鳳陽大骨雞消化道內容物脂肪酶活性試驗

陳會良 （安徽科技學院動物科學學院 233100）

鳳陽大骨雞消化道內容物脂肪酶活性試驗

陳會良 （安徽科技學院動物科學學院 233100）

采用脂肪酶比濁法測定消化道不同部位內容物中脂肪酶活性，為進一步研究鳳陽大骨雞腸道消化酶特性和生產中添加外源性消化酶提供參考。結果表明：鳳陽大骨雞消化道不同部位內容物脂肪酶活性分布存在差異顯著性。

鳳陽大骨雞；消化道；內容物；脂肪酶

脂肪是動物機體重要的供能、貯能物質，提供必需脂肪酸，具有調節機體代謝等營養生理作用，是動物必需的營養物質。脂肪酶 （LPS）廣泛存在于動植物和微生物中的一種酶，在脂質代謝中發揮重要作用[1]。脂肪酶是脂肪消化利用最基本的酶，能將脂肪水解成為游離脂肪酸、甘油和甘油單酯，以供動物吸收利用[2]。消化道發育程度決定了動物的生長速度，消化道發育主要表現在消化器官組織形態上的變化和消化生理功能上的成熟。消化功能的發育很大程度上是通過增加胰腺、肝臟及腸黏膜合成或分泌的消化液量、酶活性來實現。其中，胰液中含有降解主要營養物質的各種酶類，如胰淀粉酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、彈性蛋白酶、胰脂肪酶和輔脂酶，具有動物消化飼料最主要、消化力最強的酶系，其活性高低與動物的消化機能直接相關；胰液酶系的活力強弱被認為是衡量機體營養物質消化能力的較佳指標，也是動物營養學許多試驗研究的主要酶類[3]。本試驗測定鳳陽大骨雞消化道不同部位內容物脂肪酶的含量，為進一步了解鳳陽大骨雞對飼料不同成分的消化能力，日糧配制和適宜養殖條件的確立提供理論基礎，同時為合理開發利用地方雞種資源提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

2012年12月10日，從鳳陽某養殖場選購體質量1.5～3.0kg，公雞和母雞各5只用于試驗。首先將試驗雞頸靜脈放血，然后分別采集十二指腸、空腸、回腸、盲腸和直腸內容物。分別稱取被檢測腸段內容物1.0g，每一腸段不同部位重復取3次，以1∶9氯化鈉注射液稀釋，置勻漿機勻漿3～5min，勻漿液置于離心機，3000r/min離心10min，取上清液待測。

1.2 試驗儀器

電子分析天平 （FA1004，上海精科儀器廠）；勻漿機(DY89-1，寧波新芝科器研究所)；離心機 （TGL-16C，上海安亭科學儀器廠）；紫外分光光度計 （UVmini-1240，日本島津）。

1.3 試驗方法

1.3.1 脂肪酶比濁法

三酰甘油與水制成的乳膠液，因其膠束對入射光的吸收及散射而具有乳濁性狀。膠束中的三酰甘油在脂肪酶作用下水解，使膠束分裂，濁度或光散射因而減低，減低的速率與脂肪酶活力有關[4]。

1.3.2 試劑

橄欖油乙醇液；Tris-HCL緩沖液 （pH8.8）；0.17μmol/L橄欖油乳劑。單位定義：100ml血清，在37℃水浴中，作用于底物10min，能水解1μmol底物者為1個脂肪酶活力單位。

附表 消化道不同部位內容物脂肪酶活性 u/g

1.3.3 數據統計分析

試驗數據采用Excel軟件整理，采用SPSS17.0軟件進行分析，結果用 “平均數±標準差”表示。

2 結果

由附表可以看出，消化道不同部位內容物脂肪酶活性以空腸活性最高，其次是回腸、十二指腸、盲腸、直腸最低。空腸和直腸、盲腸比較差異極顯著 （p＜0.01）， 與十二指腸比較差異顯著 （p＜0.05），與回腸比較差異不顯著 （p＞0.05）。

3 討論

動物消化器官所分泌的消化酶主要有：胃蛋白酶、淀粉酶、彈性蛋白酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶A和B、脂肪酶、二肽酶、氨基肽酶、葡萄糖淀粉酶、雙糖酶和核酸酶等。胰腺合成的各種消化酶只有分泌到畜禽消化道內，并以激活狀態存在才對畜禽飼料成分消化具有實際意義。因此，以消化道內酶活水平為參比，才能夠真正反映出畜禽消化道酶活的真實含量情況。已有研究發現，食糜在空腸內的停留時間遠遠大于十二指腸，與測定胰腺和整段小腸內的酶活水平相比，利用空腸內消化酶活水平來研究雞消化道酶活發育情況更為合理[5]。動物體內存在多種脂肪酶，它們參與脂肪消化、吸收、利用的全過程。由于飼料中的酯類 (以甘油三酯為例)必須先被脂肪酶水解為甘油二酯、甘油一酯和脂肪酸才能被機體吸收，因此，如何提高飼料中酯類的消化吸收率成為當前營養學研究的現實問題[6]。消化道pH環境是保證消化酶完成正常催化反應和消化道有益微生物繁殖的一個重要因素，尤其是胃和小腸的pH對飼料養分消化吸收的影響更為重要。家禽嗉囊不具有消化能力，主要起貯存、濕潤、浸泡和軟化飼料的作用，從而有利于飼料營養成分在胃及后段消化道內進一步消化。嗉囊弱酸性環境主要是通過嗉囊內微生物發酵產生的酸性物質和由胃內容物逆流入嗉囊來維持其平衡，比較易受日糧組成的影響[7]。所以，腸道不同部位對脂肪的消化吸收能力也不均衡，繼而各段腸道內容物脂肪酶活性也相差較大。此次試驗也證實了這一觀點。

在脂肪酶的作用下，飼料中的脂肪被水解成甘油二酯、甘油一酯和脂肪酸。甘油一酯和脂肪酸與膽汁酸等兩性物質形成混合微團再被吸收，甘油二酯在十二指腸中進一步被水解為甘油一酯被吸收。因此，如何充分利用各種脂肪酶的特性，充分利用體內脂肪酶，使飼料或乳汁中的脂肪能夠更快、更好的消化吸收是養殖業面臨的一個新問題。在現代畜牧業生產中，為提高生產效率，過早地將幼畜斷奶，讓其采食固體飼料，這時幼畜會面臨很多的問題，如胰臟和肝臟功能發育不成熟導致胰脂肪酶和膽鹽水平較低，而十二指腸前脂肪酶也不能有效水解飼料中的脂類物質，導致幼畜不能有效地利用飼料中的脂肪，致使幼畜脂肪酸、能量攝入不足或引起脂肪性腹瀉。為避免以上問題的發生，在養殖過程中通常采取添加外源性胰脂肪酶樣物質來彌補幼齡動物脂肪酶的不足，有效提高飼料中脂肪的消化吸收率。

4 結論

小腸是飼料中營養物質消化吸收的主要場所。本次試驗表明，空腸脂肪酶活性高于回腸，回腸活性高于十二指腸，消化道脂肪酶活性的高低順序為：空腸＞回腸＞十二指腸＞盲腸＞直腸。空腸和直腸、盲腸比較差異極顯著 （p＜0.01），和十二指腸比較差異顯著 （p＜0.05），和回腸比較差異不顯著（p＞0.05）。脂肪酶在小腸各段具有明顯的區域性特征，空腸脂肪酶活性最高，是營養物質消化吸收的主要場所。

[1]王海燕,李富偉,高秀華.脂肪酶的研究進展及其在飼料中的應用[J].飼料工業,2007,28(6)14-15.

[2]沈建明,周學光,劉寬,等.不同來源脂肪酶對斷奶仔豬生產性能的影響[J].養豬,2011(5)：13-14.

[3]王恬,蔣正宇,周巖民,等.飼料外源酶與動物內源酶的互作效應及機制研究[J].新飼料,2006(12)：5-6.

[4]中華人民共和國衛生部醫政司.全國臨床檢驗操作規程[M].南京：東南大學出版社,2006：433-434.

[5]王娟,臧素敏,元娜,等.太行雞生長期消化道pH及主要消化酶變化規律的研究[J].中國家禽,20l0,32(1)：16-19.

[6]楊漢博,王峰.動物消化道脂肪酶研究概述[J].飼料廣角,2009,(5)：33-34.

[7]張鐵鷹,汪儆,李永清.0～49日齡肉仔雞消化參數的變化規律研究[J].中國畜牧獸醫,2005,32(1)：6.