白花蛇舌草乙醇提取物抗炎作用研究

高紅瑾 陸姍姍

白花蛇舌草乙醇提取物抗炎作用研究

高紅瑾 陸姍姍

目的 觀察白花蛇舌草乙醇提取物(EEHD)的抗炎作用。方法 采用二甲苯致小鼠耳腫脹模型［選昆明種小鼠50只, 隨機分成五組, 每組10只, 分別按125、250、500 mg/(kg·d)劑量給試驗組灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 連續8 d；對照組灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 連續8 d；空白組灌胃生理鹽水0.5 ml/(kg·d), 連續8 d］和羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)致小鼠腹腔白細胞增多模型［選小鼠50只,隨機分成五組, 每組10只, 分別按125、250、500 mg/(kg·d)劑量給試驗組灌胃白花蛇舌草乙醇提取物,連續8 d；對照組灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 連續8 d；空白組灌胃生理鹽水0.5 ml/(kg·d), 連續8 d］研究白花蛇舌草抗炎作用。結果 連續灌胃給藥8 d, 與空白組比較, 對照組及250、500 mg/(kg·d)試驗組對二甲苯所致小鼠耳腫脹有抑制作用(P＜0.05)。與空白組比較, 對照組及500 mg/(kg·d)試驗組能顯著抑制CMC-Na 引起的小鼠腹腔白細胞游走(P＜0.05)。結論 白花蛇舌草具有顯著的抗炎作用。

白花蛇舌草；提取物；抗炎

白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd., HD)為茜草科植物,有清熱解毒、利尿消腫、活血止痛等功效。白花蛇舌草的化學成分很豐富, 有黃酮類化合物、蒽醌類、萜類、甾醇類等, 其藥理作用主要有抗腫瘤、調節免疫、抗菌抗炎、抗氧化等作用, 內服多用于治療惡性腫瘤、闌尾炎、肝炎、泌尿系統感染、支氣管炎、扁桃體炎、喉炎等疾病, 外用可治療毒蛇咬傷、癰腫疔瘡等。本文研究了白花蛇舌草乙醇提取物(ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd., EEHD)在抗炎方面的藥理作用, 為其進一步開發利用提供實驗依據。

1 材料與方法

1. 1 實驗動物 昆明種小鼠, 體重18～24 g, 雌雄各半, 購于吳氏實驗動物中心, 合格證號SCX(閩)20042002, 試驗動物于室溫條件下自由飲水采食, 所喂飼料為全價條狀飼料, 購于吳氏實驗動物中心。

1. 2 藥物與試劑 白花蛇舌草乙醇提取物, 淡黃色顆粒粉末狀, 由福建醫科大學藥學院提供, 每1克提取物含生藥20 g。二甲苯(無錫市展望化工試劑有限公司, 批號150420), 阿司匹林片(合肥久聯制藥公司, 批號20140109)。

1. 3 方法

1. 3. 1 對抗二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響［1］選昆明種小鼠50只, 體重18～22 g, 雌雄各半。隨機分成五組, 每組10只,分別按125、250、500 mg/(kg·d)劑量給試驗組灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 連續8 d；對照組灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d),連續8 d；空白組灌胃生理鹽水0.5 ml/(kg·d), 連續8 d。分別于末次給藥后2 h, 在小鼠左耳兩面涂以100%二甲苯0.03 ml, 右耳不涂, 致炎后45 min處死小鼠, 沿耳廓基線剪下兩耳, 用8 mm直徑打孔器制備小鼠耳片, 用電子秤稱重,以兩耳重量之差作為腫脹度。

1. 3. 2 對小鼠腹腔白細胞游走的影響［2］選小鼠50只,雌雄各半, 隨機分成五組, 每組10只, 分別按125、250、500 mg/(kg·d)劑量給試驗組灌胃白花蛇舌草乙醇提取物, 連續8 d；對照組灌胃阿司匹林100 mg/(kg·d), 連續8 d；空白組灌胃生理鹽水0.5 ml/(kg·d), 連續8 d。末次給藥后1 h, 每只小鼠腹腔注射1% CMC-Na 1 ml, 3 h后將小鼠處死, 小鼠腹腔注射生理鹽水1 ml, 輕揉腹部, 抽取腹腔液滴于血細胞計數板上, 鏡下進行白細胞計數。

1. 4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件處理數據。計量資料以均數±標準差()表示, 各組間比較采用單因素方差分析, 用Levene法先進行方差齊性檢驗, 方差齊用Tukey HSD檢驗, 方差不齊用Games-Howell法檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 對抗二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響 與空白組比較,對照組及250、500 mg/(kg·d)試驗組對二甲苯所致小鼠耳腫脹有抑制作用(P＜0.05)。見表1。

表1 對抗二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(, mg)

表1 對抗二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(, mg)

注：與空白組比較,aP＜0.05

組別劑量［mg/(kg·d)］只數耳重差空白組 10 17.11±2.63對照組10010 7.70±5.42a試驗組12510 14.51±4.95 25010 9.94±4.27a50010 8.55±3.16a

2. 2 對小鼠腹腔白細胞游走的影響 與空白組比較, 對照組及500 mg/(kg·d)試驗組能顯著抑制CMC-Na 引起的小鼠腹腔白細胞游走(P＜0.05)。見表2。

表2 對小鼠腹腔白細胞游走的影響(, ×106/L)

表2 對小鼠腹腔白細胞游走的影響(, ×106/L)

注：與空白組比較,aP＜0.05

組別劑量［mg/(kg·d)］只數白細胞數空白組 1015.51±2.50對照組10010 10.53±2.10a試驗組1251013.18±1.90 2501012.32±3.90 50010 10.46±0.90a

3 討論

炎癥是由有害的刺激產生的一個重要的防御機制, 但也會帶來很大的損害, 如造成關節炎、哮喘和免疫失調。當前,臨床常用抗炎藥仍存在許多問題, 如胃部不適、心臟風險,因此尋找安全和有效的抗炎藥物仍然是臨床醫師的目標。急性炎癥時炎癥因子能刺激機體產生細胞因子, 導致毛細血管滲出、組織水腫、低血壓、發熱等不良反應［3］。作者選擇二甲苯致耳廓腫脹、CMC-Na 致腹腔炎癥這兩種常見的炎癥模型, 發現白花蛇舌草乙醇提取物具有顯著的抗炎作用。

白花蛇舌草是一種廣泛使用的中藥。目前, 已經從白花蛇舌草中分離鑒定蒽醌類、黃酮類、萜類等69種化合物［4］。它具有多種藥用特性, 包括抗氧化、抗炎和抗癌作用［5］。然而, 由于傳統的中藥化學成分的復雜性, 使得它很難向世界傳播［6-10］, 所以單一有效成分的抗炎機制值得進一步研究。同時, 這些有效成分經口服的吸收情況, 值得進一步利用生物藥物分析的方法開展實驗研究。

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Study on the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd.

GAO Hong-jin, LU Shan-shan. Department of Pharmacy, Fujian Provincial Hospital, Fuzhou 350001, China

Objective To observe the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd. (EEHD). Methods Xylene-induced mouse ear swelling model ［a total of 50 Kunming mice were randomly divided into five groups, with 10 mice in each group. The ethanol extract of Hedyotis diffusa Willd. was administered to the experimental group respectively at the dose of 125, 250 and 500 mg/(kg·d) for 8 days. The control group

intragastric administration of aspirin 100 mg/(kg·d) for 8 days. The blank control group received intragastric administration of 0.5 ml/(kg·d) physiological saline for 8 days］ and sodium carboxymethyl cellulose (CMC-Na) on murine peritoneal leukocyte proliferation model ［ A total of 50 mice were randomly divided into five groups, with 10 mice in each group. The ethanol extract of Hedyotis diffusa was administered to the experimental group respectively at the dose of 125, 250 and 500 mg/(kg·d) for 8 days. The control group received intragastric administration of aspirin 100 mg/(kg·d) for 8 days. The blank control group received intragastric administration of 0.5 ml/(kg·d) physiological saline for 8 days.］ were used to study the anti-inflammatory effect of ethanol extract of Hedyotis diffusa. Results After 8 d of intragastric administration, the control group and 250, 500 mg/(kg·d) experimental group had inhibitory effect on Xylene-induced mouse ear swelling comparing with the blank control group (P＜0.05). The control group and 500 mg/(kg·d) experimental group can significantly inhibit CMC-Na-induced mouse intraperitoneal leukocyte migration, comparing with the blank control group (P＜0.05). Conclusion Hedyotis diffusa Willd. has significant anti-inflammatory effect.

Hedyotis diffusa Willd.; Extract; Anti-inflammatory

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.15.113

2017-06-14］

350001 福建省立醫院藥學部(高紅瑾)；福建醫科大學藥學院(陸姍姍)