化學發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測中的應用價值

李燕 蔡利超

（河南省鞏義市人民醫(yī)院檢驗科 鞏義 451200）

化學發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測中的應用價值

李燕 蔡利超

（河南省鞏義市人民醫(yī)院檢驗科 鞏義 451200）

目的：分析化學發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒（HBV）及核心抗體定性檢測中的應用價值。方法：選取2014年10月～2016年11月我院收治的乙肝患者95例為研究對象，應用化學發(fā)光酶免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測患者HBV、核心抗體（抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體），比較兩種檢測方法的陽性檢出率及診斷敏感度。結果：兩種方法檢測HBV陽性率比較無顯著性差異（P＞0.05）；化學發(fā)光酶免疫分析法檢測抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體陽性率及敏感度均高于酶聯(lián)免疫吸附測定法（P＜0.05）。結論：化學發(fā)光酶免疫分析法在HBV及核心抗體定性檢測中具有較高的應用價值，對核心抗體陽性檢出率和檢測敏感度均較高。

乙肝病毒；化學發(fā)光酶免疫分析法；核心抗體

乙肝病毒（Hepatitis B virus，HBV）是一種DNA病毒，一旦感染，可誘發(fā)肝硬化、肝衰竭、急性肝炎、原發(fā)性肝癌等疾病，已成為全世界公共衛(wèi)生問題。因此，及時發(fā)現(xiàn)并準確判斷HBV感染對乙肝預防及診療具有重要的臨床價值。段海萍等[1]學者指出，核心抗體可有效顯示近期伴有的慢性感染病毒、HBV感染活動。核心抗體包括抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體，其中抗HBcAb-IgM抗體可維持6～8周，抗HBcAb-IgG抗體維持時間更長。酶聯(lián)免疫吸附測定法常用于檢測HBV、核心抗體，但由于無法定量分析，且對患者病情進展、治療效果無法動態(tài)觀察，容易影響預后[2]。本研究旨在探討化學發(fā)光酶免疫法在檢測HBV及核心抗體中的應用價值?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2014年10月～2016年 11月收治的95例乙肝患者為研究對象。其中，男55例、女40例，病程1～11年、平均病程（6.252.33）年，年齡22～75歲、平均年齡（48.5416.42）歲。

1.2 方法

1.2.1 化學發(fā)光酶免疫分析法 抽取95例患者空腹靜脈血5 ml，離心取上清液（3 000 r/min）。HBV檢測：將血清標本置于放有HBV核心抗原IgM及IgG微孔反應條中，加入經(jīng)辣根過氧化酶標記的抗HBcAb-IgG抗體及抗HBcAb-IgM抗體；1 h后，采用PBS沖洗5次共15 min；加入氫氧化鈉0.1 mol/L、魯米諾30 μmol/L，靜置10 min；加入3%過氧化氫100 ml，檢測發(fā)光強度，并記錄發(fā)光儀數(shù)據(jù)。核心抗體檢測：抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體檢測均按照試劑盒步驟進行操作。

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附測定法 HBV檢測方法：將血清標本放入微孔反應條，并設置空白對照、陽性對照、陰性對照，使用封片封鎖，置于37 ℃水中；1 h后，打開微孔反應條，使用洗滌液沖洗，并將試劑盒內(nèi)A液、B液置于反應條各孔中，封板，置于37 ℃水中；30 min后加入終止液，測定OD值；若所測血清值≥臨界值，診斷為陽性。臨界值=（陰性樣品平均A值+2×標準差）。核心抗體檢測：抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體檢測均按照試劑盒步驟進行操作。

1.2.3 抗體檢測最低限評價 取2.5 mg/ml抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體陽性血清，用陰性血清稀釋。以化學發(fā)光酶免疫分析法及酶聯(lián)免疫吸附測定法分別檢測抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體水平。

1.3 觀察指標 比較兩種方法檢測HBV、核心抗體（抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體）的陽性率，并判斷兩種方法對核心抗體檢測的敏感度。

1.4 統(tǒng)計學分析 以SPSS20.0軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用率表示，進行χ2檢驗，計量資料以（）表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩種方法檢測陽性率比較 兩種方法檢測HBV陽性率比較無顯著性差異，P＞0.05；化學發(fā)光酶免疫分析法檢測抗HBcAb-IgM抗體、抗HBcAb-IgG抗體陽性率高于酶聯(lián)免疫吸附測定法，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。見表1。

表 1 兩種方法檢測陽性率比較[例（%）]

2.2 兩種方法檢測敏感度比較 酶聯(lián)免疫吸附測定法檢出抗HBcAb-IgG抗體最低濃度為0.142 IU/ ml，抗HBcAb-IgM抗體最低濃度為0.134 IU/ml；化學發(fā)光酶免疫分析法檢出抗HBcAb-IgM抗體最低濃度為0.031 IU/ml，抗HBcAb-IgG抗體最低濃度為0.037 IU/ml。化學發(fā)光酶免疫分析法檢測敏感度高于酶聯(lián)免疫吸附測定法，P＜0.05，差異有統(tǒng)計學意義。

3 討論

HBV具有較高感染率，我國HBV感染率高達70%以上，乙肝表面抗原攜帶率為總人口的7.18%[3]。HBV病毒可誘導人體對感染形成的持續(xù)性免疫出現(xiàn)耐受狀態(tài)，進而導致慢性化，增加肝癌、肝硬化發(fā)生風險。有學者指出[4]，化學發(fā)光酶免疫分析法相較于基礎酶免疫分析法，檢測敏感度可提升3～5個數(shù)量級，增加發(fā)光強度同時，延長其發(fā)光時間，提高檢測敏感度。

研究結果顯示，化學發(fā)光酶免疫分析法HBV陽性檢出率為96.84%，酶聯(lián)免疫吸附測定法HBV陽性檢出率為94.74%（P＞0.05）；化學發(fā)光酶免疫分析法檢測抗HBcAb-IgG抗體、抗HBcAb-IgM抗體陽性率及敏感度均高于酶聯(lián)免疫吸附測定法（P＜0.05）。說明兩種方法在HBV檢測中均具有較高的檢測價值，且化學發(fā)光酶免疫分析法在核心抗體檢測中具有更高的敏感度。究其原因，可能為化學發(fā)光酶免疫分析法試劑盒內(nèi)抗體不受突變影響，且能有效辨別逃逸變異株，最大程度減少人為因素影響，避免結果重復性。此外，核心抗體水平升高表明乙肝急性感染，核心抗體水平降低表明處于既往感染或恢復期內(nèi)，有助于降低漏診率及誤診率[5]。綜上所述，化學發(fā)光酶免疫分析法在HBV及核心抗體定性檢測中具有較高的應用價值，對核心抗體陽性檢出率和檢測敏感度均較高。

[1] 段海萍,王俠.化學發(fā)光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗體定性檢測中的應用分析[J].國際病毒學雜志,2016,23(1):57-59

[2] 楊梅,晏紅.化學發(fā)光免疫分析法檢測乙肝病毒感染性標志物的臨床應用[J].標記免疫分析與臨床,2016,23(4):448-450

[3] 張利,于冬男.化學發(fā)光酶免疫分析法及ELISA檢測抗-HCV的結果比較[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2016,13(1):18-20

[4] 周雙艷,趙克斌,楊澤華.化學發(fā)光微粒子免疫分析法與酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清乙型肝炎表面抗體的比對[J].中國藥物與臨床,2016,16(5):753-755

[5] 安哲,李思鵬,張妮,等.乙肝病毒e抗體檢測在乙肝病毒既往感染者中的臨床價值[J]. 現(xiàn)代預防醫(yī)學,2015,42(10):1839-1840

R446.6

B

10.13638/j.issn.1671-4040.2017.06.064

2017-05-10）