小兒哮喘中淋巴細胞亞群及CD4+的表達及意義

孜維地古麗·買買提，馬 芹

(新疆維吾爾自治區人民醫院兒科，新疆維吾爾自治區 烏魯木齊 830001)

小兒哮喘中淋巴細胞亞群及CD4+的表達及意義

孜維地古麗·買買提，馬 芹

(新疆維吾爾自治區人民醫院兒科，新疆維吾爾自治區 烏魯木齊 830001)

目的探討小兒哮喘中淋巴細胞亞群及CD4+細胞的表達及意義。方法選取新疆維吾爾自治區人民醫院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患兒為實驗組，另選取同期在院健康體檢兒童103例為對照組。對兩組研究對象的淋巴細胞亞群，外周血Treg，外周血TH1、TH17和TH2進行比較分析。結果實驗組外周血Treg占CD4+細胞比例顯著高于對照組(χ2=2.021，P<0.05)，外周血TH1在兩組中占CD4+細胞比例差異無統計學意義(P>0.05)，實驗組外周血TH2占CD4+細胞比例顯著高于對照組(χ2=7.179，P<0.05)，實驗組外周血TH17占CD4+細胞比例顯著高于對照組(χ2=9.664，P<0.05)，實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組，CD4+/CD8+所占比例顯著高于對照組(χ2值分別為10.253、14.145、16.327，均P<0.05)。結論淋巴細胞亞群及CD4+細胞在小兒哮喘的發病中能夠作為診斷依據，對哮喘的診斷和治療等均具有重要的臨床意義。

淋巴細胞亞群；CD4+細胞；小兒哮喘；表達及意義

小兒哮喘的發病率呈逐年上升發展趨勢。國外研究資料顯示，0～3歲幼兒的發病率高達20.11%[1]。小兒哮喘是小兒呼吸系統中常見的疾病，哮喘的發生和發展均受到免疫系統的影響。隨著人們對淋巴細胞亞群及CD4+細胞研究的深入，人們逐漸將CD4+細胞分為外周血TH1、TH17、TH2和調節性T細胞(Treg)。本文綜合分析小兒哮喘中淋巴細胞亞群及CD4+細胞的表達及意義，為臨床治療哮喘患兒提供參考依據，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取新疆維吾爾自治區人民醫院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患兒作為實驗組，另選取同期在院健康體檢兒童103例作為對照組。納入標準：①年齡3～8歲；②在本次研究前2周內未使用過糖皮質激素和丙種球蛋白；③知情參與本次研究。排除標準：①合并心肺疾病；②合并腫瘤；③合并自身免疫性疾病。

實驗組中有70例男患兒(占67.96%)，33例女患兒(占32.04%)；平均年齡為(5.02±1.15)歲，平均體重為(22.02±5.18)kg。對照組中有68例男患兒(占66.02%)，35例女患兒(占33.98%)；平均年齡為(5.05±1.13)歲，平均體重為(22.05±5.13)kg。兩組研究對象的平均年齡、平均體重及性別比例比較差異均無統計學意義(均P>0.05)。

1.2方法

1.2.1采集標本

對哮喘患兒入院時使用肝素鈉抗凝負壓真空方法取清晨空腹靜脈血3mL，在2小時內檢測。對照組患者采用微量元素檢測余血。

1.2.2檢測細胞因子

對外周血Treg、外周血TH1、外周血TH17、外周血TH2細胞因子進行檢測。

按照順序分別在流式管中加入5μL丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)、1μL離子霉素、500μL外周全血，攪拌均勻之后，置入37°C的培養箱中。再標記好抗體管和對照管，固定細胞打孔：將200μL外周血加入試管中，避光保存，在室溫下離心10分鐘左右后轉速處理，棄上清、再加入1mL洗滌液，混勻。標記細胞膜內的免疫熒光：在試管中加入5μL CD4+抗原肽段(CD4-APC)，在抗體管中加入單克隆抗體。流式細胞儀檢測：在試管中加入400μL磷酸鹽緩沖液(PBS)，混勻之后，上機檢測；T淋巴細胞亞群檢測按照四色免洗淋巴細胞亞群的分析方法進行相應檢測，該類系統則自動分析其結果。

1.3統計學方法

2結果

2.1兩組CD4+細胞水平的比較

實驗組外周血Treg占CD4+細胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，外周血TH1在兩組中占CD4+細胞比例比較差異無統計學意義(P>0.05)，實驗組外周血TH2占CD4+細胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，實驗組外周血TH17占CD4+細胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組的CD4+細胞水平比較結果

2.2兩組淋巴細胞亞群水平的比較

實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組，而CD4+/CD8+所占比例高于對照組，兩組比較差異均有統計學意義(均P<0.05)，見表2。

表2 兩組淋巴細胞亞群水平比較結果

3討論

3.1 CD4+細胞在哮喘發生和發展過程的作用

有研究資料顯示，淋巴細胞亞群及CD4+細胞在小兒免疫系統中起到相關作用，其中外周血TH1和外周血TH2免疫反應可能產生保護作用[2-3]。

哮喘本身是由多種細胞介導的慢性氣道性反應炎癥，CD4+細胞在哮喘的發生和發展過程中起著重要作用[4]。CD4+淋巴細胞具有免疫調節作用，能夠積極參與機體的免疫平衡中，具有以下兩個方面的特征：其一，免疫無能性；其二，免疫抑制性[5-6]。在人類健康個體的外周循環血液中，CD4+淋巴細胞占4.2%～10.2%。雖然CD4+淋巴細胞在體內的量比較少，但是在免疫性疾病中和過敏性疾病中發揮著重要的價值和作用[7]。

3.2 CD4+細胞及淋巴細胞亞群在哮喘患兒中的臨床意義

本研究結果顯示，實驗組患兒外周血Treg、TH2、TH17占CD4+細胞比例均顯著高于對照組(均P<0.05)。TH17細胞在病毒和真菌的病原體感染中發揮著不同的調節作用。有研究資料表明TH17與炎癥早期發揮的啟動作用較為顯著[8]。本資料實驗組TH17水平顯著高于對照組，說明TH17細胞的應答對哮喘的氣道高反應性起著主導作用。對于有家族過敏史的患兒而言，外周血Treg、CD4+等相比起正常人群更高。

本資料顯示實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組(均P<0.05)，實驗組CD4+/CD8+所占比例顯著高于對照組(P<0.05)。CD4+的主要作用是抑制細胞毒性細胞亞群，CD8+在殺死靶細胞之后能夠立即溶解，發病過程中外周靜脈血含量表現不夠平穩。本文研究結果顯示CD4+/CD8+所占比例高于對照組，提示哮喘患兒的淋巴細胞抑制作用非常顯著，最終能夠抑制其免疫力。哮喘患兒存在免疫學變化，CD4+/CD8+比例相比CD4+、CD8+所占比例呈現顯著增高趨勢。因此，在臨床治療過程中，要積極加強對免疫功能的相關治療。

呼吸道感染是引發哮喘的重要原因之一，但是哮喘和肺炎之間的關系尚無法詳細闡明。有資料顯示，急性發作期哮喘患兒感染支原體陽性率達到17.9%[9]。在臨床中，血常規檢查能夠得到更為準確的結果，人們更為重視白細胞和紅細胞等檢測指標，但未高度重視中性粒細胞和嗜酸性粒細胞的檢測指標[10]。然而，中性粒細胞、嗜酸性粒細胞與哮喘的發生呈顯著相關性。嗜酸性粒細胞與哮喘的發生有著密切的關系，對炎癥疾病同樣具有重要的臨床意義。因此，臨床上需要結合患者的具體病情來判斷血常規結果，再作出綜合分析與判斷，以期能夠為進一步的診斷和治療提供依據。本文在研究中由于樣本量較少，尚存在不足之處，因此還需要進一步深入研究。

綜上所述，淋巴細胞亞群及CD4+細胞在小兒哮喘的發病中能夠作為診斷依據，對哮喘的診斷和治療均具有重要的臨床意義。

[1]馬倩倩,梁秋華,孫琳,等.橋本氏甲狀腺炎患者外周血中CD4+ CD45RO+記憶性T細胞的表達及意義[J].中國免疫學雜志,2016,32(10):1527-1531.

[2]程琳,錢龍,譚悅,等.芳香烴受體在類風濕關節炎患者外周血CD4+ CD25+ T細胞的表達及意義[J].中華疾病控制雜志,2016,20(4):379-382.

[3]Zhao T H, Liu Z, Yu A L,etal.Effects of intraoperative administration of dexmedetomidine on the percentage of T-lymphocyte subsets and natural killer cells in patients with colorectal cancer[J].Open J Anesthesiol,2013,3(2):104-108.

[4]李文良,高亮.CD4+ T細胞及淋巴細胞亞群在小兒哮喘與肺炎中的水平及臨床意義[J].中國婦幼健康研究,2016,27(7):861-863.

[5]高志剛,袁永紅,詹建華.沙丁胺醇氣霧劑聯合硫酸鎂對小兒哮喘IL-2、IL-4、IL-5、IFN-γ及T淋巴細胞亞群的影響[J].中國生化藥物雜志,2015,35(8):110-112,115.

[6]Liu B, Li J, Han Y P,etal.Dynamic analysis of lymphocyte subsets of peripheral blood in patients with acute self-limited hepatitis B[J].Health,2010,2(7):736-741.

[7]王棟,孫艷.霧化吸入布地奈德治療小兒哮喘100例療效及免疫功能對比觀察[J].陜西醫學雜志,2016,45(5):530-531.

[8]張歡,張秀琴.普米克令舒聯合孟魯司特治療小兒哮喘的有效性及其對肺功能、T淋巴細胞亞群的影響[J].藥物評價研究,2017,40(3):377-380.

[9]Zhang N W, Guo S N, LiI H R,etal.Effects of Sijunzi decoction on small intestinal T lymphocyte subsets differentiation in reserpine induced spleen deficiency rats[J].J Anim Vet Adv,2012,11(9):1290-1298.

[10]Song J Y, Du G S, Xiao L,etal.Individualized immunosuppressive protocol of liver transplant recipient should be made based on splenic function status[J].Chin Med J (Engl),2016,129(11):1340-1346.

[專業責任編輯：侯 偉]

ExpressionandsignificanceoflymphocytesubsetsandCD4+cellsinchildrenwithasthma

Ziweidiguli·MAIMAITI, MA Qin

(DepartmentofPediatrics,XinjiangUygurAutonomousRegionPeople’sHospital,XinjiangUygurAutonomousRegionUrumqi830001,China)

ObjectiveTo investigate the expression and significance of lymphocyte subsets and CD4+ T cells in children with asthma.MethodsTotally 103 children with asthma were enrolled in experimental group from Xinjiang Uygur Autonomous Region People’s Hospital from December 2015 to December 2016, and 103 healthy subjects taking health examination in the same period were selected as control group. The lymphocyte subsets, peripheral blood Treg, peripheral blood TH1, TH17 and TH2 were analyzed and compared between two groups.ResultsThe proportion of Treg in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=2.021,P<0.05). There was no significant difference in the proportion of peripheral blood TH1 between two groups (P>0.05). The proportion of peripheral blood TH2 in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=7.179,P<0.05). In the experimental group the proportion of peripheral blood TH17 in CD4+T cells was significantly higher than that in the control group (χ2=9.664，P<0.05). The proportion of CD8+ and CD4+cells was remarkably lower in the experimental group, while the proportion of CD4+/CD8+ was significantly higher (χ2value was 10.253, 14.145 and 16.327, respectively, allP<0.05).ConclusionLymphocyte subsets and CD4 + T cells can be used as diagnostic criteria in the diagnosis of childhood asthma pathogenesis, and it has important clinical significance in the diagnosis and treatment of asthma.

lymphocyte subsets; CD4+ T cells; pediatric asthma; expression and significance

R725.6

A

1673-5293(2017)10-1221-03

2017-06-15

孜維地古麗·買買提(1973—)，女，副主任醫師，主要從事兒科臨床工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.10.019