苦杏仁配方顆粒制備工藝和質(zhì)量標準研究

韓銳

摘 要：本實驗對苦杏仁配方顆粒制備工藝和質(zhì)量標準進行研究。最佳工藝為將苦杏仁濃縮膏相對密度為1.08（60攝氏度測）加熱至60攝氏度，流速為每分鐘70毫升，進風溫度105～115攝氏度，出風溫度60～70攝氏度。按最佳工藝制備三批樣品，其成品收率高于原有工藝5%。該工藝連續(xù)生產(chǎn)的穩(wěn)定性好，能夠滿足工業(yè)大生產(chǎn)的要求。

關(guān)鍵詞：苦杏仁配方顆粒；工藝；質(zhì)量標準

苦杏仁為薔薇科植物山杏（苦杏）Prunus armeniaca L. var. ansu Maxim.、苦杏仁西伯利亞杏（山杏）Prunus sibirica L.、東北杏Prunus mandshurica （Maxim.） Koehne或杏Prunus armeniaca L.的干燥成熟種子。苦杏仁有小毒，歸肺、大腸經(jīng)。苦杏仁是個常用的止咳平喘藥，其本身苦，所以它長于苦降肺氣，用于咳喘，不管寒熱虛實，也不分外感內(nèi)傷，廣泛配伍使用。《藥性論》記載：“治腹痹不通，發(fā)汗，主溫病。治心下急滿痛，除心腹煩悶，療肺氣咳嗽，上氣喘促。入天門冬煎，潤心肺。可和酪作湯，益潤聲氣。宿即動冷氣。”苦杏仁具抗動脈粥樣硬化、抗腎間質(zhì)纖維化、抗肺纖維化、抗高氧誘導(dǎo)肺損傷、抗腫瘤、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤等藥理作用[1-4]。本實驗對苦杏仁配方顆粒制備工藝和質(zhì)量標準進行研究。

1 儀器與試藥

Dura 12/24超純水系統(tǒng)（上海和泰儀器有限公司）；HH-601超級恒溫水浴（江蘇金壇市億通電子有限公司）；SYH實驗室專用小型三維混合機（常州市永昌制粒干燥設(shè)備有限公司）；PTX-FA110萬分之一天平（上海鑫倉電子科技有限公司）；一步制粒機（江陰市江中設(shè)備制造有限公司）；屹譜儀器U-1810準雙光束紫外可見分光光度計（屹譜儀器制造（上海）有限公司）；SCQ-7201E雙頻加熱型超聲波清洗機（上海聲彥超聲波儀器有限公司）；S49-1旋振篩（新鄉(xiāng)市鑫達振動設(shè)備有限公司）；LC3000高效液相色譜儀（山東滕州市滕海分析儀器有限公司）。苦杏仁苷對照品（中國藥品生物制品檢定所提供）。乙腈（南京維之誠化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（南京維之誠化學(xué)試劑有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 苦杏仁提取膏的制備

取苦杏仁，精密稱定，加水煎煮二次，第一次加12倍水煎煮1小時，第二次加10倍水煎煮1小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至適量。

2.2 進料溫度考察

一步制粒通常會采用加熱提取膏來降低提取膏的粘性并縮短制粒時間。取三份苦杏仁濃縮膏，分別將苦杏仁濃縮膏加熱至40攝氏度、50攝氏度、60攝氏度后進行制粒。采用40攝氏度苦杏仁濃縮膏制粒，濃縮膏粘度明顯減低，收率為63%，制粒時間為71分鐘；采用50攝氏度苦杏仁濃縮膏制粒，濃縮膏粘度明顯減低，收率為75%，制粒時間為65分鐘；采用60攝氏度苦杏仁濃縮膏制粒，濃縮膏粘度明顯減低，收率為77%，制粒時間為60分鐘。實驗結(jié)果表明，三種溫度下提取膏粘度都明顯降低，采用60攝氏度濃縮膏制粒效果最好，所以選擇60攝氏度濃縮膏制粒。

2.3 浸膏相對密度篩選

分別將苦杏仁濃縮膏濃縮至相對密度為1.06（60攝氏度測）、1.08（60攝氏度測）、1.10（60攝氏度測）、1.12（60攝氏度測），進行制粒。苦杏仁濃縮膏相對密度為1.06（60攝氏度測）時，噴霧效果較好，小顆粒多，收率為73%；苦杏仁濃縮膏相對密度為1.08（60攝氏度測）時，噴霧效果較好，顆粒均一，收率為80%；苦杏仁濃縮膏相對密度為1.10（60攝氏度測）時，噴霧效果較好，顆粒均一，收率為81%；苦杏仁濃縮膏相對密度為1.10（60攝氏度測）時，噴霧效果較好，大顆粒較多，收率為79%。實驗結(jié)果表明苦杏仁濃縮膏相對密度為1.08（60攝氏度測）和1.10（60攝氏度測）時效果相當，所以選擇苦杏仁濃縮膏相對密度為1.08（60攝氏度測）。

2.4 進料速度篩選

取板蘭根回收膏相對密度為1.08（60攝氏度測）加熱至60攝氏度，分別采用每分鐘40毫升、每分鐘50毫升、每分鐘60毫升、每分鐘70毫升的噴霧速度進行制粒。實驗結(jié)果表明流速為每分鐘70毫升時效果最好。

2.5 最佳工藝

最佳工藝為將苦杏仁濃縮膏相對密度為1.08（60攝氏度測）加熱至60攝氏度，流速為每分鐘70毫升，進風溫度105～115攝氏度，出風溫度60～70攝氏度。

3 質(zhì)量標準研究

3.1 色譜條件

依據(jù)查閱文獻及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5]。色譜柱為迪馬C18鉆石色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）；甲醇-水（25∶75）為流動相；檢測波長為210nm；流速1.0mL·min-1。

3.2 對照品溶液的制備

精密稱取苦杏仁苷對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含100μg的溶液，即得。

3.3 供試品溶液的制備

取供試品適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相10mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理5分鐘，放冷，精密稱定，用流動相補足重量，濾過。取續(xù)濾液，即得。

3.4 精密度試驗

精密稱取苦杏仁苷對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為100μg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.83%，表明本方法精密度良好。

3.5 重現(xiàn)性試驗

稱取同一批的樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量并計算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.71%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

3.6 準確度試驗

精密稱取已知含量的樣品9份，分別精密加入苦杏仁苷對照品，按項下方法制備成120%、140%、160%。取模擬樣品照試驗方法試驗，計算回收率為99.1%，RSD為0.96%。

4 工藝驗證

按最佳工藝制備三批樣品，其成品收率高于原有工藝5%。三批樣品均符合標準。該工藝連續(xù)生產(chǎn)的穩(wěn)定性好，能夠滿足工業(yè)大生產(chǎn)的要求。

參考文獻

[1]連彥軍，許天文，鄭勇，柯茂林，李治，黃韜，陳道達.抗CEA單抗-β-葡萄糖苷酶偶聯(lián)物/苦杏仁甙前藥系統(tǒng)對裸鼠結(jié)直腸癌移植瘤的療效觀察[J].華中醫(yī)學(xué)雜志，2005（01）.

[2]連彥軍，陳道達，黃韜，柯茂林，許天文，鄭勇斌.β-葡萄糖苷酶激活苦杏仁苷誘導(dǎo)LoVo細胞凋亡及活性對Bax與bcl-2基因表達和Caspase-3的影響[J].腫瘤防治雜志，2005（06）.

[3]甘露.大鼠pEGFP-N1-BKβ1真核表達載體的構(gòu)建及苦杏仁苷對支氣管平滑肌細胞增殖的研究[D].華中科技大學(xué)，2007.

[4]祝華平，常立文，李文斌，劉漢楚，容志惠.苦杏仁甙對高氧暴露早產(chǎn)鼠肺泡Ⅱ型細胞表面活性物質(zhì)蛋白A、B、C mRNA表達的影響[J].中華圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)雜志，2004（04）.

[5]李海龍，王靜，張英春，金鴻道，劉術(shù)明，郝東海.HPLC-ELSD法測定苦杏仁中苦杏仁苷的含量[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2007（01）.