荷葉提取物降脂機(jī)理的研究

程澤華+高鵬程+甄鵬晨

近年來，由高脂造成的多種疾病困擾很多人，人們開始尋求可以緩解高脂膳食。荷葉出現(xiàn)在很多具有減肥降脂功能的中藥單復(fù)方制劑中，藥食同源，那么荷葉能否降脂呢？

材料與方法

試驗(yàn)原料及處理。荷葉原料，粉碎機(jī)粉碎，過80目篩子。

實(shí)驗(yàn)方法。

（1）膽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制0.3 mmol/L的膽酸鈉、牛磺膽酸鈉和甘氨膽酸鈉溶液，做母液備用，取上述各溶液 0、0.1、0.5、1.0、1.5 、2.0和2.5 mL 到 10 mL 的容量瓶中，加入磷酸緩沖溶液至2.5 mL，再加入60%的硫酸溶液至10 mL，在水浴鍋中水浴 20 min后冰浴 5 min，在 387 nm 處測定吸光度。以膽酸鹽的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制膽酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（2）荷葉中的黃酮、生物堿與膽酸鹽結(jié)合能力的比較

①體外模擬內(nèi)環(huán)境及與膽酸鹽的結(jié)合的方法

取一定量的樣品，加入1 mL 0.01 mol/L的鹽酸溶液，在培養(yǎng)箱中消化1h，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH到6.3，然后加入 4 mL 10 mg/mL的胰酶，在培養(yǎng)箱中消化 1h。在各個(gè)樣品中分別加入4 mL 膽酸鹽溶液，用培養(yǎng)箱振蕩1h。轉(zhuǎn)入離心管中，離心20 min。取上清液膽酸鹽進(jìn)行分析。

②PVPP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽的結(jié)合能力

分別稱取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 g的PVPP，加入20 mL 荷葉浸提液，培養(yǎng)箱中振蕩 30 min，轉(zhuǎn)入離心管中，離心 20 min。取上清液進(jìn)行體外內(nèi)環(huán)境模擬與膽酸鹽的結(jié)合。

③石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結(jié)合能力

在荷葉浸提液中加入等量的石油醚，萃取1 h，收集萃取后的荷葉浸提液，重復(fù)三次得到一次、兩次和三次處理液。取 1 mL上述處理液進(jìn)行模擬與膽酸鹽的結(jié)合。

結(jié)果與分析

三種膽酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程

膽酸鈉：y=11.80x+0.004 R2=0.998

牛磺膽酸鈉：y=17.66x+0.007 R2=0.997

甘氨膽酸鈉：y=15.62x+0.012 R2=0.997

荷葉中黃酮及生物堿與膽酸鹽結(jié)合能力比較的結(jié)果與分析。

（1）荷葉粉末、荷葉水浸提液與膽酸鹽的結(jié)合能力比較

荷葉粉末和荷葉水浸提液均能結(jié)合三種膽酸鈉，但是荷葉水浸提液的結(jié)合能力強(qiáng)，荷葉具有一定降脂作用。

（2）PPVP去除荷葉黃酮后與膽酸鹽結(jié)合能力的影響

荷葉浸提液中黃酮含量越高，其結(jié)合膽酸鹽的能力越強(qiáng)，黃酮會(huì)影響膽酸鹽在體內(nèi)的代謝，從而起到降脂的作用。

（3）石油醚去除荷葉生物堿后與膽酸鹽的結(jié)合能力

荷葉堿對(duì)荷葉浸提液結(jié)合膽酸鹽的能力具有一定的良性影響，但是沒有黃酮顯著。

荷葉提取物對(duì)脂肪酸合酶抑制率的研究。

（1）脂肪酶活性的測定

加入荷葉提取物的樣品耗堿量明顯減少，這證明了荷葉提取物對(duì)于脂肪酸合酶的活性是具備抑制作用的。

（2）荷葉黃酮與荷葉堿對(duì)脂肪酸合酶活性的影響

①PPVP去除荷葉黃酮后對(duì)脂肪酸合酶活性的影響

氫氧化鈉的消耗量隨著荷葉黃酮的量減少而增加，荷葉黃酮抑制脂肪酸合酶的活性，荷葉黃酮的量越多，對(duì)脂肪酸合酶活性的抑制能力越強(qiáng)。

②石油醚去除荷葉堿后對(duì)脂肪酸合酶活性的影響

經(jīng)過石油醚萃取的樣品的耗堿量低，可得荷葉生物堿影響脂肪酸合酶的活性。

研究表明荷葉黃酮是荷葉提取物具備降脂作用的主要因素，其機(jī)理為加強(qiáng)人體結(jié)合膽酸鹽的能力和抑制FAS的活性，荷葉生物堿對(duì)荷葉提取物的降脂作用也具備影響，但影響并不顯著。