高效液相色譜法測定茵梔黃口服液中黃芩苷的含量

劉芳

431000湖南省常德市食品藥品檢驗所

高效液相色譜法測定茵梔黃口服液中黃芩苷的含量

劉芳

431000湖南省常德市食品藥品檢驗所

目的：探討茵梔黃口服液主要有效成分黃芩苷含量測定方法。方法：采用高效液相色譜(HPLC)法，以甲醇-水-磷酸為流動相，測對照品的精密度。結果：樣品平均加樣回收率99.1%，濃度13.8～14.3 μg/mL范圍內有良好的線性關系。精密度、穩定性及回收率均良好。結論：HPLC法簡便、快速、準確、重復性好、專屬性強，可作為茵梔黃口服液中黃芩苷的含量測定方法，以控制該制劑的質量。

茵梔黃口服液；含量；高效液相色譜法；黃芩苷

茵梔黃口服液主要藥物成分包括金銀花、梔子、黃芩苷、茵陳等，具有清熱、解毒、利濕、退黃等功效，主要用于治療各類型肝炎，尤其是對甲型、乙型病毒性肝炎、慢性乙型肝炎等療效獨特[1，2]。茵梔黃口服液有效成分主要是黃芩苷[3]，測定茵梔黃口服液中黃芩苷含量是評估藥效的重要指標。為加強本品的質量控制及監督效果，本研究采用HPLC法測定茵梔黃口服液中黃芩苷含量，操作簡便、測量準確、重復率高。

資料與方法

儀器：Agilent 1100高效液相色譜儀。試劑：本試驗所用甲醇為色譜純，試驗用水為二次蒸餾水，其余試劑均為分析純。茵梔黃口服液由山東魯南制藥股份有限公司提供，黃芩苷對照品購于中國藥品生物制品檢定所。色譜條件選擇：①色譜柱：Hypersil OSD-2C18柱(150 nm×4.6 nm，5 μm)；②流動相：甲醇:水:磷酸=47:53:0.2；③檢測波長：280 nm；④分離度：R＞1.5，經過黃芩苷峰計算，理論塔板數應＞2 500。

對照品溶液的制備：精密稱取黃芩苷對照品10 mg，置于50 mL量瓶中，加50%的甲醇適量，震蕩加熱溶解后于室溫下冷卻并以50%甲醇定容，得200 μg/mL黃芩苷對照品貯備液。精密量取該貯備液5 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇定容，得100 μg/mL黃芩苷對照品溶液。

供試品溶液的制備：將茵梔黃口服液1 mL轉移至100 mL量瓶中，加入50%的甲醇稀釋，定容至刻度，制得上樣溶液。取續濾液用0.45 μm的微孔膜過濾，濾液作為供試品溶液。精密量取茵梔黃口服液1 mL，置100 mL棕色量瓶中，加甲醇定容。吸取適量上樣溶液注入小玻璃管中，將清洗干凈的聚砜中空纖維彎成U型，置于小玻璃管中，于4×103r/min離心15 min，即得供試品溶液。

精密度試驗：吸取同種濃度的對照品溶液(10 μL)，重復進樣5次，依法測定，記錄峰面積。測得其含量分別為414.18 μg/mL、414.22 μg/mL、 414.17 μg/mL、 414.23 μg/mL、414.20 μg/mL。其相對標準偏差RSD=0.83%(n=5)，證明該方法測定黃芩苷的精密度良好。

樣品含量測定：制備方法與供試品溶液制備相同。制備完畢，對2個不同批號的樣品進行依次測定，測得含量分別為382.74 μg/mL、382.20 μg/mL。見表1～2。

結 果

對于茵梔黃口服液采用以甲醇-水-磷(47:53:0.2)作為流動相，采用HPLC法測定黃芩苷成分具有良好的線性，精密度高、穩定性好、回收率高。

討 論

茵梔黃口服液是采用茵陳、梔子、黃芩制備而成，具有清熱利濕、涼血解毒、利膽退黃、瀉火除煩和止血安胎功效[4，5]。其主要成分為黃芩苷，可治療肺熱咳嗽、濕熱瀉痢、熱淋黃疸、目赤腫痛等癥[6]。現代藥理表明，黃芩苷具有良好的生物活性，具有抗病毒作用，能夠增強機體免疫力，還能發揮解熱鎮靜、降壓、降脂、保肝利膽等作用[7-9]。

茵梔黃口服液中主要有效成分為黃芩苷，采用HPLC法提取并測定黃芩苷含量，是茵梔黃口服液質量控制的指標。目前，常使用薄層掃描法、雙波長分光光度法和HPLC法等方法測定藥材中黃芩苷含量。但是，茵梔黃口服液屬于復方制劑，成分復雜，測定其中黃芩苷含量時會受到較多物質成分的干擾，常規的測定方法精確性不足。因此，本研究運用HPLC法測定茵梔黃口服液中黃芩苷含量，能夠排除其他成分的干擾，并且具有操作簡便、測定結果精密度高的優點[10]。

表1 組分含量(名稱：峰2)

表2 組分含量(名稱：黃芩苷)

[1]趙長普,黨中勤,李鮮.茵梔黃口服液治療急性黃疸型肝炎的療效觀察[J].西部醫學,2010,22(8):1497-1498.

[2]中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:化學工業出版社,2010.

[3]蔣范任,蔡洪鯤,夏用恢,等.高效液相色譜法同時測定芩連片中巴馬汀、小檗堿、黃芩苷、連翹苷的含量[J].中南藥學,2015,13(12):1296-1299.

[4]江玲興,汪祖光,陳驕華.高效液相色譜法測定茵梔黃注射液中黃芩苷和梔子苷的含量[J].中國醫院藥學雜志,2013,33(10):829-830.

[5]鄭海峰,王英妹,武鐵軍,等.黃芩苷體外對人肺腺癌A549細胞增殖的影響[J].中華實驗外科雜志,2012,29(8):1491-1493.

[6]葉其旺.高效液相色譜法同時測定茵梔黃顆粒中4種成分[J].新中醫,2015,47(9):206-208.

[7]朱芹,黃湘杰.HPLC法同時測定三黃散中黃芩苷和鹽酸小檗堿的含量[J].中國藥師,2014,17(8):1432-1434.

[8]黃志軍.黃芩苷藥理作用研究進展[J].天津藥學,2012,24(3):61-64.

[9]王孟華,曲瑋,梁敬鈺.黃芩的研究進展[J].海峽藥學,2016,25(9):7-11.

[10]劉阿靜,齊廣才,劉珍葉,等.HPLC測定利咽解毒顆粒中黃芩苷和大黃素含量[J].中國實驗方劑學雜志,2016,19(4):146-149.

湖北三部門聯手規范醫保監管

近日，湖北省人社廳、民政廳、衛生計生委就加強和規范醫保監管工作聯合發出通知，要求該省各地從加強對醫保資金、醫療服務行為監管入手，加強和規范醫保監督管理工作，完善各項管理制度和措施，建立多部門對定點醫療機構的聯動監管模式，切實解決弄虛作假、采取不正當手段套取醫保資金等問題。

(據www.news.cn)

Determination of Baicalin in Yinzhihuang oral liquid by HPLC

Liu Fang
Changde Institute of Food and Drug Control,Hunan Province 431000

Objective:To explore the method for the determination of baicalin in Yinzhihuang oral liquid.Methods:Precision of the reference product was used by HPLC with methanol water phosphoric acid as mobile phase,to measure the precision of the reference.Results:The average recovery rate of samples was 99.1%,and there was a good linear relationship in the range of 13.8 to 14.3 g/mL.The precision,stability and recovery are good.Conclusion:This method is simple,rapidly,accurately,and it also has reproducible and specific,so it can be used as the determination method of baicalin content in Yinzhihuang oral liquid,in order to control the quality of the preparation.

Yinzhihuang oral liquid;Content;High performance liquid chromatography;Baicalin

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.23.8