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高效液相色譜法測定蘆丁含量

2017-09-30 17:45:46翟崇華
食品界 2017年9期
關鍵詞:標準檢測

材料與方法

儀器

(1)日本島津LC-20AT高效液相色譜儀(帶紫外檢測器)。

(2)AS-A型系列超聲波清洗器(天津奧特賽恩斯化器有限公司)。

(3)超純水機(臺灣艾柯儀器公司)。

試劑

(1)甲醇(色譜純)。

(2)甲醇(分析純)。

(3)磷酸(優級純)。

(4)蘆丁(中藥化學對照品),四川省維克奇生物科技有限公司生產。

色譜條件

色譜柱:C18(4.6x250mm,5um)不銹鋼柱,流動相:甲醇:0.5%磷酸水溶液=85:15,流速1.0ml/min,柱壓20Mpa,柱溫40℃,檢測波長390nm,進樣體積10ul,采集時間10min。

檢測部分

標準溶液配制。直接用分析純甲醇溶解20mg純度為98%的蘆丁中藥化學對照品,轉移定容于10ml容量瓶中,此標液濃度為1.96mg/ml。用移液管分別吸取此標準溶液0.20ml、0.40ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml于10ml容量瓶中,用分析純甲醇定容至10ml,配制成濃度分別為0.0392mg/ml、0.0784mg/ml、0.196mg、ml、0.392mg/ml、0.588mg/ml五個級別的標準使用液,經0.45um有機濾膜過濾后上機檢測,繪制標準曲線。

樣品測定。精確稱取0.01—0.09克蘆丁提取物于50ml比色管中,用20ml分析純甲醇溶解,放置于超聲波清洗器中超聲提取20分鐘,然后用分析純甲醇定容至50ml,靜置,取上清液經0.45um有機濾膜過濾后上機檢測,與標準曲線比較定量。待測樣液蘆丁濃度應在標準曲線線性范圍內,超出線性范圍則應稀釋后再進樣分析。

結果計算

計算公式:X=

式中:

X—試樣中蘆丁的含量,單位為克每百克(g/100g);

C—由標準曲線得到的試樣中蘆丁的濃度,單位為毫克每克(mg/g);

V—試樣溶液的體積,單位為毫升(ml);

m—試樣質量,單位為克(g)。

結果與討論

(1)稱取樣品應根據蘆丁提取物的蘆丁含量來計算取樣量,確保試液中蘆丁濃度保持在標準曲線線性范圍內,若檢測后超出線性范圍則應稀釋后再進樣分析。

(2)稱取樣品后放置于超聲波清洗器中,超聲處理時間應根據溶解程度來確定,全部溶解就行了,若有難以溶解的雜質可適當延長超聲處理時間。

(3)精密度實驗:取2份樣品,在相同條件下平行測定6次,測得RSD,結果見表1。

(4)用該方法進行高低2個濃度的加標回收實驗,結果見表2.

以上文章內容針對蘆丁防治高血壓病的輔助治療和作用,做出了詳細分析說明,著重在檢測標準溶液配制方面進行了實例示范。結論確保試液中蘆丁濃度保持在標準曲線線性范圍。可供本專業人士參考。

作者簡介:

翟崇華(1967-),女,工學士,高級工程師,主要從事食品檢驗工作。

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