷，梯度升溫，確保袋料內(nèi)溫度達(dá)標(biāo)。高壓滅菌：0.02～0.05 MPa，排冷9次，105℃；0.065 MPa 30 min，115℃；0.115 MPa 40 min，121℃；0.148 MPa 70 min，燜90 min。

2.2 接種接種臺和接種箱，在接種前、后必須清潔臺面，再用來蘇爾、75%酒精棉球擦拭消毒。接種前，密閉氣霧消毒或開紫外燈及風(fēng)機(jī)過濾系統(tǒng)。專用工作服要保證清潔，正面懸掛于更衣緩沖間，并進(jìn)行紫外燈消毒30 min。接種工具用紗布包好，封裝于鋁盒內(nèi)與料袋一起滅菌，料袋和接種工具及菌種需在紫外燈下消毒處理30 min。接種工具和料袋必須冷卻至30℃以下方可接種。料袋在滅菌結(jié)束，放盡余氣、氣壓歸零，自然降溫散熱或轉(zhuǎn)運(yùn)至冷卻室排風(fēng)散熱，以免內(nèi)外溫差過大冷凝水過多，影響菌絲萌發(fā)。

圖1 建畦覆土埋袋

操作人員接種前雙手必須進(jìn)行“一清（流水、肥皂）、二洗（來蘇爾或甲酚皂）、三消毒（75%酒精擦拭手指）”，進(jìn)入緩沖間前，換鞋或戴鞋套，進(jìn)入緩沖間更換專用工作服，戴口罩、頭套，進(jìn)入潔凈室接種，更換菌種瓶和接種工具及菌包周轉(zhuǎn)盤時，要用75%的酒精噴灑或擦拭表面，接種操作做到“輕、快、準(zhǔn)”，在超凈臺或?qū)恿髡窒虏僮鳎毐ＷC風(fēng)機(jī)系統(tǒng)開啟，菌種不得長時間置于超凈臺或?qū)恿髡滞獠僮鳌２僮魅藛T在潔凈室接種未完成之前，不得隨意進(jìn)出，凡進(jìn)出一次，必須關(guān)好門、更換工作服、清潔消毒，接種時不得接打電話。連續(xù)接種時間不超過2.5 h，否則潔凈室凈化風(fēng)機(jī)循環(huán)系統(tǒng)凈化度會降低。

3 發(fā)菌與埋袋

3.1 發(fā)菌層架式立袋發(fā)菌，不超過4層，環(huán)境溫度20～28℃，暗培養(yǎng)，每天通風(fēng)2～3次，上風(fēng)口進(jìn)氣、下風(fēng)口排氣，庫內(nèi)頂部設(shè)內(nèi)循環(huán)電熱加溫風(fēng)機(jī)。集中批量制袋時間7月下旬-12月下旬，3-4月拉薩風(fēng)季，氣溫回暖，不宜制菌袋。

3.2 埋袋用來埋袋的日光溫室（7 m×60 m），需設(shè)頂通風(fēng)口或后坡通風(fēng)窗，前風(fēng)口距溫室前腳地面50 cm。拱架上設(shè)微噴灌，儲水桶或抽水泵出水方向需設(shè)濾清器；遮陽網(wǎng)內(nèi)遮陽，遮前風(fēng)口，勿遮頂通風(fēng)口。

3.2.1 埋袋前準(zhǔn)備 一個月前翻耕土壤，清除雜草、石塊，撒石灰澆透水，晴天日光暴曬數(shù)日。南北向建畦，畦寬1.0～1.2 m，畦深15～20 cm，畦間排水溝寬30～50 cm，深30 cm，畦底和畦溝撒石灰粉消毒。每畦正對后墻碼放3～4層，每畦埋袋100～120個，菌包完熟貯藏1個月以上，須四周刺孔再埋袋。

3.2.2 埋袋時間 6月下旬至7月下旬期間，晝夜溫差小于5℃，埋袋時間不宜晚于7月，4月地溫回暖，開始埋袋。5～8月晝夜溫差逐漸縮小，是定植出芝最佳時段。

圖2 墻式覆土埋袋

3.2.3 埋袋方式 有建畦立袋覆土和墻式碼放覆土兩種。

建畦立袋覆土方式，是將菌包去套環(huán)套蓋，埋入地下一頭的塑料袋剪去三分之一，上部剪去菌袋中間套環(huán)部分，以能露出培養(yǎng)料為度，用經(jīng)消毒的刀片去老菌皮，清潔干凈，菌包豎立，一行5～6個，間距5～10 cm，行間距20 cm（圖1）以上，因向光性行間距縮短，前后芝蓋易粘連，菌包四周均填上沙壤土，厚度1～2 cm，剛能蓋到菌包中間部位即可，用水澆透土表，在上面再搭一層遮陽網(wǎng)保濕。

墻式碼放覆土方式，是將菌包去套環(huán)套蓋、老菌皮和部分菌袋，培養(yǎng)料露至袋肩位置，菌包完熟貯藏1個月以上，須四周刺孔。自日光溫室后墻向溫室前角，兩排菌包口對口排布，間隔一個菌包的距離，每排袋與袋間隔2 cm，挖取兩排袋底邊土壤向兩排菌包中間填土覆蓋，露出至袋底2 cm，底層排布覆土完畢，第二層在底層上交錯碼放，每包向填土方向縮進(jìn)2 cm，以此類推，5～7層即可（圖2）。和建畦立袋覆土相比，至少300袋一垛，增加1倍的埋袋量，袋底劃口、定向控制、交錯出芝，便于收集孢子粉、二潮芝商品化。

4 出芝管理

菌包覆土后原基形成前，要保持畦面始終濕潤，每天噴水2～3次、通風(fēng) 1～2次，空氣相對濕度65%～70%，溫度為25～30℃，最高不可超過32℃，棉被卷至前通風(fēng)口通風(fēng)，午后高溫時段加強(qiáng)通風(fēng)和噴水降溫，卷至頂通風(fēng)口，通風(fēng)半小時，低于25℃，放下棉被保溫、避光。

原基形成、芝蕾分化及芝柄伸長期，不需卷被通風(fēng)，芝蕾形成后，如不為觀賞用，原基留一個即可。芝蓋伸展期到子實(shí)體成熟期，空氣相對濕度應(yīng)逐漸降低，光照強(qiáng)度逐步增加，白天非高溫時段可卷起棉被透光增溫，加強(qiáng)通風(fēng)次數(shù)和時段，夜間放下棉被至前通風(fēng)口，減少晝夜溫差。

當(dāng)芝蓋周圍黃色的生長圈逐漸轉(zhuǎn)為棕紅色，但尚未有孢子彈出時，即可套袋收粉，噴水改溝灌，保持土壤濕潤。孢子分兩次采收，檢查袋內(nèi)孢子粉是否霉變，用專用的軟毛刷將紙上的和袋內(nèi)的靈芝孢子粉刷到專用的容器，烘干、分篩雜質(zhì)。

芝蓋邊緣全部轉(zhuǎn)為棕褐色，邊沿開始內(nèi)卷，質(zhì)地木質(zhì)化即可進(jìn)行采收。采收時，要用手握住芝柄底部，在芝柄基部約1 cm處用剪刀剪下，并清除泥土等雜物。建畦覆土栽培主要采收頭潮芝，第二潮靈芝產(chǎn)量低、品質(zhì)較差。