羊布氏桿菌病陰道免疫法推廣

于廣秋

（遼寧省建昌縣畜牧獸醫局125300）

羊布氏桿菌病陰道免疫法推廣

于廣秋

（遼寧省建昌縣畜牧獸醫局125300）

采用陰道免疫法與常規免疫法進行免疫效果對比試驗，結果顯示，新型免疫法免疫效果明顯高于常規免疫法，且無不良反應，通過區域性推廣，產生很好的保護率，值得進一步推廣應用。

羊布氏桿菌;陰道免疫法;試驗;推廣

布氏桿菌病是人畜共患病,近年來發病率較高,疫苗免疫是控制該病的重要途徑,但由于常規免疫途徑存在免疫效果不確實等問題,特需探討一種操作簡便對人畜安全,免疫效果確實的免疫方法。2014年開始,筆者帶領技術團隊通過技術創新,研究出了安全高效的免疫方法--陰道免疫法,并用兩年時間推廣到全市,快速控制了羊群布氏桿菌病的傳播,取得很好的效果。

1 項目設計理念

傳統免疫法主要是口服和注射法,布氏桿菌病在羊體內主要侵害生殖系統,在生殖道容易定植,因此,嘗試陰道免疫法對母羊進行免疫,并與其他常規免疫法作對照,評價免疫效果和安全性。

2 試驗方法

選擇未做過布病免疫的羊群,要求試驗羊健康,飼養環境一致。首先對所有羊采血編號,用平板凝集試驗檢測布病血凝試驗均為陰性者方可作為試驗羊。將羊群分成A、B兩群,每群均有不同產期的孕羊,A群為常規劑量免疫群、B群為高劑量免疫群,將每群各分5組,分別采用公羊頸部肌肉注射法、母羊口腔噴注法、陰道噴注法、全群拌料法、全群飲水免疫法。A群各組采用的劑量是常規量。B組采用的劑量是A組的倍量。抓羊時盡量采用擋板圍靠法,動作要輕,防止機械性流產。免疫后正常飼喂,注意觀察,有過敏者立即注射腎上腺素,有流產跡象時注射黃體酮。免疫后7d和14d、 21d、 60d、 90d、 180d進行采血,做平板凝集試驗,評價體液免疫效果。

3 所用材料

3.1 布氏桿菌活疫苗（S2株）

中牧實業股份有限公司蘭州生物藥廠生產,生產批號：1401003；有效期：2015.1；以羊口服劑量規格80頭份/瓶,每瓶含活菌不少于80×100cfu。

3.2 消毒藥

百盛30,北京中農奧美生物制藥有限公司生產。

3.3 陰道免疫專用噴注器

自行研制。

3.4 平板凝集試驗診斷液

虎紅平板凝集試驗抗原,檢測方法按照GB/T18646-2002進行。

3.5 基礎設備

防護服、手套、口罩、鞋套

4 篩選試驗羊

選定養羊戶10戶,存欄羊569只,全部采血做平板凝集試驗,全陰性戶作為免疫試驗。

5 試驗結果

5.1 對比試驗

結果見附表。

5.2 結果顯示

免疫后7d,注射法和陰道噴注法陽轉率分別為90%和80%,倍量注射法的比例更高達95.8%,但注苗后的反應較大,口腔噴注、飲水、拌料法都沒有產生抗體。21d后注射法和陰道噴注法陽轉率達到近90%,口腔噴注和拌料法達到60%,倍量口腔噴注法和飲水法達到50%,說明注射法和陰道噴注法產生抗體快,陽轉率高,抗體水平高,倍量注射法雖然陽轉率高達100%,但是疫苗反應較重,沒有推廣意義,口服法不論哪個途徑陽轉率出現的較晚,抗體水平低,3周后達到50～60%,各種口服方法基本上相近。

5.3 小尾寒羊試驗

疫苗說明書上說明注射法不能應用于小尾寒羊,但沒有理由說明為什么不能,筆者特意選擇一批小尾寒羊,公羊8只采用1/2量注射法,母羊213只采用1/2量陰道噴注法,做苗后無任何異常反應,未出現流產現象。21d后采血做抗體檢測,公羊陽轉率100%,母羊陽轉率80%。

5.4 孕羊注射法安全性試驗

推廣過程中部分防疫員應用注射法給妊娠中后期母羊注射,導致流產率100%。

5.5 抗體滴度試驗

通過省動物疫病預防控制中心配合繼續做試管凝集試驗和環境散菌檢測試驗,試驗結果表明,陰道免疫法的抗體水平比口服法明顯高。

6 結果分析與討論

6.1 試驗結論

試驗結果說明,母羊自然感染條件下,對陰道黏膜更敏感,而且疫苗免疫最佳途徑就是接近自然感染的途徑,因此,對孕羊最佳的免疫途徑是陰道噴注法。公羊和空懷母羊或小羊可以采取注射法。效果確實無不良反應。飲水法和拌料法都能產生一定的抗體,但陽轉率不高,且公羊明顯高于母羊,說明搶料和水要多些,有劑量不均的因素。口腔噴注法劑量雖準但陽轉率不高,說明疫苗菌株進入消化道后受消化道溶菌酶或胃酸等屏障的殺滅較多,產生抗體變少,免疫效果不理想,陰道噴注法和口腔噴注法操作方法和速度近似,幾秒內就能完成操作,方便高效,建議普遍采納母羊陰道噴注法。

附表 不同免疫法免疫效果對比試驗結果（單位：只、%）

6.2 小尾寒羊和其他羊免疫無差異

小尾寒羊應用公羊注射,母羊陰道免疫法效果顯著,無不良反應,不要受疫苗說明書限制。

6.3 陰道免疫法需按專用器具和規程方可靠

陰道免疫法應用我們開發的專用免疫器具（已獲專利）和特有的操作規程方可安全有效。

參與試驗人員：鄭文金、林懷明、盛曉輝、張國成、羅洪明、韓維群、馬成立、安麗華。

于廣秋（1963-），男，漢族，大學本科，高級獸醫師，主要從事動物疫病防制工作。