新生兒化膿性腦膜炎病原菌構成及耐藥性分析

楊梅，陳橋，孫正剛

(達州市中西醫結合醫院檢驗科四川達州635000)

新生兒化膿性腦膜炎病原菌構成及耐藥性分析

楊梅，陳橋，孫正剛

(達州市中西醫結合醫院檢驗科四川達州635000)

目的分析新生兒化膿性腦膜炎病原菌構成情況及耐藥性情況。方法選取達州市中西醫結合醫院2013年3月至2015年3月收治的142例化膿性腦膜炎新生兒的腦脊液培養結果進行研究，比較分析其病原菌構成和耐藥性情況。結果142例化膿性腦膜炎新生兒腦脊液病原菌構成：雙菌株2例，單菌株140例，其中革蘭陰性細菌100株(68.97%)，革蘭陽性細菌38株(26.21%)，真菌7株(4.83%)。革蘭陽性細菌中腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、糞腸球菌以及屎腸球菌等菌種對復方新諾明、氨芐西林、紅霉素以及頭孢西丁等抗生素耐藥，但未檢出對萬古霉素和替考拉寧耐藥的菌種。革蘭陰性細菌中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、黏質沙雷菌等菌種對所研究抗生素耐藥性較高，其中大腸埃希菌對復方新諾明、氨芐西林等抗生素的耐藥率甚至達到80%以上，而整個研究未發現對美羅培南耐藥的菌種。結論新生兒化膿性腦膜炎病原菌檢出率主要以革蘭陰性菌為主，且致病菌的耐藥性嚴重。

大腸埃希菌；化膿性腦膜炎；病原菌構成；耐藥性

化膿性腦膜炎是一種較為嚴重的中樞神經系統感染性疾病，常見的感染有肺炎鏈球菌感染和腦膜炎球菌感染[1]。該病發病原因主要為化膿性細菌感染，主要臨床表現為嘔吐、發熱、頭痛、腦膜刺激征、精神改變以及腦脊液改變等[2]。臨床研究發現，雖然化膿性腦膜炎發病年齡段較廣，但主要集中于5歲以下兒童，其在足月新生兒中的發病率為0.5%左右[3]。而國外有研究則發現，化膿性腦膜炎患兒即使經治療存活后發生后遺癥的概率也高達45%左右[4]。同時，由于該病病原眾多，且其在疾病病因學所占比重有所不同。因此，對于化膿性腦膜炎患兒血和腦脊液培養結果中病原菌構成的研究顯得尤為重要。本研究就新生兒化膿性腦膜炎病原菌構成情況及耐藥性情況進行分析，以探討如何在治療過程中根據耐藥情況合理選擇抗菌藥物，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取達州市中西醫結合醫院2013年3月至2015年3月收治的142例化膿性腦膜炎新生兒進行研究。其中男性84例，女性58例，年齡7～28 d，平均(14±1.5)d；發病日齡8～31d，平均(16± 2.5)d；出生體質量4～8 kg，平均(4±1.1)kg。納入標準：①符合《實用新生兒學》[5]中相關診斷標準者；②出生日齡在28 d以內者；③腦脊液培養結果呈陽性。排除標準：①先天性腦畸形者；②顱內缺血或缺血缺氧性疾病者；③早期感染菌量大且呈現陽性者。所有患兒入院后均進行藥敏試驗以及耐藥性分析。整個研究經患者和家屬知情同意后簽署書面同意書，并獲得本院倫理委員會批準后實施。

1.2 方法所有患兒均在入院48 h內抽取腦脊液3 mL送檢，將3 mL腦脊液于無菌細菌室內注入兒童專用培養瓶，然后放入培養箱內進行培養。劃線分區平板上(平板分區劃線實驗法)，置于35℃培養箱中再培養24 h后分離菌株。其中藥敏試驗采用瓊脂擴散法進行，結果采取臨床實驗室標準委員會(NCCLS)制定標準進行相關判斷。采用BACTEC9120全自動血培養儀、DL-96細菌鑒定系統、使用配套鑒定及藥敏分析卡進行檢測，試驗所用培養瓶和培養箱均購自美國BD公司。

1.3 統計學方法應用SPSS11.5軟件包進行數據分析，計數資料以率(%)表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 新生兒化膿性腦膜炎腦脊液病原菌分布142例新生兒全部檢出腦脊液培養陽性標本，且一共分離出145株病原菌，除2例分離出兩種菌株(一種為白色念球菌，一種為糞腸球菌)外，其余140例均分離單一病原菌。其中革蘭陰性細菌100株(68.97%)，革蘭陽性細菌38株(26.21%)，真菌7株(4.83%)，見表1。

2.2 腦脊液檢出革蘭陽性細菌耐藥性通過分析發現，革蘭陽性細菌中大部分菌種對復方新諾明、氨芐西林、紅霉素以及頭孢西丁等抗生素耐藥，但未檢出對萬古霉素和替考拉寧耐藥的菌種，見表2。

表1142 例新生兒化膿性腦膜炎腦脊液病原菌分布

2.3 腦脊液檢出革蘭陰性細菌耐藥性通過分析發現，革蘭陰性細菌中大部分菌種對所研究抗生素耐藥性較高，其中大腸埃希菌對復方新諾明、氨芐西林等抗生素的耐藥率甚至達到80%以上，而整個研究未發現對美羅培南耐藥的菌種，見表3。

2.4 并發癥與預后142例患兒共住院治療28～84 d，其中治愈135例(95.07%)，死亡7例(4.93%)。患兒發生并發癥共11例(7.75%)，其中腦軟化3例，腦積水3例，聽力障礙3例，腦室膜炎1例，硬膜下積液1例。

表2 腦脊液檢出革蘭陽性細菌耐藥性[例(%)]

表3 腦脊液檢出革蘭陰性細菌耐藥性[例(%)]

3 討論

新生兒在住院期間患病主要類型為感染性疾病，究其原因可能與新生兒免疫功能尚未發育成熟而缺乏抵抗病原的能力有關[6]。由于新生兒缺乏相關抵抗病原的能力，因此一旦患兒感染病原菌后，病原菌迅速向周圍組織擴散，當病原菌擴散至腦組織后由于患兒血腦屏障功能不完善，將導致患兒發展成為化膿性腦膜炎[7]。若患兒不能及時有效診斷并接受針對性治療，病情進展較快，可能引發較高的病死率[8]。有研究就指出，新生兒化膿性腦膜炎的病死率在我國約占50%。同時，患兒發病進行相應診治后，也存在發生腦積水、失明、癲病以及感覺等功能障礙相關后遺癥的可能[9]。此外，由于化膿性腦膜炎的臨床癥狀多表現為嘔吐、驚厥等，但其臨床癥狀不具有一定特異性，在早期很難確診。因此在早期確診時就要應用腦脊液檢查這一診斷金標準，不僅可以有效檢測出患兒疾病病原菌構成，還可以有效指導抗生素應用，減少應用抗菌藥物出現的耐藥性。

近年來，隨著我國生物醫學的不斷發展，抗生素在臨床治療中的應用也越來越多。但是隨著抗生素的濫用和耐藥菌的不斷演變，像大腸埃希菌和革蘭陰性菌發生感染的概率呈現逐年增高的趨勢，不僅其耐藥菌株數量逐漸上升，其耐藥性也逐漸增強。大腸埃希菌是一種廣泛分布于人類生活環境的細菌，常常寄居于人類腸道和生殖道中，產婦由于其特殊生理環境可能導致其生殖道內大量存在大腸埃希菌，因此在分娩過程中致使新生兒發生大腸埃希菌感染[10-11]。雖然產婦機體內的IgM能夠殺死大腸埃希菌，但由于產婦胎盤具有一定屏障作用，因此IgM并不能有效進入胎兒體內提高其對大腸埃希菌的免疫力。有研究發現，大腸埃希菌是導致新生兒發生化膿性腦膜炎的主要病原菌[12]。而本次研究中，納入研究的142例患兒經腦脊液培養結果明確大腸埃希菌感染者達55例，其比例達37.93%，證實了上述研究結果中大腸埃希菌是導致新生兒發生化膿性腦膜炎的主要病原菌這一結論。同時，142例化膿性腦膜炎新生兒腦脊液病中原菌中革蘭陰性細菌有100株，占68.97%，革蘭陽性細菌38株，占26.21%，真菌7株，占4.83%，而大腸埃希菌屬于革蘭陰性菌的一種，說明大腸埃希菌是導致新生兒發生化膿性腦膜炎的病原菌。

國內有研究顯示，大部分大腸埃希菌還具有K1抗原，不僅可以抵抗抗生素的吞噬作用，還影響化膿性腦膜炎疾病的發生發展預后[13]。而在耐藥性研究中也發現，革蘭陰性細菌中大腸埃希菌對復方新諾明、氨芐西林、哌拉西林等抗生素的耐藥率在80%以上，對四環素、頭孢唑啉、頭孢噻肟等抗生素的耐藥率也在60%以上，進一步證實其對抗生素耐藥性較高。而在革蘭陽性細菌中，其常見致病菌對頭孢西丁、氨芐西林、復方新諾明、紅霉素等抗生素耐藥性較高。兩組耐藥性研究同時證實多種致病菌在治療過程中已經對某些抗生素出現較高的耐藥性，因此在后續治療中應該放棄應用相關抗生素，轉而應用藥效較強的抗生素，以達到較好的治療效果。同時，在治療過程中還應注意合理應用抗生素，避免濫用而增加耐藥率。

總之，新生兒化膿性腦膜炎病原菌檢出率主要以革蘭陰性菌為主，且各種致病菌的耐藥性情況較為嚴重，所以臨床治療應根據耐藥情況選用具有較強敏感性的抗菌藥物，嚴密監測并發癥發生情況，提高患兒治愈情況，改善預后。

參考文獻

[1]張紅愛,張惠芳,于淑群,等.新生兒化膿性腦膜炎的臨床特點與早期診斷[J].實用兒科臨床雜志,2012,27(14):1091-1092.

[2]張靜,毛健,李娟,等.新生兒不同病原菌化膿性腦膜炎在磁共振影像學上的特點[J].中國當代兒科雜志,2012,14(7):489-495.

[3]廖紅梅,楊賽,陳枚,等.小兒化膿性腦膜炎臨床和病因學分析[J].臨床兒科雜志,2012,30(8):767-769.

[4]Braun V,Eskens U,Hartmann A,et al.Focal bacterial meningitis following ascending bite wound infection leading to paraparesis in a captive California sea lion(Zalophus californianus)[J].J Zoo Wildl Med,2015,46(1):135-140.

[5]Kepa L,Oczko-Grzcsik B,Boron-Kaczmarska A.Cerebrospinal fluid interleukin-6 concentration in patients with purulent,bacterial meningitis-own observations[J].Przegl Epidcmiol,2014,68(4):645-649.

[6]侯曉霖,梁志娟,王振海.化膿性腦膜炎腦脊液常見病原菌基因芯片的構建[J].中國醫科大學學報,2013,42(1):14-18.

[7]胡月圓,高喜容,占彩霞,等.新生兒不同病原菌化膿性腦膜炎臨床分析[J].臨床兒科雜志,2015,33(1):13-16.

[8]湯海燕,談鷹,張栗.腦脊液與血漿生化指標比值對結核性腦膜炎與化膿性腦膜炎的鑒別意義[J].中國全科醫學,2015,18(14): 1705-1707,1710.

[9]高潔,楊麗,毛雪,等.新生兒化膿性腦膜炎臨床分析[J/CD].中華婦幼臨床醫學雜志(電子版),2014,10(1):9-12.

[10]張曉莉,賈天明,牛國輝,等.氯霉素治療小兒難治性化膿性腦膜炎的療效和安全性分析[J].中國婦幼保健,2014,29(8):1281-1283.

[11]查萍,王琍琍,劉光輝,等.新生兒化膿性腦膜炎不良預后危險因素的探討[J].安徽醫科大學學報,2015,50(7):1036-1039.

[12]孫增賢,蘭菊紅,張亞麗.新生兒大腸埃希菌化膿性腦膜炎臨床特點及耐藥性分析[J].臨床兒科雜志,2016,34(3):172-175.

[13]吳春芳,柴樹潔,賀維亞.化膿性腦膜炎的病原菌分布與藥敏試驗分析[J].中華醫院感染學雜志,2015,24(13):2926-2928.

Pathogen composition and drug resistance in neonates with purulent meningitis.

YANG Mei,CHEN Qiao,SUN Zheng-gang.Department of Clinical Laboratory,Sichuan Dazhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine,Dazhou 635000,Sichuan,CHINA

ObjectiveTo analyze the pathogen composition and drug resistance of neonatal purulent meningitis. MethodsCerebrospinal fluid samples of 142 neonates with purulent meningitis of in our hospital from March 2013 to March 2015 were collected and cultured.The pathogen composition and drug resistance were compared.ResultsAmong the 142 cases,2 were infected by two pathogensand one was infected by one pathogen,with Gram-negative bacteria in 100 strains(68.97%),Gram-positive bacteria in 38 strains(26.21%),fungi in 7 strains(4.83%).Saprophytic staphylococcus,Staphylococcus epidermidis,Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium of Gram-positive bacteria were resistant to antibiotics such as cotrimoxazole,ampicillin,erythromycin and cefoxitin,but no strain showed resistance to vancomycin and teicoplanin.Escherichia coli,Klebsiella pneumonia,Serratia marcescens of Gram-negative bacteria were highly resistant to antibiotics detected,of which Escherichia coli showed a resistance rate of more than 80%to compound neopanamine and ampicillin,and no strain showed resistance to meropenem.ConclusionPathogens of neonatal purulent meningitis detected is mainly Gram-negative bacteria,and the drug resistance of the pathogenic bacteria is serious.

Escherichia coli;Purulent meningitis;Pathogen composition;Drug resistance

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.15.023

R722.1

A

1003—6350（2017）15—2486—04

2016-12-08)

四川省科技支撐計劃(編號：2015SZ4576)

楊梅。E-mail：llmei1981@sina.com