狼瘡性腎炎患兒血清總IgE水平變化及臨床意義

余 玲,毛建華

(浙江大學醫學院附屬兒童醫院腎臟內科，浙江 杭州 310003)

狼瘡性腎炎患兒血清總IgE水平變化及臨床意義

余 玲,毛建華

(浙江大學醫學院附屬兒童醫院腎臟內科，浙江 杭州 310003)

目的探討血清總IgE變化水平在兒童狼瘡性腎炎病情活動中的臨床意義。方法采用ELISA法測定狼瘡性腎炎患兒和對照組患兒血清中總IgE含量，并檢測其24小時尿蛋白定量、尿蛋白/肌酐、血肌酐、血尿素氮，計算腎小球濾過率。結果狼瘡性腎炎組患兒血清總IgE水平較對照組顯著升高，差異有高度統計學意義(t=3.889，P<0.01)，高IgE亞組患兒公斤體重24小時尿蛋白定量和尿蛋白/尿肌酐水平均明顯高于低IgE亞組，差異有統計學意義(t值分別為2.233、2.125，均P<0.05)，但兩亞組的血肌酐、血尿素氮和腎小球濾過率均無顯著統計學差異(t值分別為0.808、1.194、0.522，均P>0.05)。結論血清IgE對判斷狼瘡性腎炎病情活動有意義，調節IgE表達可能有助于改善狼瘡性腎炎患兒的病情。

狼瘡性腎炎；免疫球蛋白；兒童；酶聯免疫吸附法

系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)是一種自身免疫性疾病，由于機體缺乏對核酸的免疫耐受、激活自身反應性淋巴細胞和產生大量誘導組織損傷的自身反應性抗體而發病。狼瘡性腎炎(lupus nephritis, LN)是SLE嚴重的并發癥之一，腎臟局部自身抗體的沉積以及淋巴細胞的浸潤導致腎炎的發生，臨床出現腎臟受累者約高達60%。與成人相比，兒童更易發生腎損害。

免疫球蛋白E(immunoglobulin E, IgE)在抵御寄生蟲感染和過敏反應發病機制中重要作用已經被認可。既往有研究表明，SLE患者血清中自身反應性IgE含量較正常人群偏高[1]，但是SLE患者不比一般人群更容易發生IgE驅動的過敏反應。因此，IgE在自身免疫反應中的作用可能有所不同。本研究通過檢測LN兒童血清總IgE含量，探討IgE在LN病情活動中的臨床意義。

1 對象和方法

1.1 研究對象

選取2011年3月至2016年12月在浙江大學醫學院附屬兒童醫院腎臟內科治療的LN患兒50例為LN組。所有患者均符合LN診斷標準[2]。SLE患兒有下列任一項腎受累表現者即可診斷為LN：①尿蛋白檢查滿足以下任一項者：1周內3次尿蛋白定性檢查陽性，或24小時尿蛋白定量>150mg，或1周內3次尿微量白蛋白高于正常值；②離心尿每高倍鏡視野(HPF)紅細胞(RBC)>5個；③腎功能異常(包括腎小球和/或腎小管功能)；④腎活檢異常。另隨機選取本院同時期收治的50例同年齡階段非LN(且非SLE等其他自身免疫性疾病)患兒納入對照組。入組患兒均簽署知情同意書。本研究通過浙江大學醫學院附屬兒童醫院醫學倫理會同意。

1.2 研究方法

采用酶聯免疫吸附測定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法檢測血清總IgE水平。同時測量患兒體重、身高，檢測24小時尿蛋白定量、尿蛋白/肌酐、血肌酐(serum creatinine, Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)。腎小球濾過率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)計算采用Schwartz-Lyon公式[3]：eGFR[(mL/min·1.73m2)]=k×身高(cm)/ Scr(μmol/L)，當k=36.5(當患兒為≥13歲的男性),k=32.5(當患兒為<13歲的男性和所有女性)。

1.3 標本采集與檢測

囑患兒家屬入院后第2天收集患兒清晨的第1次尿，留取中段尿2～3mL于尿試管中立即送檢。待晨尿排盡后留取24小時尿標本，同時將每次的尿標本收集于清潔干燥的容器內，并在收集第1次24小時尿標本后加入10mL甲醛防腐，當尿標本收集完畢后，取其中的2mL使用檢驗生化儀器檢測尿蛋白和尿肌酐。所有患兒于入院24小時內抽取空腹8小時以上的肘靜脈血8mL置于干燥的非抗凝管中，使用全自動生化分析儀測定Scr和BUN。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 一般資料

LN組中男性患兒14例，女性患兒36例，年齡6.2～15.8歲。對照組中男性患兒18例，女性患兒32例，年齡5.2～15.4歲。兩組的性別構成比、發病年齡以及體重差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 LN組及對照組患兒基本資料

2.2 兩組血清總IgE水平及腎功能相關臨床指標比較

LN組患兒治療前血清總IgE水平為272.5±42.6 IU/mL，其中有31例高于100IU/mL，超出正常范圍。對照組患兒血清總IgE水平為85.9±22.1IU/mL，顯著低于LN組患兒(P<0.01)。對照組中有6例患兒的IgE表現異常，高于100IU/mL，其中3例診斷為胡桃夾綜合征，2例泌尿道感染，1例多囊腎。

LN組患兒的BUN明顯高于非LN組，差異有高度統計學意義(P<0.01)，但前組的Scr不明顯高于后組。此外，LN組的BUN均值和Scr均值略高于正常值上限(7.9mmol/L和77.0umol/L)，而對照組均在正常范圍，見表2。

檢測項目LN組(n=50)對照組(n=50)tP24小時尿蛋白(mg)1827．6±260．1未檢測--尿蛋白/肌酐2．3±0．3未檢測--Scr(μmol/L)77．3±8．761．0±3．31．750．085BUN(mmol/L)8．2±0．85．5±0．43．0840．003血清總IgE(IU/mL)272．5±42．685．9±22．13．889<0．001

2.3 血清總IgE水平與狼瘡性腎炎病情程度相關性分析

為了分析LN患兒血清總IgE水平與病情程度的相關性，基于患兒血清總IgE水平均值，將LN患兒分為低IgE亞組(<272.5IU/mL)和高IgE亞組(≥272.5IU/mL)，其中低IgE亞組34例，高IgE亞組16例。

高IgE亞組患兒24小時尿蛋白定量顯著高于低IgE亞組(2 628.6±490.4mg vs 1 439.2±285.6mg，P=0.03)，公斤體重標準化后24小時尿蛋白定量仍顯示出類似的差異(75.3±11.7mg/kg vs 42.1±8.7mg/kg，P=0.03)。同時，高IgE亞組患兒的尿蛋白/肌酐水平也明顯高于低IgE亞組(P=0.04)。

與此同時，高IgE亞組Scr和BUN有高于低IgE亞組的趨勢，eGFR則呈現相反趨勢，但這些趨勢尚無顯著統計學差異(P>0.05),見表4。

此外，兩亞組患兒性別構成比、發病年齡、體重均無顯著差異(P>0.05),見表3。

表3 兩亞組基本情況比較

表4 兩亞組后相關臨床檢測指標比較

3 討論

3.1 SLE/LN與自身免疫反應

SLE的發病與效應T淋巴細胞的異常活化以及針對核抗原，特別是雙鏈DNA(double-stranded DNA, dsDNA)自身抗體的出現有關。由自身抗體和核抗原形成的免疫復合物(immunocomplexes, ICs)沉積和炎癥細胞在腎臟的浸潤引起LN。如今較為研究成熟的SLE發病機制之一是Toll樣受體9(toll-like receptor 9, TLR9)感應dsDNA-IgG ICs，激活漿細胞樣樹突狀細胞(plasmacytoid dendritic cells, pDCs)，導致干擾素-α(interferon-α, IFN-α)反應[4]。然后，IFN-α和pDCs支持B細胞活化、增殖和漿細胞分化而產生自身抗體。

3.2 SLE/LN與自身IgE抗體

IgE是免疫球蛋白的亞型之一，因其在輔助性T細胞2(type 2 helper T lymphocyte, Th2)應答和過敏發生機制中的作用而被熟知。不斷有證據表明IgE抗體的致病作用不僅僅限于過敏，它們可能在其它炎癥和自身免疫疾病中發揮作用[5-6]。以往檢測的SLE/LN的相關抗dsDNA、Smith抗體等都是IgG抗體，這方面的研究很多，也廣為人知，但是，最近有研究證明，針對dsDNA的自身IgE抗體在LN的發病機制中可能也發揮著重要作用，它們能加劇pDCs的干擾素反應。之前已經在一些SLE患者的研究中報道了針對dsDNA的IgE自身抗體存在[7]。

在本次研究中，LN組患兒血清總IgE水平顯著高于對照組，也提示IgE與LN的發病有一定關系。進一步將LN組分為低IgE亞組與高IgE亞組后發現，后者24小時尿蛋白定量和尿蛋白/尿肌酐水平較前者明顯升高，說明IgE與LN患兒的腎臟損傷程度有關。雖然經統計兩亞組Scr、BUN和eGFR均無統計學差異，但高IgE亞組的前兩項反映腎小球功能的指標有高于低IgE亞組的趨向，eGFR低于低IgE亞組，考慮與納入研究的樣本量偏少有關，今后加大樣本量可進一步分析。

Henault等[8]研究報告，>50%的SLE患者存在dsDNA-IgE，在活動性SLE中dsDNA-IgE濃度升高。當IgE阻斷抗體與來自dsDNA-IgE陽性患者的血清一起溫育時，外周血單核細胞的IFN-α分泌顯著減少，表明IgE自身抗體推動來自pDCs的IFN-α應答。事實上，通過使用針對dsDNA的特異性IgE單克隆抗體，他們證實了dsDNA-IgE ICs誘導pDCs產生大量IFN-α，從而揭示了之前未知的促成SLE發生的分子機制。那么，dsDNA-IgE如何介導pDCs激活和加劇自身免疫反應？有研究表明，pDCs表達高親和性受體FcεRⅠ，IgE自身抗體與dsDNA形成ICs(即dsDNA-IgE ICs)，結合pDCs上的FcεRⅠ，將dsDNA-IgE ICs遞送至吞噬溶酶體，繼而使TLR9感應、干擾素調節因子7(interferon regulatory factor 7, IRF7)和NF-κB核易位，激活pDCs，并觸發炎癥細胞因子(包括IFN-α、IL-6、IL-8和TNF)產生[8]，活化的pDCs促進共同培養的B細胞增殖，漿細胞分化，IFN-α和IL-6刺激其產生免疫球蛋白[7]。最近又有小鼠實驗結果顯示dsDNA-IgE在狼瘡樣疾病進展中有重要意義[9]。FcγRIIB -/ -小鼠有IgE缺陷，延遲了狼瘡樣疾病的發展和降低了其嚴重性。此外，從LN患者的腎活檢標本中發現IgE在腎小球和球外區域沉積，這些區域與pDCs和B細胞接近，因此推測上述體外現象在患者體內也可出現。這些證據均與本次研究分析保持一致，考慮IgE參與了疾病過程。此外，有研究報道SLE患者IgE水平相比特應性皮炎患者和正常人都升高，而且與疾病的是否活動以及嚴重程度呈正相關[8]。

綜上所述，以往自身免疫性疾病及感染性疾病，包括SLE/LN等，認識較深的多為IgG或IgM抗體，特異性IgE自身抗體的研究甚少。本研究發現，血清IgE抗體與LN患者的疾病活動度有關，而IgE濃度較高的LN患者尿蛋白定量也明顯高于IgE濃度較低的LN患者，提示IgE可能與LN的發生與發展有關，血清IgE濃度可作為一個評定LN病情的相應指標，對IgE相關機制的進一步研究可能為LN提供新的治療策略。

[1]Dema B, Charles N, Pellefigues C,etal. Immunoglobulin E plays an immunoregulatory role in lupus[J]. J Exp Med, 2014, 211(11): 2159-2168.

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[9]Dema B, Pellefigues C, Hasni S,etal. Autoreactive IgE is prevalent in systemic lupus erythematosus and is associated with increased disease activity and nephritis[J]. PLoS One, 2014, 9(2): e90424.

[專業責任編輯：吳紅艷]

ClinicalsignificanceofchangesintotalserumIgElevelinchildrenwithlupusnephritis

YU Ling, MAO Jian-hua

(DepartmentofNephrology,Children’sHospital,ZhejiangUniversitySchoolofMedicine,ZhejiangHangzhou310003,China)

ObjectiveTo investigate the clinical significance of total serum IgE level change in children with lupus nephritis (LN).MethodsThe total IgE levels in serum of children with LN and that in control group were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The 24-hour urinary protein, urine protein/creatinine, serum creatinine and blood urea nitrogen were detected, and glomerular filtration rate was then estimated.ResultsThe level of total serum IgE in LN group was significantly higher than that in the control group (t=3.889,P<0.01). The urine protein/creatinine and 24-hour urinary protein levels were significantly lower in children with low IgE level than those with high IgE level (tvalue was 2.125 and 2.233, respectively, bothP<0.05). But there was no significant difference in serum creatinine, blood urea nitrogen and glomerular filtration rate between two subgroups (tvalue was 0.808, 1.194 and 0.522, respectively, allP>0.05).ConclusionSerum IgE level may be meaningful to predicting disease activity of LN. Furthermore, regulation of IgE expression may relieve the condition of LN in the future.

lupus nephritis (LN); immunoglobulin E (IgE); children; enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

R725.7

A

1673-5293(2017)10-1208-03

2017-05-16

余 玲(1988—)，女，住院醫師，碩士研究生，主要從事兒童常見腎臟疾病的研究。

毛建華，教授 。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.10.015