老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞的表達(dá)與癌胚抗原表達(dá)的相關(guān)性

劉東利,張宇祥,杜延玲

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院 呼吸內(nèi)科，陜西 延安716000)

老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞的表達(dá)與癌胚抗原表達(dá)的相關(guān)性

劉東利,張宇祥,杜延玲

(延安大學(xué)附屬醫(yī)院 呼吸內(nèi)科，陜西 延安716000)

目的 探討老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞的表達(dá)與癌胚抗原(CEA)表達(dá)的相關(guān)性。方法 采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月選擇在我院經(jīng)病理確診的65例老年非小細(xì)胞肺癌患者作為觀察組，同期選擇在我院進(jìn)行體檢的健康老年人65例作為對(duì)照組，兩組都進(jìn)行外周血T細(xì)胞表達(dá)檢測(cè)與血清CEA表達(dá)檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 觀察組與對(duì)照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，觀察組明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。觀察組的總T細(xì)胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對(duì)照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時(shí)觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果顯示老年非小細(xì)胞肺癌患者外周血總T細(xì)胞比例與血清CEA含量之間的表達(dá)呈現(xiàn)明顯負(fù)線性相關(guān)(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析結(jié)果顯示總T細(xì)胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達(dá)的獨(dú)立影響因素(P<0.05)。結(jié)論 老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞與CEA表達(dá)都呈現(xiàn)異常情況，外周血T細(xì)胞下降與CEA高表達(dá)可能具有一定相關(guān)性，為此檢測(cè)外周血T細(xì)胞與CEA表達(dá)可評(píng)價(jià)患者疾病狀況。

老年人；非小細(xì)胞肺癌；外周血T細(xì)胞；癌胚抗原；相關(guān)性

(ChinJLabDiagn,2017,21:1329)

非小細(xì)胞肺癌是嚴(yán)重威脅我國(guó)人民生命健康的惡性腫瘤，多發(fā)病于老年人[1]。由于早期發(fā)病比較隱匿，很多患者在發(fā)病時(shí)以為晚期，導(dǎo)致治療效果欠佳，總體5年生存率不到20.0%，為此早發(fā)現(xiàn)和提高診斷率成為提高患者生存率的關(guān)鍵[2]。當(dāng)前臨床上多依靠影像學(xué)診斷和病理學(xué)對(duì)肺癌進(jìn)行診斷，但是效果一直不太好。現(xiàn)代研究表明非小細(xì)胞肺癌的產(chǎn)生與遺傳、環(huán)境因素等多種因素是密切相關(guān)的，其中血清腫瘤標(biāo)志物是由于惡性腫瘤細(xì)胞異常而產(chǎn)生的物質(zhì)，能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展情況[3,4]。癌胚抗原(CEA)是一種細(xì)胞內(nèi)糖蛋白，是目前診斷非小細(xì)胞肺癌應(yīng)用最常用的一種腫瘤標(biāo)志物，但是在早期篩查非小細(xì)胞肺癌上仍有一定的局限性[5,6]。現(xiàn)代研究表明惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)密切相關(guān)，生理狀態(tài)下免疫系統(tǒng)能夠清除出現(xiàn)的突變細(xì)胞[7,8]。T細(xì)胞構(gòu)成細(xì)胞免疫的主要部分，腫瘤患者的外周血T細(xì)胞亞群存在異常情況，也表明T細(xì)胞亞群在機(jī)體細(xì)胞免疫調(diào)控和抗腫瘤免疫中起主導(dǎo)作用[9]。本文為此具體探討了老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞的表達(dá)與癌胚抗原表達(dá)的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月選擇在我院經(jīng)病理確診的65例老年非小細(xì)胞肺癌患者作為觀察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：均未經(jīng)任何治療；排除遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；年齡≥60歲。其中男36例，女29例；年齡最小61歲，最大84歲，平均年齡73.13±5.29歲；病程最短3個(gè)月，最長(zhǎng)2年，平均為1.98±0.45年；平均體重指數(shù)為21.09±1.87 kg/m2；臨床分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期20例，Ⅲ10例，Ⅳ15例；分化程度：低分化15例，中分化26例，高分化24例。同期選擇在我院進(jìn)行體檢的健康老年人65例作為對(duì)照組，其中男38例，女27例；年齡最小60歲，最大89歲，平均年齡73.13±5.29歲。兩組都排除術(shù)前曾有過(guò)惡性腫瘤病史(包括非小細(xì)胞肺癌患者)，合并心、肝、胃等重要臟器的疾病患者，妊娠與哺乳期婦女；研究得到醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)與入選者的知情同意。兩組的性別、年齡等對(duì)比無(wú)明顯差異(P<0.05)。

1.2 外周血T細(xì)胞表達(dá)檢測(cè)

分別抽取兩組入選者的外周抗凝血2 ml，采用直接免疫熒光標(biāo)記法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，選擇連接有熒光素的抗體進(jìn)行免疫標(biāo)記反應(yīng)，上FACS流式細(xì)胞儀(BD FACS Calibur)檢測(cè)后，用系統(tǒng)配套的軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)算與檢測(cè)總T細(xì)胞比例、CD3+占淋巴細(xì)胞比例，CD3+CD4+、CD3+CD8+占CD3+T細(xì)胞比例，檢測(cè)試劑購(gòu)于美國(guó)BD公司。

1.3 CEA檢測(cè)

分別抽取兩組入選者的空腹靜脈血3 ml，靜置20 min,3 000 rpm 的轉(zhuǎn)速離心5 min，取上層血清置于-20℃低溫冰箱保存待測(cè)，所用儀器為羅氏全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，Roche公司提供檢測(cè)試劑盒，CEA的檢測(cè)方法為電化學(xué)發(fā)光免疫分析法，均嚴(yán)格按照儀器和試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 血清CEA含量對(duì)比

經(jīng)過(guò)檢測(cè)，觀察組與對(duì)照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19ng/mL和2.19±0.13ng/mL，觀察組明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清CEA含量對(duì)比

2.2 外周血T細(xì)胞對(duì)比

經(jīng)過(guò)檢測(cè)，觀察組的總T細(xì)胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對(duì)照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時(shí)觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組外周血T細(xì)胞對(duì)比

2.3 相關(guān)性分析

在觀察組患者中，我們把外周血總T細(xì)胞比例與血清CEA含量進(jìn)行Spearman秩相關(guān)分析，結(jié)果顯示老年非小細(xì)胞肺癌患者外周血總T細(xì)胞比例與血清CEA含量之間的表達(dá)呈現(xiàn)明顯負(fù)線性相關(guān)(r=-0.569，P<0.05)。

我們也對(duì)老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞表達(dá)與CEA表達(dá)經(jīng)Cox多因素分析，結(jié)果顯示總T細(xì)胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達(dá)的獨(dú)立影響因素(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 老年非小細(xì)胞肺癌患者中外周血T細(xì)胞表達(dá)與CEA表達(dá)的多因素Cox回歸分析

3 討論

由于各種因素的影響，當(dāng)前我國(guó)老年人非小細(xì)胞肺癌的發(fā)病率正迅猛增長(zhǎng)，是造成癌癥相關(guān)性死亡的最主要病因，已成為我國(guó)部分城市人口惡性腫瘤死亡原因的第一位。同時(shí)很多患者在第一次就診時(shí)，病變已屬中晚期而失去手術(shù)機(jī)會(huì)，為此早期診斷與病情判斷有助于改善預(yù)后[10]。

伴隨著分子生物學(xué)標(biāo)志物的發(fā)展，越來(lái)越多的血清腫瘤分子標(biāo)志物開(kāi)始應(yīng)用于臨床，其有利于對(duì)非小細(xì)胞肺癌進(jìn)行早期診斷與治療[11]。癌胚抗原(CEA)是一種位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的糖蛋白，正常胚胎的消化管組織中也存在一定量的癌胚抗原，也可微量存在于正常個(gè)體血清中，而在多數(shù)癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況[12]。研究顯示非小細(xì)胞肺癌患者的血清中CEA的檢測(cè)和診斷的靈敏度在40.0%左右，CEA還可以用于疾病預(yù)后的輔助診斷，可作為非小細(xì)胞肺癌復(fù)發(fā)的監(jiān)視器[13]。本研究顯示觀察組與對(duì)照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，觀察組明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明老年非小細(xì)胞肺癌患者中CEA呈現(xiàn)高表達(dá)狀況。

當(dāng)前研究證據(jù)表明肺癌的發(fā)生、發(fā)展與機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)。生理狀態(tài)下免疫系統(tǒng)能夠清除突變細(xì)胞及早期的腫瘤細(xì)胞，而細(xì)胞免疫缺陷者可導(dǎo)致腫瘤發(fā)病率高，同時(shí)腫瘤負(fù)荷使宿主免疫系統(tǒng)的功能失衡，形成惡性循環(huán)[14]。在機(jī)體細(xì)胞免疫系統(tǒng)中，T細(xì)胞作為主要的效應(yīng)細(xì)胞，可通過(guò)T細(xì)胞亞群來(lái)完成復(fù)雜的免疫調(diào)控。T細(xì)胞也可根據(jù)細(xì)胞表面分子又分為幾大亞類，從而在維持機(jī)體免疫平衡中均起著各自的作用[15]。本研究顯示觀察組的總T細(xì)胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對(duì)照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時(shí)觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，也表明觀察組患者存在明顯的細(xì)胞免疫紊亂狀況。從機(jī)制上分析，腫瘤可能通過(guò)不表達(dá)MHC Ⅰ類分子，下調(diào)T細(xì)胞的激活表位；同時(shí)腫瘤細(xì)胞分泌趨化因子可趨化T細(xì)胞至腫瘤局部，發(fā)揮免疫抑制效應(yīng)[16]。

CEA 是一種重要的廣譜性腫瘤標(biāo)志物，對(duì)肺癌的判斷療效、監(jiān)控病情、監(jiān)測(cè)與預(yù)后分析都有一定的價(jià)值，CEA 的高表達(dá)狀況與非小細(xì)胞肺癌的病情與病理狀況也有一定的相關(guān)性，但其具有不強(qiáng)的特異性[17，18]。而當(dāng)前T細(xì)胞及抑制分子在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用日漸受到重視[19-21]；不過(guò)由于腫瘤免疫微環(huán)境構(gòu)成復(fù)雜，且機(jī)體細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)受多因素影響，還需要進(jìn)行進(jìn)一步分析。本研究Spearman秩相關(guān)分析結(jié)果顯示老年非小細(xì)胞肺癌患者外周血總T細(xì)胞比例與血清CEA含量之間的表達(dá)呈現(xiàn)明顯負(fù)線性相關(guān)(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析結(jié)果顯示總T細(xì)胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達(dá)的獨(dú)立影響因素(P<0.05)，說(shuō)明老年非小細(xì)胞肺癌患者外周血T細(xì)胞的下降表達(dá)可影響腫瘤細(xì)胞的理化性質(zhì)及其代謝情況，造成CEA的異常高表達(dá)。

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The correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen expression in the elderly patients with non small cell lung cancer

LIUDong-li,ZHANGYu-xiang,DUYan-ling.

(DepartmentofRespiratoryMedicine,AffiliatedHospitalofYan'anUniversity,Yan'an716000,China)

Objective To investigate the correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen(CEA) expression in the elderly patients with non small cell lung cancer.Methods Used a prospective method,From May 2013 to May 2015,65 elderly patients with non small cell lung cancer by pathological diagnosis in our hospital were selected as the observation group,and the medical examination of the health of the elderly 65 cases were selected at the same period as the control group,two groups were given the peripheral blood T cells expression detecting and serum CEA detection and correlation analysis.Results The serum CEA levels of the observation group and the control group were 34.45±14.19 ng/mL and 2.19±0.13 ng/mL,the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05).The total T cell ratio in the observation group was 2.53±2.19%,which was significantly lower than that of the control group of 6.54±2.98%(P<0.05),and the ratios of CD3+,CD3+CD4+and CD3+CD8+in the observation group were significantly lower than that in the control group (P<0.05).Spearman rank correlation analysis showed that the peripheral blood T cell ratio and serum CEA levels in the elderly patients with non small cell lung cancer patients were showed a significantly negative linear correlation(r=0.569,P<0.05).Cox multivariate analysis showed that the ratios of total T cells,CD3+,CD3+CD4+expression were the independent influence factors for the CEA levels(P<0.05).Conclusion The peripheral blood T cells and CEA expression in the elderly patients with non small cell lung cancer patients are showed abnormal situation,the decrease of peripheral blood T cells and the high expression of CEA may have some correlation,lfor the detection of peripheral blood T cells and CEA expression can evaluate the status of patients.

Elderly;non small cell lung cancer;peripheral blood T cell;tumor antigen;correlation

1007-4287(2017)08-1329-04

R734.2

A

2016-07-18)