鐵(Ⅱ)配合物的合成與ct-DNA作用的光譜分析

陶璐(長沙醫學院基礎醫學院,湖南 長沙 421019)

鐵(Ⅱ)配合物的合成與ct-DNA作用的光譜分析

陶璐(長沙醫學院基礎醫學院,湖南 長沙 421019)

設計合成一個鐵(Ⅱ)配合物[Fe(LA)2Br2](LA＝鵝掌楸堿)，以ct-DNA為靶點，通過紫外-可見光譜、熒光光譜和DNA粘度實驗研究了配合物與ct-DNA的鍵合方式。研究表明所合成的配合物與DNA之間存在插入作用和靜電作用。

配合物；ct-DNA；光譜分析；插入作用

鵝掌楸堿是一種典型的異喹啉類生物堿，具有顯著的抗腫瘤、抗病毒、抑菌消炎等活性。鐵元素是人生命體內必需的微量元素，尤其是二價鐵，每個血紅素都是由卟啉衍生物與鐵(Ⅱ)形成的絡合物。本文以鵝掌楸堿為配體，與鐵(Ⅱ)離子配位合成配合物[Fe(LA)2Br2](配合物晶體結構見圖1)。以ct-DNA為靶點，通過紫外-可見光譜、熒光光譜和DNA粘度實驗研究了該配合物與ct-DNA的鍵合方式，為研究此類配合物的藥理活性提供了科學依據。

圖1 配合物的晶體結構圖

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

紫外-可見光譜儀；SHIMADZU RF-5301PC熒光光譜儀；Brookfield DV-II pro數字式旋轉粘度計；數顯多功能測量儀。

鵝掌楸堿；FeBr2；乙醇；十二烷基磺酸鈉(SDS)、三羥甲基氨基甲烷(Tris)購于Sigma公司、小牛胸腺DNA(ct-DNA)購于華美生物工程公司； GelRed購于Biotium公司)；實驗用水均為二次蒸餾水。

Tris-HCl-NaCl緩 沖 液：Tris 0.005 mol/L，NaCl 0.05 mol/L，pH值以鹽酸滴定調節至7.35；

BPE 緩 沖 液 ：Na2HPO40.006 mol/L，NaH2PO40.002 mol/L，Na2EDTA0.001 mol/L，pH = 6.99 ；DNA 純 度 ：將適量的ct-DNA溶于Tris-HCl-NaCl 緩沖液中，經紫外吸收光譜測定，在260nm和280nm處的吸光度符合：A260nm/A280nm≈1.8～1.9:1，表明DNA中不含蛋白質，因此使用之前不再純化[1]。DNA儲液濃度為2×10-3mol/L；GelRed濃度：將 原 始 的0.018 mol/L的GelRed用Tris-HCl-NaCl緩 沖 液稀釋為1.8×10-3mol/L的溶液；SDS：0.02 mol/L。

1.2 實驗方法

(1) 配合物的合成實驗

稱 取LA(0.05 mmol,0.014 g)和FeBr2(0.05 mmol,0.001 g)加入到一端封閉……