革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道炎性反應分泌物中的應用對比探討

范源源

（阜新市婦幼保健計劃生育服務中心，遼寧 阜新 123000）

革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道炎性反應分泌物中的應用對比探討

范源源

（阜新市婦幼保健計劃生育服務中心，遼寧 阜新 123000）

目的對比革蘭染色法與生理鹽水法在婦女陰道分泌物中陽性檢出率。方法隨機納入2015年8月至2015年12月期間，在我院婦科門診行陰道分泌物檢查的328例患者為研究對象，陰道分泌物標本均采用革蘭染色法與生理鹽水法進行檢測，觀察比較兩種檢測方法的檢測結果。結果革蘭染色法檢驗的總陽性率為81.40%，其中檢出毛滴蟲63例，念珠菌91例，線索細胞69例，淋球菌27例。生理鹽水法檢驗的總陽性率為55.18%，其中檢出滴蟲68例，念珠菌54例，線索細胞36例，淋球菌11例；兩組比較差異有統計學意義（P＜0.05）。結論在婦女陰道分泌物標本炎性反應檢查中革蘭染色法的檢出率顯著高于生理鹽水法，但在毛滴蟲感染檢出率上革蘭染色法略遜于生理鹽水法。所以采取革蘭染色法檢查為主，特殊情況是輔以生理鹽水法重新檢測標本為目前臨床中最全面、可靠的檢驗方法。

陰道炎性反應分泌物；革蘭染色法；生理鹽水法

陰道炎癥是婦女的一種常見病，多數為慢性炎癥，極大影響婦女的日常生活質量，或引起不孕等相關并發癥。目前，主要的炎癥檢查方法為提取陰道分泌物，然后進行革蘭染色法或生理鹽水法，觀察分泌物中是否有細菌、真菌等病原體感染。目前對兩組方法的檢測率多位專家學者持不同意見[1-2]。本文對328例陰道分泌物標本同時進行革蘭染色法與生理鹽水法檢測，全面客觀的記錄分析所得實驗結果，為臨床檢驗提供參考意見，現匯報如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選取2015年8月至12月來我院婦科門診就診，因病情需要選擇進行陰道分泌物檢測的患者，共有陰道分泌物328例。所有陰道分泌物取樣操作流程符合相關規定，取材后立刻送檢，避免因放置時間過長影響實驗結果。

1.2 檢驗方法

1.2.1 肉眼觀察：檢測前需觀察分泌物的性狀和顏色。正常的陰道分泌物是白色稀糊狀或者蛋清樣，高度黏稠，無腥臭味。若有炎癥感染，則陰道分泌物的性狀及顏色會有相應改變且具有腥臭味。細菌性陰道炎的分泌物是稀薄、均質，有黏附性；滴蟲性陰道炎分泌物為稀薄的泡沫狀；念珠菌陰道炎分泌物為豆腐渣樣；化膿性感染分泌物呈膿性，且顏色為黃色或黃綠色。若白帶內混有血液，且具有特殊臭味，應高度懷疑惡性腫瘤、宮頸息肉等[3]。

1.2.2 生理鹽水法：將需檢查的標本拭子直接涂抹在滴有鹽水的載玻片上，注意需涂抹均勻。然后用低倍顯微鏡觀察有無陰道毛滴蟲、念珠菌菌絲等，再用高倍顯微鏡觀察白細胞、上皮細胞、桿菌、球菌，并尋找有菌體或微生物，并如實記錄。

1.2.3 革蘭染色法：用燒灼滅菌后的接種環從培養液中取一環菌，涂抹在滴有鹽水的載玻片上，注意需涂抹均勻，涂成薄薄一層。使涂片在室溫下自然干燥，或用酒精燈稍微加熱，使之迅速干燥。干燥后手持載玻片一端，使標本面朝上，在酒精燈的火焰外側快速來回移動3～4次，共3～4 s，待放置冷卻后進行染色。染色分為初染、媒染、脫色及復染。待染色成功后進行干燥，即可用顯微鏡進行觀察[4]。

顯微鏡下革蘭陰性菌呈紅色，革蘭陽性菌呈紫色。觀察到細胞邊緣不清楚并有大量的革蘭陰性桿菌或染色不深的球桿菌劇集，形成細胞團，則是線索細胞。當看到卵圓形革蘭染色孢子或假菌絲是可判斷為念珠菌性陰道炎感染；發現分散于白細胞內外，有腎形的革蘭陰性雙球菌存在時考慮淋病奈瑟菌；而陰道毛滴蟲顯微鏡下則是呈梨形、整個胞體紅似粒細胞核及鞭毛等特征[5]。

革蘭染色的成敗關鍵在于染色環節，需嚴格掌握酒精脫色的程度。如脫色過度，則革蘭陽性菌可被誤認為革蘭陰性菌；而脫色不足時，革蘭陰性菌又可能被誤認為革蘭陽性菌。還有菌齡也同樣影響染色的結果，如革蘭陽性菌培養時間過長，或已死亡及部分菌體自行溶解，都常呈陰性反應。

1.3 統計學方法：將研究數據應用SPSS 19.0軟件進行統計學分析，采用χ2檢驗，P＜0.05具有統計學意義。

2 結 果

通過實驗數據分析發現革蘭染色法檢查陽性率要明顯高于生理鹽水法的檢查方法（P＜0.05），但是通過對主要感染種類的檢查數據分析，可以看出在毛滴蟲的檢測率上，生理鹽水法略高于革蘭染色法檢查，但不具有統計學意義（P＞0.05）。在另外3種病原體（念珠菌、線索細胞、淋球菌）的檢查，革蘭染色法藥顯著優于生理鹽水法（P＜0.05）。此外，革蘭染色法檢查報告中有17例感染不在4種主要感染范圍內，生理鹽水法檢查報告種有12例不在感染范圍內，見表1、表2。

表1 兩組檢驗方法總陽性率（%）對比

表2 兩種檢查方法主要感染種類陽性數對比

3 討 論

在臨床中發現毛滴蟲、線索細胞及念珠菌感染為臨床炎癥的主要病原體，而進行陰道分泌物涂片的常規檢查，能直接了解宮頸及陰道是否有炎癥存在、評估其炎癥程度及感染類型。選擇準確可靠檢測出高的檢驗方法，為臨床診斷提供決定性的依據，是醫師診查的利器，能讓醫師科學合理有效地選擇抗生素，治療及預防婦科疾病的感染及傳播，維護社會及家庭穩定。

本研究通過革蘭染色法和生理鹽水法檢測相同標本發現，革蘭染色法對念珠菌、線索細胞、和淋球菌的檢查比生理鹽水法更加的敏感、有效。根據目前的流行病學調差分析，婦科生殖道感染中真菌引起的感染不斷增多，呈急劇上升趨勢。所以如何使真菌感染陽性率檢測提高，已成為臨床醫師與檢驗人員密切關注的問題[6]。

生理鹽水法在顯微鏡尋找念珠菌時，如果檢測樣品中念珠菌量少，正好上皮細胞與念珠菌覆蓋、重疊，導致圖片不好辨別確定，從而使檢測效率減低。革蘭染色法檢測由于真菌的芽生孢子和假菌絲，被染上藍色，在顯微鏡下形態典型突出，容易尋找辨認。這樣就使念珠菌在革蘭染色法中漏診的概率降低，提高標本的陽性率。

顯微鏡下找到線索細胞是確診細菌性陰道病的關鍵，檢測標本行革蘭染后，顯微鏡下線索細胞聚集成團，特點鮮明，容易尋找，而且找到線索細胞以后，可以進一步進行胺試驗和pH試驗，更加確認檢驗的正確性。生理鹽水涂片法檢查時，在高倍鏡下尋找線索細胞，該細胞邊緣呈現鋸齒狀，細胞壁已溶解，細胞核模糊不清，而且線索細胞上覆蓋大量細小的顆粒物，嚴重影響檢驗人員觀察視野，降低檢驗結果的準確性。

最近十年來，淋球菌感染的發病率呈逐年上升趨勢，有成為社會公共安全問題的趨勢，性傳播是其主要傳播方式。采用革蘭染色法檢驗是目前最簡便、快速的輔助診斷手段，從患者陰道分泌物提取標本后經革蘭染色后會在白細胞內外看到革蘭陰性桿菌雙球菌。是一種有效地篩查手段，可進一步進行細菌培養進行確診。但是革蘭染色法對毛滴蟲的檢出率略低于生理鹽水法，可能是因為毛滴蟲是在25～37 ℃的環境中活動頻繁，使用革蘭染色法進行檢驗時，毛滴蟲已經死亡，染色后與白細胞不易區分，從而減低檢出率。

綜上所述，革蘭染色法能更加全面、有效地對陰道分泌物的感染情況進行檢測，但是在毛滴蟲的檢測率上不及生理鹽水法。故我們建議采取革蘭染色法結合生理鹽水法檢查陰道分泌物的標本，以革蘭染色法為主，對高度懷疑毛滴蟲感染的標本，但革蘭染色法又呈陰性反應，應重新進行生理鹽水法檢驗。這樣能更加完善標本的檢查方法，避免漏診的現象，為臨床工作提供可靠保障。

[1] 廖秦平,張岱.中國女性生殖道感染診治現狀及研究進展[J].國際婦產科學雜志,2011,38(6):469-471.

[2] 蘇阿麗,李榮華,劉菊等.三種婦科陰道分泌物檢測方法的比較與分析[J].中國民康醫學,2012,24(10):1262-1262.

[3] 劉金芳,宋先鋒.385例女性陰道分泌物常規檢查和支原體培養結果聯合觀察[J].中國民康醫學,2011,23(3):279-280.

[4] 李曉玉.革蘭染色法在陰道分泌物真菌檢驗中的價值觀察[J].中外醫療,2012,31(34):163-164.

[5] 江立千,陳恒.陰道分泌物涂片革蘭染色的臨床價值[J].檢驗醫學與臨床,2008,5(1):28.

[6] 何彩霞.婦科患者生殖道感染現狀及護理對策[J].中國藥物經濟學,2014(6):155-156.

R711.73 文獻標識碼：B 文章編號：1671-8194（2017）24-0036-02