抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基轉移酶聯合檢測在丙型肝炎診斷中的價值

盧豐才，彭文暉

(濟南市長清區人民醫院 檢驗科，山東 濟南250399)

抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基轉移酶聯合檢測在丙型肝炎診斷中的價值

盧豐才，彭文暉

(濟南市長清區人民醫院 檢驗科，山東 濟南250399)

丙型肝炎是由于感染丙型肝炎病毒(hepatic C virus，HCV)所引起的肝臟損害，該病為傳染病，主要通過血液和體液傳播。據世界衛生組織(WHO)統計顯示，全球感染HCV的患者約有1.7億[1]，我國HCV感染率為3.2%，嚴重影響著人類的健康[2]。早期丙型肝炎的臨床表現不十分典型，基本與乙型肝炎相類似，癥狀比較輕，難以早期發現。但是，與乙肝相比，丙型肝炎早期更加容易出現肝硬化，導致肝癌的發生，病死率也較高[3]。目前，臨床上主要依靠檢測抗丙型肝炎病毒抗體(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)來診斷丙型肝炎，丙氨酸氨基轉移酶(alanine amino acid trans-fer，ALT)也是反映肝臟損傷靈敏的指標之一。本研究探討了聯合檢測血清HCV抗體、HCV-RNA以及ALT在早期診斷丙型肝炎中的臨床應用價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2013年1月至 2016年6月到本院就診的疑似丙型肝炎患者120例。其中男79例，女41例；年齡21-75歲，平均年齡(60.2±11.4)歲。所有患者均排除甲型肝炎、乙型肝炎以及戊型肝炎等其它類型的病毒性肝炎。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清HCV-RNA檢測采用美國SLAN Real Time PCR Detection System7300熒光定量檢測儀并應用熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應(FQ-RT-PCR)檢測HCV-RNA，試劑購自上海科華生物有限公司，陽性結果為HCV-RNA超過103IU/ml。

1.2.2 血清抗-HCV檢測采用上海新波生物技術有限公司ANYTEST型時間分辨熒光分析儀并應用免疫熒光法檢測抗-HCV，試劑為原裝配套試劑，按照說明書進行操作。陽性為抗-HCV抗體為≧1PEIU/ml，反應性為0.04-1.0 PEIU/ml，陰性為0-1.0 PEIU/ml；如果檢測結果為反應性，則再次進行檢測，如果結果仍然為反應性，則按陽性結果計算。

1.2.3 肝功能生化指標ALT檢測使用西門子Dimension RxL Max全自動生化分析儀采用雙試劑速率法檢測，試劑購自溫州東甌津瑪生物科技有限公司。ALT超過50 U/L為異常。

1.3 統計學處理

2 結果

2.1 疑似HCV感染者血清HCV-RNA含量與抗-HCV及ALT檢測結果關系

120例標本中HCV-RNA陽性者75例，陽性率為62.50%；抗-HCV陽性者91例，陽性率為75.83%；ALT異常者63例，異常率為52.50%，三者比較差異具有統計學意義(χ2=14.21，P<0.05)。

相關分析顯示，HCV-RNA含量與抗-HCV陽性率及S/CO值均呈正相關(r=0.528，r=0.246，P均<0.001)；HCV-RNA含量與ALT異常率呈線性正相關(r=0.401，P<0.001)；而與ALT的活性值無明顯相關(r=0.046，P=0.375)，詳見表1。

表1 疑似HCV感染者血清HCV-RNA含量與抗-HCV及ALT檢測結果關系

2.2 血清HCV-RNA、抗-HCV與ALT聯合檢測結果分析

抗-HCV(+)且HCV-RNA(+)者ALT異常率明顯高于其他三組(P<0.05)。抗-HCV(+)且HCV-RNA(+)者ALT的活性值明顯高于抗-HCV(-)且HCV-RNA(-)者、抗-HCV(+)而HCV-RNA(-)者(P<0.05)，但明顯低于抗-HCV(-)而HCV-RNA(+)者(P<0.05)，詳見表2。

表2 血清HCV-RNA、抗-HCV與ALT聯合檢測結果分析

3 討論

HCV是導致人類發生丙型病毒性肝炎(簡稱丙肝)的病原體，當機體感染HCV后，僅有15%-25%的患者可以自動將病毒清除，絕大多數的患者將轉為慢性肝病，進而發展為肝纖維化，部分患者甚至進展為肝癌，危及患者的生命[4，5]。因此，早期診斷和治療丙肝可以延緩或終止病情的進展，改善患者的預后。目前，臨床上診斷丙肝的指標主要包括抗-HCV，HCV-RNA以及肝功能相關指標的檢測。關于HCV-RNA載量與抗-HCV定量以及生化指標ALT之間的相關性目前仍然存在著爭議[6]，聯合檢測HCV感染患者血清中的HCV-RNA載量、抗-HCV以及ALT的活性的報道則更少。

在機體感染HCV 3-4周內，采用生物學檢測方法可以檢測到抗-HCV，但是，抗體檢測存在著一些不足之處[7-9]，主要有以下幾點：一是由于使用HCV基因重組抗原的質量以及各抗原片段包被的比例不同，各試劑生產廠家試劑的靈敏度和特異性也存在著一定的差異，導致結果出現差異性；二是HCV-Ab產生存在窗口期，大約為70 d左右，因此，即使是抗-HCV陰性也不能夠排除攜帶HCV且具有傳染性的可能；三是在檢測抗-HCV的免疫熒光法試劑盒中，由于標記抗體是廣譜的抗人IgG抗體，或單克隆抗體純度不高等因素，因此，使得檢測的特異性明顯的降低。HCV RNA是HCV的核心成分，檢測HCV RNA被認為是診斷HCV感染的“金標準”[10]。研究表明[11]，當機體感染HCV后，血液中HCV濃度約為102-108/ml，在感染后的第一周即可以在血液中檢測到HCV-RNA。但是，由于感染后的病毒血癥分為三種模式，即持續性、一過性和間隙性，因此，有時的檢測結果可以是假陰性。另外，由于某些晚期肝病患者的病毒載量太低，導致無法檢測出，也使得出現陰性的結果。因此，需要聯合檢測抗-HCV以及HCV-RNA，來有效的防止窗口期為產生抗體以及抗體產生后的長期存在，導致難以判斷患者是近期感染還是既往感染的缺陷，還可以減少慢性丙肝患者HCV-RNA的間歇性出現導致的誤差，避免漏診和誤診[12]。感染HCV后，肝細胞受到嚴重的損害，存在于肝細胞的胞質中的ALT被釋放入血中，導致血清ALT水平的升高。但是，單純檢測ALT也不能完全反映肝組織的損害程度，仍然有44%的HCV RNA陽性患者的ALT水平處于正常水平，但是，肝臟活組織檢查結果卻顯示有明顯的肝纖維化、肝硬化的病理改變[13，14]。

本次研究結果顯示，隨著HCV-RNA含量的增加，抗-HCV的陽性率也隨之增加，且ALT的異常率也明顯的升高，相關分析顯示均呈正相關(P均<0.001)。說明丙肝患者抗-HCV的變化趨勢以及肝細胞的損傷程度與HCV病毒載量的變化趨勢均有著一定程度的同步性。但是，HCV-RNA陽性率(62.50%)低于抗-HCV的陽性率(75.83%)(P<0.05)，分析認為可能是由于丙型肝炎恢復期的患者，機體內HCV病毒的復制減少或消失，導致水平低于檢測下限，但是抗-HCV仍然持續存在，而HCV-RNA的陽性率(62.50%)高于ALT的異常率(52.50%)(P<0.05)。目前的研究認為，HCV的發病機制不僅是由于HCV在肝細胞內復制，導致肝細胞受到嚴重的破壞，還有宿主自身免疫應答反應所引起的肝細胞炎癥反應和損傷[15]。因此，ALT濃度變化還與患者個體差異、自身免疫功能以及肝細胞再生等因素有著密切的關系。在感染HCV的患者中，抗-HCV陽性且HCV-RNA陽性的患者最多，同時，患者的ALT異常率也最高，此種類型的受檢者在臨床上可以確診為HCV感染；而抗-HCV陽性而HCV-RNA陰性的患者可能是由于雖然體內HCV-RNA已經被清除，但是抗-HCV仍然存在；抗-HCV陰性而HCV-RNA陽性的患者可能是因為患者處于急性丙肝感染的早期，抗-HCV處于窗口期，因此，ALT的異常率也最低。

綜上所述，聯合檢測HCV患者血清中抗-HCV、HCV-RNA載量以及ALT活性濃度可以了解HCV在體內的復制狀況以及肝臟的炎癥狀態，對提高丙肝的臨床診斷率具有十分重要的臨床意義。

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1007-4287(2017)08-1353-03

盧豐才(1962-)，男，山東省濟南市人，本科，副主任醫師，研究領域:醫學檢驗。

2016-09-21)