副溶血弧菌對于常見養殖魚類的影響

魏盟智++郝晨光++趙子晨

一氧化氮是一種廣泛分布在生物體內各處的信息分子。生物體內的每種信號分子，都有著自己明確的分工與任務，以此保證生物生命活動有序進行。一氧化氮就充當了生物的信使、效應分子和免疫調節分子，發別在生物的信息處理、應對與免疫系統上發揮著作用，其中最重要，也最顯著的方面就是免疫調節功能。一氧化氮是一種化學物質，能通過其非特異性殺死細菌、病毒等對生物健康有害的物質，促進生物機體的非特異性免疫功能；同時，一氧化氮也因它信號分子的身份控制生物機體的特異性免疫。經研究表明，一氧化氮在許多病理狀態下，可以充當調節許多免疫活性的介質，影響機體免疫功能。

一氧化氮的合成是由一氧化氮合酶催化。一氧化氮合酶催化L-精氨酸，在生物體內合成一氧化氮，可以改變機體的免疫能力。本文為研究副溶血弧菌感染常見養殖魚類石斑魚后體內一氧化氮合酶的變化情況，為今后人類合理使用副溶血弧菌提供數據。

材料與方法

材料。

（1）藥品

副溶血弧菌，一氧化氮合酶測定試劑。

（2）實驗魚

取自同一水域，相同體長，相同體重，且無疾病的石斑魚。

實驗方法。

（1）設計方案

將石斑魚都放在相同水位的培養桶里，分別注射濃度為6×10∧6cfu/ml、6×10∧7cfu/ml、6×10∧8cfu/ml的副溶血弧菌懸液，向對照組注射相同量的生理鹽水，每組設置三個平行對照組。注射方法為腹腔注射，在注射后24h、48h、72h、120h用0.1ml一次性注射器采血，所取血液放于4℃恒溫冰箱里一夜后，利用轉速離心法以4000r/min離心5分鐘，后儲存于-20℃恒溫冰箱里待測。

（2）檢驗方法

化學比濁法。利用試劑根據吸光值計算一氧化氮合酶活性。

（3）分析數據

利用方差比較各組之間的數據差異，找出規律，得出結論。

結果分析

注射副溶血弧菌后石斑魚血清中，一氧化氮合酶的活性顯著升高，而且隨副溶血弧菌的濃度升高，一氧化氮合酶活性也越高，在注射副溶血弧菌24h后達到峰值，后來，隨著時間的延長，一氧化氮合酶的活性逐漸減小。同時注射生理鹽水也會引起一氧化氮合酶的活性變化，也是24h、48h的值大于72h和120h，統計結果表明，只有24h的結果與其他時間有差異。

討論

一氧化氮合酶能催化L-精氨酸，在生物體內生成一氧化氮。一氧化氮合酶有三種同工酶亞型：神經元型一氧化氮合酶；內皮細胞型一氧化氮合酶和誘導形一氧化氮合酶，它們廣泛分布在生物神經和內皮上，活性依賴鈣離子，當鈣離子濃度升高時，誘導型一氧化氮合酶被活化催化合成少量一氧化氮。誘導型一氧化氮合酶在炎癥和免疫刺激下可以表達。）研究表明，一氧化氮可以抑制和殺傷病毒、細菌，在生物免疫中起著重要的作用。某些研究表明，誘導型一氧化氮合酶在虹鱒細菌攻毒后可進行表達。本次試驗結果表明，注射副溶血弧菌后，石斑魚體內一氧化氮合酶的活性顯著升高，并且，濃度越高的活性越強。說明，副溶血弧菌刺激了石斑魚體內的免疫系統，也刺激了一氧化氮合酶，產生了一氧化氮，提高了機體免疫力，是生物機體對于外來異物的一種免疫應答反應。

通過對常見養殖魚類一氧化氮合酶免疫功能的研究，我們知道一定濃度、配上一定時間的副溶血弧菌會提高生物體一氧化氮合酶的活性，從而提高機體免疫力。利用這一特性人類可以進行人為調節一氧化氮在常見養殖魚類體內的含量，可以增強魚類的免疫力，保證魚類的健康，減少養殖魚類對抗菌藥物的使用，提高魚類的質量與數量，為今后的魚類養殖提供了新技術。如今許多水產品的質量低下，使用了過量的化學藥物和抗生素，對人類健康、生態系統的穩定都產生了極大的影響，利用副溶血弧菌提高魚類免疫力，增強魚類的抗病能力，對魚類養殖很有益處。

作者簡介：

魏盟智（1994-），男，河北辛集人，河北農業大學渤海校區，學生，水產養殖學；郝晨光（1995-），男，河北唐山人，河北農業大學渤海校區，學生，水產養殖學；趙子晨（1996-），男，河北石家莊人，河北農業大學渤海校區，學生，水產養殖學。